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1错配修复基因hMLH3在家族性胃癌中的突变显示文摘目的:检测错配修复基因hMLH3在家族性胃癌中的突变情况,以探讨hMLH3在家族性胃癌中的作用. 方法:采用聚合酶链反应(PCR)、变性高效液相色谱分析(DHPLC)和直接测序法,检查有遗传背景的16个胃癌家系(共84名成员)的错配修复基因hMLH3突变情况.胃癌家系选择参考以下标准:(1)至少连续两代;(2)至少2例胃癌患者;(3)至少有1例患者为其他患者的一级亲属;(4)至少有1 例患者50岁前被诊断出胃癌. 结果:所有样品的外显子均成功进行PCR扩增,DHPLC分析和基因测序.共在5个家系中发现5处错义突变(31.3%, 5/16),4处在外显子1,另外1处在外显子12.家系6中hMLH3的突变与胃癌发生呈现出较强的相关性,而另外几个家系中的突变情况与胃癌没有表现出明显的相关性.在散发性胃癌及正常对照中未发现突变的存在. 结论:hMLH3基因在家族性胃癌发生中可能为一低风险基因,他可能通过与其他基因互相叠加、共同起作用.赵成海 刘宏旭 卜献民 2004世界华人消化杂志2004,12,5:5
2BAK基因过表达对胃癌细胞的诱导凋亡作用及其分子机制显示文摘目的:探讨转染外源性BAK基因及其过表达对胃癌细胞的诱导凋亡作用和分子机制. 方法:构建携带有BAK基因的真核表达载体并转染胃癌MKN-45细胞1-5 d后,RT-PCR和Western Blotting法检测BAK基因表达;细胞计数、MTT比色法检测癌细胞生长活性,流式细胞仪分析细胞周期时相改变,透射电镜、末端TdT酶标记技术检测癌细胞凋亡;比色法检测癌细胞内Caspase-3活性改变. 结果:转染1-5 d后,癌细胞BAK mRNA和蛋白表达水平显著增强(P<0.0 1),癌细胞体外生长抑制11.6-35.3% (P<0.01),增生活性抑制10.2-32.4%(P<0.01),细胞周期出现G0/G1期阻滞,部分癌细胞出现胞体缩小、核固缩等凋亡形态学改变,凋亡率为21.4%(P<0.01);癌细胞Caspase-3活性增强4.45倍(P<0.01). 结论:转染外源性BAK基因使其过表达能激活Caspase- 3,显著诱导胃癌MKN-45细胞凋亡,有望成为胃癌治疗的新途径.郑丽端 童强松 刘俊 汪良 钱伟 2004世界华人消化杂志2004,12,5:3
3基于杂交的基因差异表达技术在人胃癌研究中的应用显示文摘寻找胃癌与正常胃黏膜及癌旁组织的差异基因对全面阐明胃癌发生发展及转移的分子机制具有重要意义。目前,基于杂交的基因差异表达分析技术已广泛用于寻找疾病以及细胞生长发育不同阶段的相关基因。此文就基于杂交的基因差异表达技术的原理、特点以及在人胃癌研究中的应用作一综述。陈怡 姒健敏 2007国际消化病杂志2007,27,4:0
4K562细胞消减cDNA文库的构建及初步鉴定显示文摘背景与目的:消减杂交技术是一种寻找和克隆差异基因的方法。本研究目的是通过快速、高质量构建消减cDNA文库,筛选K562细胞中差异表达基因。方法:以用限制性显示(restriction display,RD)技术制备的K562细胞cDNA片段作为消减对象,以正常人淋巴细胞的Sau3AⅠ酶解cDNA片段对其进行消减。经过消减后的RD片段被分组扩增出来,并克隆于T载体中,挑选阳性克隆进行测序并进行初步分析。结果:构建的K562细胞消减cDNA文库,包含360个阳性克隆,插入片断大小范围在200~800bp之间,选取50个克隆进行测序分析,结果为来源于42个已知基因。结论:利用自行建立的消减杂交法,成功构建了特异性K562细胞消减cDNA文库,文库质量可靠,可用于进一步筛选及克隆K562细胞中差异表达基因。宋艳斌 马文丽 冯春琼 石嵘 毛向明 张宝 郑文岭 2005癌症2005,24,5:0
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