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1华南8号木薯及其四倍体诱导株系叶片蛋白质组及叶绿素荧光差异分析显示文摘【目的】通过对华南8号木薯及其四倍体诱导株系叶片差异蛋白质及叶绿素荧光参数的分析,在蛋白质水平上揭示两者叶片存在的差异以及其与光合效率间的关系。【方法】通过木薯嫩叶、根尖染色体压片及流式细胞观察对华南8号四倍体诱导株系进行鉴定,采用双向电泳技术分离叶片蛋白质,Delta 2D软件分析差异蛋白质并通过质谱技术鉴定,利用Western blot技术对部分差异蛋白质进行验证;采用95%乙醇直接提取法测定叶绿素含量,并用Imaging-Pam测定叶绿素荧光动力学参数。【结果】染色体压片及流式细胞结果均显示,诱导得到SC8多倍体株系为四倍体株系;得到的13个差异蛋白质点中上调表达12个,下调表达1个;经质谱技术成功鉴定到12个,其功能涉及碳代谢及能量代谢、光合作用、抗氧化、蛋白质代谢调控等;1个下调表达的蛋白质未得到成功匹配,其中参与光合作用的蛋白质占46.2%;四倍体株系叶片叶绿素a、叶绿素b和总叶绿素均显著升高;叶绿素荧光参数,包括Fo、ΦPSII、qP、NPQ和ETR均显著升高;【结论】参与碳代谢及能量代谢、光合作用等途径相关蛋白质表达水平的上调;叶绿素含量及叶绿素荧光参数的升高;表明四倍体株系叶片PSII反应中心捕光能力强、光化学转化效率高,从而提高了叶片的光合速率。安飞飞 凡杰 李庚虎 简纯平 李开绵 2013中国农业科学2013,46,19:27
2四倍体与二倍体紫薇光合特性研究显示文摘为了解四倍体紫薇和二倍体紫薇光合生理特性的差异,培育优质林木,采用英国PP-Systems公司产CIRAS-1型便携式光合系统测定人工诱变培育的四倍体紫薇品种和二倍体紫薇品种的各项光合生理参数及其变化规律。结果表明:四倍体和二倍体紫薇的叶片净光合速率(Pn)日变化都呈单峰型曲线,但峰值出现的时间不同。2个紫薇品种的Pn、气孔导度(Gs)和水分利用率(WUE)差异显著,蒸腾速率(Tr)、表观量子效率(AQY)和羧化效率(CE)差异不显著。光饱和点(LSP)为二倍体紫薇[1445μmol/(m2·s)]<四倍体紫薇[1670μmol/(m2·s)],光补偿点(LCP)为二倍体紫薇[12.23μmol/(m2·s)]<四倍体紫薇[42.2μmol/(m2·s)];CO2饱和点(CSP)为二倍体紫薇(1200μmol/mol)<四倍体紫薇(1427.5μmol/mol),CO2补偿点(CCP)为二倍体紫薇(32.24μmol/mol)<四倍体紫薇(35.71μmol/mol)。四倍体紫薇单位叶面积叶绿素含量显著高于二倍体紫薇(P<0.05)。于永畅 王厚新 李承秀 孙忠奎 牛田 孙芳 王长宪 张林 2013中国农学通报2013,29,22:17
3四倍体泡桐叶片显微结构观察及抗逆性分析显示文摘以4种四倍体泡桐B4,Y4,N4和M4及其对应二倍体泡桐B2,Y2,N2和M2为材料,分析其叶片显微结构的差异,测定了部分差异指标,并根据这些差异进行四倍体泡桐的抗逆性评价.结果表明:4种四倍体泡桐叶片厚度、上下表皮厚度、栅栏组织厚度、细胞结构紧密度、栅栏组织厚度与海绵组织厚度的比值均大于其二倍体,海绵组织厚度和细胞结构疏松度则相反;筛选出下表皮厚度、栅栏组织厚度和海绵组织厚度3项指标,经隶属函数法分析得出4种四倍体泡桐的抗旱性与抗寒性均大于其二倍体,强弱排序为M4>Y4>N4>B4>M2>Y2>N2>B2.张晓申 翟晓巧 范国强 邓敏捷 赵振利 2012河南农业大学学报2012,46,6:16
