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| 1 | 应用GPV VP3基因重组原核表达产物建立检测抗体的ELISA方法研究显示文摘利用鹅细小病毒(GPV)VP3基因的原核表达蛋白作为包被抗原建立了检测GPV抗体的间接ELISA及Dot-ELISA方法。经确定两种方法的抗原包被浓度为125μg/mL,其中间接-ELISA 100μL/孔、Dot-ELISA 5μL/点。间接-ELISA中HRP标记的兔抗鹅IgG的工作浓度是1:200,检测血清的最适稀释度是1:400,阳性判定标准为OD492≥0.20,且P/N≥2.0。用此方法检测弱毒疫苗免疫血清,其抗体滴度在1:400~1:51200。Dot-ELISA的结果与间接-ELISA的结果一致。 | 布日额 李宝臣 马波 王君伟 Ulrich Neumann | 2006 | 畜牧兽医学报2006,37,2: | 15 |
| 2 | 用地高辛标记核酸探针检测鹅细小病毒的研究显示文摘从带有鹅细小病毒(GPV)NS1基因的重组质粒pMD18T NS1用限制性内切酶EcoRI和BamHI双酶切回收1880bp大小片段,并制备出地高辛标记的GPV核酸探针。其标记效率达到0 01pg/μl。特异性检测结果表明,该探针能与GPV不同毒株核酸发生特异性杂交,而与对照的DPV、GPPV等病毒的核酸杂交反应均为阴性;敏感性检测结果表明,该探针对GPV的最低检出量为0 0224pg。该探针对不同方法处理的GPV感染病料进行检测,均出现杂交阳性。表明所研制的标记探针用于GPV的检测是可行的。 | 布日额 王君伟 吴金花 孙红梅 Ulrich Neumann | 2004 | 畜牧兽医学报2004,35,1: | 14 |
| 3 | 鹅细小病毒VP1与VP3非重叠序列的克隆与原核表达显示文摘根据鹅细小病毒 GPV H1株基因组核苷酸序列设计了一对引物 ,对其结构蛋白 VP1与 VP3非重叠核苷酸序列进行 PCR扩增 ,并克隆到表达性载体 p GEX- 6 p- 1,经酶切鉴定筛选出阳性克隆 ,并转化到大肠杆菌 BL 2 1(ED3) plys S进行原核表达 ,并用 SDS- PAGE鉴定 ,结果表明融合蛋白在表达性细菌 BL2 1中重获得了高效表达。 | 布日额 王君伟 吴金花 李勐 马广鹏 Ulrich Neumann | 2003 | 中国兽医杂志2003,39,10: | 9 |
| 4 | 鹅细小病毒VP2基因原核及真核表达载体的构建显示文摘将鹅细小病毒VP2基因克隆到原核表达载体 pPROEX HTb及真核转移载体pFASTBAC HTb中 ,重组真核转移载体在DH10BAC 中经转座作用 ,成功构建了表达VP2基因的原核表达载体pPROEX HTb VP2和杆状病毒表达载体BAC VP2。经限制性内切酶酶切及PCR分析 。 | 贺云霞 王君伟 马广鹏 王立群 Ulrich Neumann | 2003 | 中国兽医科技2003,33,5: | 5 |
| 5 | 鹅细小病毒NS1基因的克隆及原核表达显示文摘本研究根据 Gen Bank发表的 GPV B株全基因核苷酸序列 ,设计了 1对用以扩增 GPV主要非结构蛋白 NS1基因的引物。通过 PCR技术 ,扩增出 NS1完整基因片段 1.9kb。将 PCR产物克隆到 p MD 18- T载体后进行序列测定及分析 ,结果表明 :GPV H1株 NS1基因全长 1884 bp,编码 6 2 7个氨基酸 ,与国外已发表的 B株核苷酸序列同源性为 98.15 %。同时将该目的基因正向插入到 GST融合蛋白原核表达载体 PGEX- 6 P- 1的 Bam H 多克隆位点 ,构建了 GPV NS1的原核表达载体 ,成功的表达了约 97KD的 NS1融合蛋白。 | 王君伟 李勐 马波 布日额 刘宝全 Ulrich Neumann | 2004 | 中国兽医杂志2004,40,1: | 5 |
| 6 | 鹅细小病毒VP2基因在大肠杆菌中的表达及纯化显示文摘将鹅细小病毒 (GPV) VP2基因插入原核表达载体 p PROEX- HTb,获得重组表达质粒 p PROEX- HTb- VP2。将其转化大肠杆菌 DH5α,用 IPTG诱导表达 ,表达菌体蛋白中可产生与预期大小相符的约 72 0 0 0的蛋白。以光密度扫描对该表达产物进行定量分析 ,表达产物约占菌体总蛋白的 14 %。经 His- tag金属螯合层析纯化 ,获得纯度较高的 6 His- VP2融合蛋白。 Western- blot结果表明 ,所得蛋白与鹅抗 GPV高免血清有较好的免疫反应性 ,说明在 VP2的 N端融合 6个组氨酸不影响其与特异抗体结合的活性。 | 贺云霞 王君伟 王立群 Ulrich Neumann | 2004 | 中国兽医学报2004,24,2: | 4 |
| 7 | 鹅细小病毒VP1-VP3非重叠序列地高辛探针的制备和应用显示文摘根据 GPV H1株核苷酸序列 ,设计了扩增 VP1- VP3基因非重叠序列的 1对引物 ,对其结构蛋白 VP1与 VP3非重叠核苷酸序列进行 PCR扩增 ,将 PCR产物纯化、回收后制备出 GPV VP1- VP3基因 DIG标记核酸探针 ,其标记效率达到0 .1pg/μl。特异性检测结果表明 ,该探针能与 GPV不同毒株核酸发生特异性杂交 ,而与对照的 DPV、GPMV等病毒的核酸杂交反应均为阴性 ;敏感性检测结果表明该探针对 GPV的最低检出量为 0 .0 32 ng。上述试验结果表明该探针可以用于 | 布日额 王君伟 吴金花 马波 Ulrich Neumann | 2005 | 中国兽医杂志2005,41,1: | 2 |
| 8 | GPV VP1-VP3非重叠序列重组原核表达多肽的应用研究显示文摘 | 布日额 王君伟 吴金花 贾伟星 马波 范铁力 李勐 Ulrich Neumann 李哲迁 | 2007 | 中国兽医杂志2007,43,7: | 2 |
