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| 1 | 葡萄SCARECROW基因家族的分析与表达显示文摘赤霉素(GA)促进葡萄果实的膨大,目前对外源赤霉素促进葡萄果实膨大的信号转导途径还不完全清楚。有研究发现GA3处理后葡萄果实中一个SCARECROW(SCR)蛋白的表达出现上调,为了进一步揭示GA的作用途径,本研究通过分析在其他植物中已经确认的SCR基因序列,对葡萄全基因组进行BLAST比对,获得了可能编码葡萄SCR的11个基因片段序列SCRs。分别设计特异性引物,以无核白鸡心葡萄(Vitis vinifera L.cv.Centennial seedless)不同组织器官,以及盛花后12d以30mg/L GA3处理无核白鸡心葡萄的花序,并于花后13、15、19、45、61d采收的果实为材料,进行半定量RT-PCR测定SCRs的表达。结果显示:这些基因在成叶、幼叶、根、花序、新梢顶尖、休眠芽、胚性愈伤组织和非胚性愈伤组织中存在差异表达;在花后13、19、45、61d的葡萄果实中有不同状态的上调。研究结果对进一步探讨SCRs在葡萄果实发育和成熟过程的作用与功能提供了线索。 | 陈丽华 葛晖 柴丽娟 陈尚武 马会勤 | 2012 | 中国农业大学学报2012，17，1： | 4 |
| 2 | 农杆菌介导的葡萄胚性与非胚性愈伤组织遗传转化过程中胁迫响应基因的表达(英文)显示文摘葡萄愈伤组织经农杆菌侵染后会产生细胞褐化和坏死现象,大大降低了转基因效率,此过程中胁迫基因发挥了重要作用。我们通过sqRT-PCR的方法研究了葡萄胚性(EC)和非胚性(NEC)愈伤组织在农杆菌侵染前、侵染30 min以及共培养3 d后PR-10,Mn-SOD,APX,IRL 5,CAT和β-1,3-glucanases基因的表达情况。EC和NEC中PR-10表达量均较高,并在侵染过程中呈上升趋势;NEC的Mn-SOD表达量没有明显变化,EC侵染30 min后Mn-SOD表达量的相对灰度值提高为侵染前的1.8倍,共培养3 d后又降低为侵染前的0.9倍;NEC的APX表达量低且比较稳定,EC在侵染前、侵染30 min和共培养3 d后APX表达量的相对灰度值分别为NEC的3.2倍、2.1倍和4.1倍;NEC中CAT表达量较低,且在转基因过程中呈现逐渐降低的趋势,EC在侵染30 min后CAT表达量的相对灰度值提高为侵染前的2.4倍;NEC中IRL 5的表达量非常低,和CAT一样在转基因过程中呈现下降趋势,而EC中该基因的表达量相对高一些;NEC的β-1,3-glucanases表达量远远高于EC,侵染前、侵染30 min和共培养3 d后其表达量的相对灰度值分别为EC的29倍、5.5倍和4.7倍。我们还研究了蛋白酶处理以后,这些基因在EC中的表达情况。结果显示:共培养3 d后进行蛋白酶处理的EC中Mn-SOD,APX,IRL 5这3个基因表达量相对灰度值降低为未处理EC的0.21、0.74和0.10,CAT和β-1,3-glucanases的表达量分别提高为未处理EC的3.7倍和8.7倍。这些结果在一定程度上说明了葡萄胚性和非胚性愈伤对于农杆菌侵染呈现不同褐化反应的潜在原因,对于我们在基因水平上研究这2种愈伤组织经过农杆菌侵染后的细胞可塑性提供了新的视角,有利于将来进一步降低愈伤褐化和细胞死亡的研究,从而提高转基因效率。 | 赵凤霞 王正平 高相彬 陈尚武 马会勤 | 2011 | 果树学报2011，28，6： | 1 |
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