4甜叶菊二倍体与同源四倍体生理特征及AFLP分析显示文摘为阐述甜叶菊同源四倍体与二倍体表观性状及光合特性的调控机理,以甜叶菊同源四倍体及其二倍体为材料,对2个倍性品种的形态特征、光合特性及AFLP分子标记等进行比较研究。结果表明,甜叶菊四倍体植株茎干粗壮、叶片加厚、叶面积增大,植株变矮;甜叶菊四倍体植株叶片的净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)、蒸腾速率(Tr)均显著高于二倍体,且光补偿点(LCP)、表观量子效率(AQY)和CO2补偿点(CCP)分别比其二倍体增加了28.66%、1 181.81%、11.74%,而光饱和点(LSP)、暗呼吸速率(Rd)和羧化效率(CE)均显著低于二倍体;在AFLP水平上,甜叶菊染色体加倍前后DNA碱基序列发生了显著变化。二倍体和同源四倍体甜叶菊在表观形态和光合特性上的差异是DNA多态性反映的结果。本研究为甜叶菊倍性育种提供了参考。李雅婷 王红娟 向增旭 2015核农学报2015,29,11:12
5白桦半同胞家系苗期生长和光合特性及其选育评价指标筛选显示文摘对6个白桦半同胞家系苗期生长、光合和叶绿素荧光参数进行测定,分析各指标的变异状况,并探讨白桦苗期选育评价的主要因子。结果表明:(1)白桦半同胞家系间生长性状(苗高、地径、叶片长度、叶片宽度、叶片数量、叶片长宽比)和光合指标(Pn、Gs、Ci、Tr、WUE)差异极显著,除Ci外各光合指标的变异系数和遗传变异系数均超过了10%。(2)白桦半同胞家系间叶绿素荧光参数F0、F0′、Fs、Fv′/Fm′、NPQ和Yield差异显著,除NPQ外所有叶绿素荧光参数变异系数和遗传变异系数均不超过10%,表明白桦半同胞家系叶片光合潜在能力差异不大。(3)白桦半同胞家系叶绿素荧光参数各指标遗传力H2均大于0.4,属中度遗传力,而生长指标和光合指标遗传力均大于0.7,属于较高遗传力,表明白桦半同胞家系生长和光合变异主要由遗传因素控制,有利于苗期选择评价。(4)白桦半同胞家系苗高、地径与WUE显著正相关,而与Yield显著负相关;叶片数量和叶片宽度对白桦苗期苗高和地径影响较大,可以作为苗期选择评价的主要因子。刘宇 徐焕文 边秀艳 刘桂丰 赵曦阳 2013西北植物学报2013,33,5:9
6濒危植物天目铁木和羊角槭的光合及蒸腾特性日动态比较显示文摘分别对浙江西天目山濒危植物天目铁木(Ostrya rehderiana)和羊角槭(Acer yangjuechi)进行叶片气体交换参数日动态测定,探讨其光合与蒸腾作用的影响因素,比较光能利用效率和水分利用效率.结果显示,天目铁木的净光合速率日动态有午休现象;当光合有效辐射没有显著差异时,天目铁木的净光合速率显著大于羊角槭(p<0.05),与其林冠层阳生环境相适应;二者光能利用效率日变化无明显差异,但弱光条件下,羊角槭的光能利用效率高于天目铁木(p<0.05),与其林下层耐阴植物的特性相符;二者的水分利用效率日动态不同,羊角槭高于天目铁木(p<0.05),表明羊角槭蒸腾活动降低而导致.王晓燕 杨淑贞 赵明水 罗远 崔敏燕 李媛媛 2015华东师范大学学报(自然科学版)2015,,2:9
7不同种四倍体泡桐光合特性的研究显示文摘以7年生二倍体及其四倍体泡桐为材料,研究了其叶片的光合特性.结果表明,四倍体与其二倍体泡桐叶片的净光合速率(Pn)气孔导度(Gs)、蒸腾速率(Tr)、胞间CO2浓度(Ci)4种光合因子的日变化规律相同,3种四倍体泡桐5月至10月叶片的Pn,Gs,Tr,Ci和叶绿素含量等均高于其二倍体泡桐.在5,7,9,10月,四倍体泡桐及其二倍体泡桐叶片的Pn,Gs,Tr日变化为单峰曲线,而在6月和8月则为双峰曲线;在5月至10月,Ci的日变化皆呈单谷曲线.张晓申 翟晓巧 赵振利 邓敏捷 范国强 2013河南农业大学学报2013,47,4:8
