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| 1 | 类风湿关节炎患者外周血与病变部位自身反应性T细胞的免疫学特征显示文摘目的研究类风湿关节炎(RA)外周血与病变部位自身反应性T细胞亚群的差异性。方法分析了35例RA患者滑膜液中与外周血T细胞的免疫表型、表面活化标志、Ⅱ型胶原和热休克蛋白70(HSP70)的反应频率与V茁的限制性取用。用流式细胞术分别测定滑膜液和外周血淋巴细胞表型和活化标志;采用标准3H-TdR掺入法分析了关节滑膜液中浸润的淋巴细胞对Ⅱ型胶原(CⅡ)和HSP70的反应频率,用半定量聚合酶链反应(PCR)检测了RA患者的V茁的限制性取用。结果滑膜液中CD4+T细胞与外周血中CD4+T细胞百分比相同,分别为40.0%和41.0%,滑膜液中CD8+T细胞比例升高,CD4/CD8细胞比值显著低于外周血。同时滑膜液中表达CD3和CD25的活化T细胞占(16±6)%,比外周血高。这群CD3/CD25双阳性T细胞对CⅡ和HSP70的反应频率增高。虽然外周血和滑膜液中T细胞受体均以琢茁TCR为主(70±16)%。但是进一步用流式细胞术分型检测其BV亚家族的取用特征,发现滑膜液中T细胞受体表现出限制性取用V茁14、16和17。结论在RA滑膜液中T细胞亚群明显不同于外周血;表现为活化细胞增多,对自身抗原的反应频率增高及T细胞受体的限制性取用。 | 沈佰华 王利 张继英 聂红 余奇文 陈广洁 程琳玲 柏峻 李宁丽 张冬青 冯国璋 戴号 夏青 胡冬仪 许荣 倪立清 | 2004 | 中华风湿病学杂志2004，8，8： | 5 |
| 2 | 类风关滑膜浸润T细胞特性与致病机制研究显示文摘为研究类风湿关节炎时关节滑膜浸润性T细胞生物学特性与致病机制 ,对 10例RA患者滑膜液中淋巴细胞的免疫表型、细胞因子分泌格局与趋化因子受体表达进行了分析。用双色荧光标记法分别测定滑膜液中和外周血淋巴细胞表型与趋化因子受体表达。用ELISA方法检测滑膜液与外周血中IFN γ、IL 10、IL 4与IL 12的含量。结果是滑膜液中的CD4 + T淋巴细胞为 4 0 0 %± 11% ,CD8+ T细胞为 34 0 %± 6 % ,CD4 + 与CD8+ T细胞的比值为 1 2 ,显著低于外周血中CD4 /CD8的比值。滑膜液中CD3和CD2 5双阳性的活化T细胞占 16 %± 6 0 %。趋化因子受体CCR5表达较低 ,与外周血无明显差异。但CX CR3表达水平较高 ,为 16 %± 4 0 % ,远远高于外周血 (仅为 0 5 %± 0 3% )。IFN γ在滑膜液中含量很高 ,达 (36 6 7± 4 3 2 )pg/ml,而外周血中含量仅为 (2 0 1± 3 2 )pg/ml。IL 4含量未能测得 (<15pg/ml ) ,与外周血相似。IL 12含量为 (4 19 9±89 2 )pg/ml,远高于外周血中的含量 (6 5 32± 34 2 )pg/ml。IL 10含量为 (187 7± 34 5 )pg/ml,高于外周血中的含量 (85±12 7)pg/ml。在所测细胞因子中 ,关节滑膜液中IFN γ和IL 12的含量与外周血相比具有显著的统计学差异。表明RA关节滑膜液中有相当数量的T细胞浸润。 | 邱潮林 梅虹 周翔 费新娣 沈佰华 王利 余奇文 张继英 张冬青 李宁丽 | 2003 | 上海免疫学杂志2003，23，6： | 4 |
| 3 | 类风湿性关节炎患者抗胶原蛋白Ⅱ抗体及其自身反应性T淋巴细胞的检测显示文摘目的:分析类风湿性关节炎(RA)患者T淋巴细胞免疫应答及抗胶原蛋白Ⅱ(CⅡ)抗体的异常表现。方法:应用流式细胞仪分析22例RA及6例骨关节炎(OA)患者外周血和关节滑膜液(SF)中T淋巴细胞免疫表型和趋化因子受体的表达。选用HSP-65和胶原蛋白Ⅱ(CⅡ)抗原诱导和分析患者自身反应性T淋巴细胞克隆频率,采用经典的酶联免疫吸附试验(ELISA)检测患者外周血和SF中抗CⅡ抗体以及IFN-γ、IL-10、IL-4和IL-12的含量。结果:RA患者关节SF中CD4+/CD8+T淋巴细胞的比值为1.09,显著低于外周血中CD4+/CD8+T淋巴细胞比值(2.02);SF中CD3+/CD25+双阳性的活化T淋巴细胞占(15.9±9.6)%。