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1小鹅瘟的研究进展显示文摘本文对小鹅瘟的临床症状、危害、病原学、疾病的诊断和防制等方面的研究进展进行了综述,重点介绍了该病的特征和病原的生物学特性,并对鹅细小病毒新的研究方向做出了展望。李福伟 李惠敏 张桂红 吴玄光 2006广东畜牧兽医科技2006,31,4:12
2犬细小病毒VP2蛋白的原核表达与纯化显示文摘为了研究犬细小病毒(canine parovirus,CPV)VP2蛋白的结构和功能,本试验对CPV VP2蛋白进行表达和纯化。采用大肠杆菌表达外源蛋白的方法,将CPVVP2基因插入原核表达载体pET-32a(+)中构建重组原核表达载体pET-VP2,转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,在不同IPTG浓度、诱导温度和诱导时间条件下进行原核表达,确定最佳诱导条件。最佳条件下的诱导产物经超声破碎离心后,利用镍柱对重组蛋白进行纯化并用SDS-PAGE和Western blotting进行双重鉴定。结果显示,重组质粒pET-VP2经双酶切鉴定分别获得大小为5 900bp左右的载体条带和1 755bp左右的目的基因条带,成功构建了pET-VP2重组质粒;重组VP2蛋白的分子质量约为64ku,与预期大小一致,且在37℃、1.0mmol/L IPTG、诱导5h条件下表达量最高,条带最亮;蛋白超声破碎后经SDS-PAGE发现,只在沉淀中出现了目的条带,而上清中并未出现相应条带,说明重组蛋白均以包涵体的形式存在;纯化后获得的重组蛋白,经SDS-PAGE和Western blotting双重鉴定,均在64ku处出现条带,说明纯化后的蛋白为重组蛋白pET-VP2。本试验通过对CPV VP2蛋白的原核表达及纯化成功获得了大量纯度较高的CPV VP2蛋白,为今后制备CPV VP2蛋白多克隆抗体及进一步研究该蛋白在对治疗犬细小病毒病中的临床应用价值提供了基础理论依据。龙丹丹 嵇辛勤 段志强 阮涌 陈强 雷云 万彪 胡焱 2018中国畜牧兽医2018,45,3:8
3鹅细小病毒单克隆抗体的制备与鉴定显示文摘为制备鹅细小病毒(goose parvovirus,GPV)单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb),利用浓缩的GPV免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术,经间接ELISA方法筛选和有限稀释法克隆后获得一株抗GPV单克隆抗体杂交瘤细胞株4B4。经鉴定,其McAb的重链为IgG1亚型,轻链为κ链。ELISA和Western blotting试验结果表明,获得的4B4株McAb可特异性的识别GPV和GPV-VP3蛋白,表明4B4株McAb识别的表位可能位于GPV VP3蛋白的保守区域。为进一步鉴定GPV的表位和GPV诊断试剂的研究奠定了基础。杜秋明 鲁承 高建伟 赵文婧 申峰勇 孟其麟 2011中国畜牧兽医2011,38,2:7
4小鼠抗鹅细小病毒VP3蛋白单克隆抗体的制备显示文摘采用杂交瘤技术,用纯化的鹅细小病毒(Goose parvovirus,GPV)VP3蛋白免疫Balb/c小鼠制备单克隆抗体(mAb),经间接ELISA方法筛选和有限稀释法进行3次亚克隆后获得一株抗鹅细小病毒VP3蛋白杂交瘤细胞株(4E5)。经鉴定,该mAb为IgG1亚型,轻链为κ链。Western blot试验结果表明,获得的4E5mAb可特异性地识别鹅细小病毒VP3蛋白。本试验成功制备了抗鹅细小病毒VP3蛋白单克隆抗体,为研究鹅细小病毒病诊断方法奠定了基础。赵文婧 鲁承 杜秋明 高旭 高建伟 申峰勇 张颖 袁娜 房靖添 2011动物医学进展2011,32,12:1
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