8华南8号木薯及其四倍体块根淀粉及蛋白表达谱的差异分析显示文摘【目的】通过对华南8号木薯及其四倍体块根淀粉含量与结构及蛋白质组学分析,揭示染色体加倍对木薯块根淀粉含量与结构的影响及其蛋白质调控机制。【方法】植后10个月收获木薯块根,采用空、水重测定块根鲜薯的淀粉含量,分光光度法分别测定淀粉中支链淀粉与直链淀粉的比例,采用Excel 2013和DPS v7.05统计软件对数据进行分析,差异显著性标准采用新复极差法,通过扫描电镜对块根淀粉体的大小、形态及数量进行显微结构观察,利用蛋白质印迹(Western blot)技术对参与淀粉合成与降解的酶表达水平进行验证,采用双向电泳技术分离块根蛋白质,Delta 2D软件分析差异倍数在2.0以上的差异蛋白质点,并通过基质辅助激光解析电离飞行时间质谱技术(MALDI-TOF-TOF-MS/MS)鉴定差异蛋白质,结合KEGG数据库将其按照功能进行分类。【结果】木薯染色体加倍后,块根干物率、淀粉含量及单株鲜薯重均显著下降,分别比二倍体降低了12.18%、11.41%和35.34%;而淀粉中直链淀粉和支链淀粉比例无显著变化;淀粉体形态无明显差异,主要为球形,不规则球体、椭球体也有存在,大小较均一,淀粉体排列较为疏松,空间间隙较大,视野内淀粉体数量减少;蔗糖磷酸合成酶(SPS)表达水平降低,β-淀粉酶表达水平升高,而颗粒结合型淀粉合成酶I(GBSSI)表达水平无显著变化;经软件分析得到的20个表达差异显著的蛋白质点中上调表达的有2个,下调表达的有18个;经质谱技术成功鉴定到其中的19个,1个下调表达的蛋白质点16未得到匹配,17个下调表达的蛋白质其功能涉及到碳代谢及能量代谢(4个)、结构蛋白(3个)、DNA和RNA代谢(2个)、分子伴侣(2个)、HCN代谢(2个)、抗氧化与解毒(1个)、蛋白质合成(1个)及未知功能(2个);2个上调表达蛋白质为茎特异性蛋白TSJT1。【结论】参与碳代谢及能量代谢、核酸代谢、分子伴侣等7个代谢途径相关蛋白质表达水平下调;淀粉体疏松排列,数量减少;参与淀粉代谢合成过程的SPS表达水平的下降,参与淀粉降解过程的β-淀粉酶表达水平的升高。表明四倍体块根淀粉合成能力降低,分解能力提高,从而降低了块根的淀粉含量,而直链淀粉与支链淀粉比例无显著变化。安飞飞 陈松笔 李庚虎 周锴 李开绵 2015中国农业科学2015,48,13:7
9华南205木薯及其同源四倍体PSⅡ叶绿素荧光参数差异分析显示文摘为研究华南205二倍体木薯及其同源四倍体叶片中光系统Ⅱ(PSⅡ)叶绿素荧光参数的差异,采用调制式叶绿素荧光成像系统Imaging-Pam对PSⅡ的叶绿素荧光参数进行测定。结果表明:SC205染色体加倍后,叶绿素a、叶绿素b及总叶绿素含量均显著提高;叶绿素荧光参数Fo、ΦPSⅡ、q P和ETR均显著升高,NPQ降低,Fv/Fm并未发生显著变化。叶绿素含量及ΦPSⅡ、q P、ETR的上升表明SC205四倍体叶片PSII反应中心捕光能力强、光化学转化效率高,从而提高了叶片的光合速率。宋红艳 张振文 安飞飞 陈霆 李开绵 2014热带作物学报2014,35,12:6
10Progeny test of tetraploid Betula platyphylla and preliminary selection of hybrid parents显示文摘Estimating genetic parameters of parental lines through progeny testing and choosing good hybrid parents are important for genetically improving seed orchard trees.In this study, 24 tetraploid progeny seedlings were used as experimental materials, which came from test cross design:six tetraploid Betula platyphylla lines(Q33, Q13, Q103,Q19, Q83 and Q14) as female parents and four individual B. platyphylla