SF中T淋巴细胞表面趋化因子受体CCR5表达较低,与外周血相比无统计学意义,但趋化因子受体CD25+/CXCR3+表达量较高,为(16.0±4.0)%,远远高于外周血T淋巴细胞[仅为(0.5±0.3)%](P<0.01)。ELISA检测结果表明RA患者关节SF中抗CⅡ抗体阳性率明显高于其血清以及OA患者SF和血清;RA患者SF中IFN-γ、IL-12的含量高于外周血。来自RA患者病灶关节SF单个核细胞(SFMC)较外周血单个核细胞(PBMC)对HSP-65抗原和CⅡ的诱导具有更高的自身反应性T淋巴细胞应答频率(分别为8.5×10-6和11.5×10-6)。结论:RA患者关节SF中存在高活化状态的T淋巴细胞,其对CⅡ的高克隆反应频率以及SF中高表达抗CⅡ抗体,均提示自身反应性T淋巴细胞的浸润是造成患者病灶区组织损伤的关键因素。 | 缪怡 徐雪亮 黄秋愉 胡朝英 钱柳 余奇文 张继英 | 2010 | 诊断学理论与实践2010，9，4： | 3 |
| 4 | 类风湿关节炎患者蛋白聚糖aggrecan G1区特异性T细胞诱导SCID小鼠产生膝关节炎的实验研究显示文摘目的探讨针对蛋白聚糖的自身免疫反应在类风湿关节炎(RA)发病中的作用。方法从人软骨细胞中克隆获得ag-grecanG1区的cDNA片段,应用杆状病毒表达系统获取重组人aggrecanG1区蛋白(rAG1)。用rAG1刺激来自RA患者关节液的单个核细胞,采用β-液闪计数仪对培养细胞进行放射性检测并计算刺激增长指数(SI),取SI超过3者为rAG1特异性T细胞。将取自3个人的rAG1特异性T细胞克隆腹腔注射至8只SCIDBeige小鼠,同时在小鼠左膝注射rAG1。于注射后第8天处死小鼠,取双膝关节行组织病理学检查,观察炎细胞浸润及软骨和骨糜烂情况。结果从RA患者关节液单个核细胞分离得到rAG1特异性T细胞,主要为CD4+CD8-T细胞,分泌Th1型细胞因子(γ-干扰素)。部分腹腔注射人rAG1特异性T细胞的小鼠左膝出现了关节滑膜单个核细胞浸润和早期软骨侵蚀改变。结论人特异性rAG1反应性T细胞在rAG1刺激下可向关节局部归巢而导致关节炎症反应,提示针对rAG1的自身免疫反应可能参与了RA的发病。 | 朱剑 黄烽 张一平 | 2006 | 解放军医学杂志2006，31，8： | 2 |
| 5 | T细胞疫苗接种对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠免疫机制的调节作用显示文摘目的 探讨 T细胞疫苗 ( TCV)接种对实验性自身免疫性脑脊髓炎 ( EAE)免疫机制的调节作用。方法 取正常及 EAE大鼠腹股沟淋巴结细胞 ,经 MBP抗原诱导 ,制备 MBP特异的 TCV用于接种 ,以 HE染色观察髓鞘病变 ,MTT法检测细胞毒反应 ,FACS方法检测 T细胞亚群 ,ELISA方法检测血清中细胞因子含量。结果 接种 TCV后 ,CD8+细胞百分率上升 ,T细胞对脑细胞的杀伤率下降 ,血清中 IFN-γ与 TNF-α含量下降以及脑髓质炎症反应减弱 ,EAE发病率下降。结论 特异性 TCV接种可降低自身免疫反应性。 TCV通过淋巴细胞亚群的变化及细胞因子的调节 ,发挥对 | 余奇文 沈帆霞 柏峻 马安伦 张继英 王利 沈佰华 陈生弟 张冬青 | 2004 | 中国神经免疫学和神经病学杂志2004，11，5： | 1 |
| 6 | CⅡ诱导RA患者关节滑液中自身反应性T细胞的免疫学特性分析显示文摘目的 :探讨CⅡ诱导的RA患者关节滑液中自身反应性T细胞免疫学特性。方法 :分离RA患者关节滑液中SFMC ,用CⅡ刺激后分析反应性的T细胞频率 ;用ELISA方法检测CⅡ刺激SFMC后上清中的IFN γ和IL 4的含量及通过流式细胞检测SFMC表面标志的表达 ;应用半定量PCR分析外周血及滑膜液中TCRVβ基因表达格局。 结果 :SFMC中CⅡ反应性的T细胞频率高于PBL ;IFN γ的含量在CⅡ刺激SFMC后上清中较高 ,而在未刺激中较低 (P <0 0 1) ,在PBL中更低 (P <0 0 5 ) ;SFMC上CD8及CXCR3表达多于PBMC(P <0 0 5 ) ;外周血T细胞表达绝大多数Vβ基因 ,而滑膜液中TCRVβ基因取用呈现明显的不均衡性。结论 :CⅡ反应性T细胞在SFMC中占优势 。 | 王利 沈佰华 李宁丽 张继英 余奇文 聂红 张冬青 冯国璋 戴号 胡军林 | 2004 | 中国免疫学杂志2004，20，5： | 0 |
