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1结核分枝杆菌多位点可变数目串联重复序列分型方法标准化操作程序的建立显示文摘目的建立结核分枝杆菌多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA)的标准化方法,评价该方法的分型能力、应用价值。方法选取15个位点,采用核酸提取、PCR和琼脂糖凝胶电泳等技术,结合BioNumerics(Version5.0)软件,对中国54株结核分枝杆菌临床分离株进行分型。结果确定标准化的MLVA方法,包括细菌分离培养、核酸提取、PCR、琼脂糖凝胶电泳等实验步骤及标化参数的相关数据分析软件的使用。VNTR位点确定为ETRA、ETRB、ETRC、ETRD、ETRE、MIRU10、MIRU16、MIRU23、MIRU26、MIRU27、MIRU39、MIRU40、Mtub21、Mtub30和Mtub39。结论建立MLVA标准化技术方案,该方法操作简便,分型鉴定能力及实验室间结果可比性强,便于网络化,有利于结核病流行中追溯传染源,分析流行趋势。吕冰 Christine Pourcel 刘敬华 董海燕 张媛媛 蒋毅 刘志广 赵秀芹 万康林 2008中华流行病学杂志2008,29,9:27
2MLVA和Spoligotyping用于西藏地区216株结核分枝杆菌临床分离株的基因分型研究显示文摘目的评价间隔区寡核苷酸分型(Spoligotyping)及多位点可变数量串联重复序列分析(MLVA)两种分型方法在西藏地区结核病分子流行病学中的应用。方法收集西藏地区结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)临床分离株,应用Spoligotyping及MLVA两种分型方法进行比较分析。结果共在西藏地区收集到216株结核分枝杆菌临床分离株,采用Spoligotyping分型方法,216株菌可分为3个基因群13种基因型,其中最大的1个基因群即北京家族(Beijing family)含有195株菌,占90.28%。北京家族菌株中,有BCG接种史者占45.64%(89/195),无BCG接种史者占54.36%(106/ 1195),两者间的差异无统计学意义(x^2=0.059,P>0.05)。采用MLVA分型方法,216株菌可分成19个基因群108种基因型,其中80种基因型只有1株菌,占37.03%(80/216),另有136株菌表现出28种基因型,成簇数为28,占62.96%(136/216)。在20个VNTR位点的等位基因多态性发现Miru31位点的多态性最高,多态性指数(h)达到0.77,而Mtub29、Mtub12位点的多态性较差,都低于0.05。其中Mtub02位点可鉴别北京家族和非北京家族,它鉴别的北京家族与Spoligotyping鉴别的北京家族符合率达到100%。结论西藏地区结核分枝杆菌具有明显的接引多态性,其主要流行型为北京家族。北京家族菌株与BCG接种无相关性。应用Spoligotyping和MLVA两种分型方法进行结核病流行病学研究,将提高结核病的流行病学调查和病原学监测效果。石荔 杨敏 Christine Pourcel 董海燕 尼玛彭多 张嫒媛 朗珍 吕冰 蒋毅 魏淑贞 范昕建 万康林 2007中华微生物学和免疫学杂志2007,27,8:19
3The Formation of Anthocyanic Vacuolar Inclusions in Arabidopsis thaliana and Implications for the Sequestration of Anthocyanin Pigments显示文摘Anthocyanins 是在大多数植物的大中央液泡积累的 flavonoid 颜料。在液泡内, anthocyanins 能被发现一致地分布式或作为 sub-vacuolar 颜料身体的部分, Anthocyanic Vacuolar 包括(AVI ) 。用作为一个模型在 anthocyanin 引入的条件下面变得理解 AVI 怎么被形成的 Arabidopsis 幼苗,我们这里证明 AVI 的累积强烈与 cyanidin 3 配糖物(C3G ) 和衍生物的形成相关。在 5-O 位置(5gt 异种) 失败到 glycosylate anthocyanidins 的 Arabidopsis 异种积累 AVI 在几乎子叶的每个表皮的房间作为与野类型的幼苗相比,在的地方仅仅房间表演 AVI 的小部分。当幼苗与 vanadate 被对待时,类似的现象被观察。在 AVI 的形成为 autophagy 加亮一个角色,我们证明防碍 autophagic 过程(atg 异种) 的各种各样的异种显示 AVI 的更低的数字,除了 anthocyanins 的减少的累积。有趣地, vanadate 在 atg 异种增加 AVI 的数字,建议几条小径可能参予 AVI 形成。一起拿,我们的结果为能够积累 anthocyanin 颜料的 sub-vacuolar 分隔空间的形成建议新奇机制。Lucille Pourcel Niloufer G. Irani Yuhua LU Ken Riedl Steve Schwartz Erich Grotewold 2010Molecular Plant2010,3,1:14
47个VNTRs用于65株中国分离的结核分枝杆菌基因多态性研究显示文摘目的 应用数目可变串联重复位点 (variablenumberoftandemrepeats ,VNTRs)分子分型技术 ,初步探讨我国结核分枝杆菌的基因多态性特征。方法 采用PCR和琼脂糖凝胶电泳技术 ,对结核分枝杆菌的 11个数目可变重复位点进行检测 ,并应用Gel Proanalyzer 3.1软件和BioNumerics(Ver sion 3.0 )软件进行结果分析 ,分析结核分枝杆菌DNA多态性特征。结果 选取结核分枝杆菌基因组中的 7个 (ETR A、ETR B、ETR C、ETR D、ETR E、ETR F、MPTR A)具有明显多态性特征的串联重复位点 ,检测分析了 6 5株来自安徽、湖南和江苏省的结核分枝杆菌 ,结果显示被测菌株可分为 10个不同的基因型 ,其中以 2个型别为主 ,占总菌株数的 6 9.2 % ,其他菌株呈散在分布。结论 采用VNTR分型技术初步分析表明 ,中国结核分枝杆菌具有明显的基因多态性 ,且存在主要流行菌群。刘敬华 Christine Pourcel 赵秀芹 万康林 刘志广 张媛媛 王庆 谭云洪 许卫国 2004中华微生物学和免疫学杂志2004,24,9:13
5IS6110限制性片段多态性分析标准方法的建立及其在结核分枝杆菌分子分型中的应用显示文摘目的建立IS6110限制性片段多态性分析(IS6110一RFLP)标准方法并评价该方法的分型能力。方法采用核酸提取、PCR、限制性内切酶分析、Southern杂交、琼脂糖凝胶电泳等技术,结合Gel—Proanalyzer3.1和BioNumerics(Version5.0)软件,对78株结核分枝杆菌插入序列IS6110-RFLP进行分析。结果确定标准化的IS6110-RFLP技术,包括核酸提取、PCR、限制性内切酶分析、Southern杂交、琼脂糖凝胶电泳等实验步骤及标化参数的相关数据分析软件的使用;采用该技术,将78株结核分枝杆菌分为75个不同的基因型,分别归属于11个基因簇,其中有52株归属于同一个基因簇,占菌株总数的66.7%(52/78)。结论建立标准化的IS6110-RFLP技术方案,该方法具有很强的基因分型和株水平鉴定能力,可用于结核病的病原学监测。刘敬华 Kristin Kremer Christine Pourcel Arnout Mulder 刘志广 赵秀芹 万康林 2008中华流行病学杂志2008,29,8:5