diploid lines(F3, F4, F9 and F11) as male parents were crossed. Variance analysis of height, diameter, height-to-diameter ratio, and internodal distance showed that the differences between hybrid combinations reached highly significant levels. Using multi-objective decisionmaking, we performed a comprehensive assessment of the various hybrid combinations. Using a selection rate of 20 % of the standard, five hybrids were selected;their genetic gains in average height, diameter, height-todiameter ratio, and internodal distance were 20.95, 6.07,13.07 and 8.96 %, respectively. We also analyzed the combining ability and genetic parameter effect values of parents and hybrid combinations. The combined analysis revealed that Q13, Q103, Q33 and Q83 were superior females; F3, F4, and F9 were superior males; and F3 × Q13, F4 × Q83 and F9 × Q33 were superior hybrid combinations. The heights and diameters of these progenies were 22.49 and 11.48 % greater than average,respectively.Huanwen Xu Yu Liu Jing Jiang Guifeng Liu Xiyang Zhao 2016Journal of Forestry Research2016,27,3:5
11NaHCO_3胁迫下白桦四倍体表型及生理分析显示文摘采用Na HCO3胁迫处理白桦四倍体苗木,测定其表型特征及生理特性.结果表明:在Na HCO3胁迫下,白桦四倍体叶片受盐害程度明显低于二倍体,苗高和地径生长明显高于二倍体;白桦四倍体净光合速率、可溶性糖含量、可溶性蛋白含量、脯氨酸含量、超氧化物歧化酶活性和过氧化物酶活性始终显著高于二倍体.穆怀志 林琳 于建国 姜效龙 张骁 夏富才 2016北华大学学报(自然科学版)2016,17,5:5
12头花蓼四倍体光合特性分析显示文摘目的:探讨头花蓼四倍体和二倍体光合生理特性的差异。方法:采用LI-6400XT便携式光合仪测定人工诱变培育的四倍体头花蓼品种和二倍体头花蓼品种的各项光合生理参数,探究两者的光合特性变化规律。结果:四倍体和二倍体头花蓼的叶片净光合速率(Pn)日变化都呈双峰型曲线,并有'午休'现象,但四倍体全天Pn高于二倍体。2个头花蓼品种的气孔导度(Gs),蒸腾速率(Tr),日变化趋势与Pn日变化趋势基本一致,而胞间CO2浓度(Ci)日变化趋势与Pn日变化趋势完全相反;四倍体Gs,Tr,水分利用率(WUE)整体水平高于二倍体,而四倍体Ci低于二倍体。头花蓼光补偿点(LCP)为二倍体[67.83μmol·(m2·s)-1]>四倍体[41.43μmol·(m2·s)-1],光饱和点(LSP)为二倍体[1 225μmol·(m2·s)-1]<四倍体头[1 370μmol·(m2·s)-1],最大净光合速率(Pnmax)为二倍体[5.36μmol·(m2·s)-1]<四倍体[8.83μmol·(m2·s)-1],表观量子效率(AQY)为二倍体[0.01μmolphotons·(m2·s)-1]<四倍体[0.02μmolphotons·(m2·s)-1]。结论:四倍体头花蓼的光合性能较二倍体增强。尹艳 党伯岳 刘世会 赵德刚 2016中国实验方剂学杂志2016,22,13:2