| 7 | Role of soluble Fas ligand in autoimmune diseases显示文摘AIM: To investigate the role of soluble Fas ligand in autoimmune diseases.METHODS: RT-PCR was performed to amplify sFasL cDNA from the total RNA extracted from activated human peripheral blood lymphocytes. DNA fragments were cloned into PCR vector. After sequenced, sFasL gene fragments were inserted into pQE-31 vector and expressed in E. Coli M15 respectively. Proteins were purified through affinity chromatography column with ligand of 6xHis tag and identified by SDS-PAGE and Western blot. Mice were immunized with sFasL protein and specific anti-serum was harvested 6 wk after immunization. Monoclonal anti-human FasL antibody was made from the immunized mice. Serum level of sFasL in different patients was detected using antiFasL antibodies from the immunized mice.RESULTS: The protein expressed was 24 ku by SDS-PAGE electrophrosis. The protein was specially bound to antihuman FasL antibody by Western blot analysis. The sFasL protein could induce Jurket cell apoptosis in vitro. The concentration of serum sFasL in patients with autoimmune diseases was higher than that in normal individuals, sFasL could reduce arthritis in collagen induced arthritis (CIA) mice model by subcutaneous injection.CONCLUSION: sFasL may be involved in either induction of apoptosis or autoimmune diseases. Furthermore, sFasL may have potential application in treatment of autoimmune diseases. | Ning-LiLi HongNie HongNie Ji-YingZhang An-LunMa Bai-HuaShen LiWang JunBai Xue-HuaChen TongZhou Dong-QingZhang | 2004 | World Journal of Gastroenterology2004，10，21： | 0 |
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