6Transcription of S gene in transgenic mice is associated with hypomethylation at specific site and with Dnase I Sensitivity 显示文摘Pourcel C Tiollais P Farza H 1990J Virl1990,64,:1
7Improved multiple-locus variable-number tandem-repeat assay for Staphylococcus aureus genotyping,providing a highly informative technique together with strong phylogenetic value显示文摘Pourcel C Hormigos K Onteniente L 2009Clin Microbiol2009,47,10:1
8The CRISPRdb database and tools to display CRISPRs and to generate dictionaries of spacers and repeats 显示文摘Grissa I Vergnaud G Pourcel C 2007BMC Bioinformatics2007,8,1:1
9Tan- dem repeats analysis for the high resolution phylogenet- ic analysis of Yersinia pestis显示文摘Pourcel C Andre-Mazeaud F Neubauer H at el 2004BMC Microbiol2004,4,:1
10Cloning and characterization of a UV-B-inducible maize flavonol synthase 显示文摘Ferreyra M L F Rius S Emiliani J Pourcel L Feller A Morohashi K Casati P Grotewold E 2010The Plant Journal2010,62,1:1
11Formation of the pool of covalenfly closed circular viral DNA in hepadnavirus-infected cells 显示文摘Tuttleman JS Pourcel C Summers J 1986Cell1986,47,3:1
12Replication and gene expression of hepatitis B virus in a transgenic mouse that contains the complete viral genome显示文摘Farza H Hadchouel M Scotto J Tiollais P Bahinet C Pourcel C 0,,:1
13Identification of variablenumber tandem-repeat (VNTR) sequences in legionella pneumophila and development of an optimized multiple-locus VNTR analysis typing scheme显示文摘Pourcel C Visca P Afshar B el al 2007J Clin Microbiol2007,45,4:1
14PEGylated PLGA-based nanoparticles targeting M cells for oral vaccination显示文摘Garinot M Fievez V Pourcelle V 0,,3:1
15CRISPRFinder: a web tool to identify clustered regularly interspaced short palindromic repeats显示文摘Grissa I Vergnaud G Pourcel C 2007Nucleic Acids Research2007,35,:1
16The CRISPRdb data- base and tools to display CRISPRs and to generate dic- tionaries of spacers and repeats 显示文摘Grissa I Vergnaud G Pourcel C 2007BMC Bioinformat- ics2007,8,:1
17CRISPR elements in Yersinia pestis acquire new repeats by preferential uptake of bacteriophage DNA, and provide additional tools for evolutionary studies 显示文摘Pourcel C Salvignol G Vergnaud G 2005Microbiology2005,151,3:1
18Tandem repeats analysis for the high resolution phylogenetic analysis of Yersinia pestis显示文摘Pourcel C Andre-Mazeaud F Neubauer H 2004BMC Microbiol2004,4,:1
19Transparent TESTAIO encodes a laccase-like enzyme involved in oxi- dative polymerization of flavonoids in arabidopsis seed coat显示文摘Pourcel L Routaboul J M Kerhoas L 2005Plant Cell2005,17,:1
20CRISPR elements in Yersinia pestis acquire new repeats by prefer- ential uptake of bacteriophage DNA, and provide addition- al tools for evolutionary studies 显示文摘POURCEL C SALVIGNOL G VERGNAUD G 2005Microbiology2005,151,3:1
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