| 9 | Reduced expression of Ca^(2+)-regulating proteins in the upper gastrointestinal tract of patients with achalasia显示文摘AIM: To compare expression of Ca2+-regulating proteins in upper gastrointestinal (GI) tract of achalasia patients and healthy volunteers and to elucidate their role in achalasia. METHODS: Sarcoplasmic reticulum Ca2+ ATPase (SERCA) isoforms 2a and 2b, phospholamban (PLB), calsequestrin (CSQ), and calreticulin (CRT) were assessed by quantitative Western blotting in esophagus and heart of rats, rabbits, and humans. Furthermore, expression profi les of these proteins in biopsies of lower esophageal sphincter and esophagus from patients with achalasia and healthy volunteers were analyzed. RESULTS: SERCA 2a protein expression was much higher in human heart (cardiac ventricle) compared to esophagus. However, SERCA 2b was expressed predominantly in the esophagus. The highest CRT expression was noted in the human esophagus, while PLB, although highly expressed in the heart, was below our detection limit in upper GI tissue. Compared to healthy controls, CSQ and CRT expression in lower esophageal sphincter and distal esophageal body were signif icantly reduced in patients with achalasia (P < 0.05). CONCLUSION: PLB in the human esophagus mightbe of lesser importance for regulation of SERCA than in heart. Lower expression of Ca2+ storage proteins (CSQ and CRT) might contribute to increased lower esophageal sphincter pressure in achalasia, possibly by increasing free intracellular Ca2+. | Harald Fischer Judith Fischer Peter Boknik Ulrich Gergs Wilhelm Schmitz Wolfram Domschke Jan W Konturek Joachim Neumann | 2006 | World Journal of Gastroenterology2006,12,37: | 1 |
| 10 | Real-Tirae Object Tracking for Augmented Reality Combining Graph Cuts and Optical Flow显示文摘 | Jonathan Mooser’Suya You Ulrich Neumann | 2007 | 6th IEEE and ACM International Symposium on Mixed and Augmented Reality2007,,: | 1 |
| 11 | 显示文摘 | Ulrich Neumann Berthold Wiege Siegfried Warwel | 2002 | Starch2002,54,: | 1 |
| 12 | Does parental homework involvement mediate the relationship between family background and educational outcomes?显示文摘 | Hanna Dumont Ulrich Trautwein Oliver Lüdtke Marko Neumann Alois Niggli Inge Schnyder | 2011 | Contemporary Educational Psychology2011,,1: | 1 |
| 13 | Long-Term Outcome of Liver Resection and Transplantation for Caroli Disease and Syndrome显示文摘 | Frank Ulrich Johann Pratschke Andreas Pascher Ulf P. Neumann Enrique Lopez-H?nninen Sven Jonas Peter Neuhaus | 2008 | Annals of Surgery2008,,2: | 1 |
| 14 | Large-scale climatic variability and radial increment variation of Picea abies (L.) Karst. in central and northern Europe显示文摘 | Harri M?kinen Pekka N?jd Hans-Peter Kahle Ulrich Neumann Bj?rn Tveite Kari Mielik?inen Heinz R?hle Heinrich Spiecker | 2003 | Trees2003,,2: | 1 |
| 15 | Eighteen years of liver transplantation experience in patients with advanced Budd-Chi- ari syndrome显示文摘 | Ulrich F Pratschke J Neumann U | 2008 | Liver Transpl2008,14,2: | 1 |
| 16 | Optimization of Loads in Piping Systems by the Realistic Calculation Method Applying Fuid-Structure-Interation(FSI) and Dynamic Friction 显示文摘 | Tilman Diesselhorst Ulrich Neumann | 2005 | Journal of Pressure Vessel Technology2005,127,1: | 1 |