13二倍体马铃薯与其染色体加倍个体间的光合特性比较显示文摘【目的】植物的光合能力在很大程度上反映了其干物质累积能力,而多倍体植株的光合能力一般强于二倍体或单倍体。本研究旨在分析二倍体马铃薯与人工诱导染色体加倍个体的光合生理特性差异。【方法】以二倍体马铃薯品系及其经秋水仙素加倍得到的加倍个体为试验材料,采用Li-6400便携式光合作用测定仪对移栽后不同时期的光合参数进行测定,并在盛花期测定光响应曲线与CO_2响应曲线。【结果】加倍个体和二倍体的净光合速率(P_n)均呈现先上升后下降的趋势,并在移栽后60 d达到峰值,在同一时期,加倍个体的P_n均高于二倍体,并在移栽后60 d和75 d呈现显著差异(P<0.05);加倍个体的最大净光合速率(P_(nmax))和光饱和点(LSP)分别比二倍体高16.12%和13.00%;加倍个体的光补偿点(LCP)和CO_2补偿点(CCP)均低于二倍体,但两者的表观量子效率和羧化效率没有差异。【结论】加倍个体利用弱光的能力比二倍体强,在高光和低光条件下均有较强的光合能力,加倍个体能够利用低浓度的CO_2,固定和转化CO_2的能力较二倍体强。综上所述,加倍个体的光合能力高于二倍体。王婷婷 张光海 蔡汶玻 郭华春 2019云南农业大学学报(自然科学版)2019,34,3:2
14不同倍性紫果西番莲“满天星”形态、叶绿素及荧光参数差异比较显示文摘为了探寻两个倍性植株的形态、叶绿素及叶绿素荧光参数的差异,揭示不同倍性光合能力的变异规律,本研究以二倍体和三倍体的紫果西番莲“满天星”(Passiflora edulis)的苗木叶片为材料,测定植株形态及叶绿素含量,用高速连续激发式荧光仪Handy PEA测定其叶绿素荧光参数及叶绿素荧光诱导动力学曲线。结果表明,三倍体植株表现出矮壮、叶柄更长、叶片更宽的现象,三倍体较二倍体叶绿素a、叶绿素b、叶绿素总含量、类胡萝卜素含量大,三倍体对环境的光照辐射适应性较好、不易受到光抑制,光合速率更高。在电子传递过程中,三倍体比二倍体变化波动小,量子比率和热耗散的量子比率方面的分配比较稳定,PSⅡ结构的能量传递较稳定,适应性更强。在不同倍性植株中,二倍体和三倍体的OJIP一致,三倍体的荧光强度明显高于二倍体,说明三倍体的荧光产量更高,接受光量子的能量更好,因此光合碳代谢速率更高。王雪 朱雅静 陈诗 杨振欣 罗茜 许玉兰 王德新 蔡年辉 2022山东农业大学学报(自然科学版)2022,53,5:2
15不同倍性白菜光合特性比较显示文摘[目的]比较不同倍性白菜光合特性。[方法]采用Li-6400便携式光合测定系统对不同倍性白菜进行光响应曲线、光合速率日变化测定。[结果]四倍体白菜最大净光合速率、光饱和点和光补偿点等指标在两者之间的差异极显著,四倍体较二倍体分别提高了38.08%、14.83%和44.52%。二、四倍体白菜净光合速率的日变化呈均双峰曲线,中午存在明显的光合'午休'现象。四倍体的全天最大净光合速率高于二倍体,较二倍体提高了16.05%。[结论]白菜四倍体的光合作用强于二倍体。钟程 田鑫 蒋瑶 2018安徽农业科学2018,46,32:2
16南方泡桐二倍体及其四倍体的光合特性研究显示文摘以1年生南方泡桐四倍体及其二倍体南方泡桐为材料,采用Li-6400便携式光合作用仪测定其叶片的光合特性。结果表明:南方泡桐四倍体与其二倍体泡桐的光合特性规律一致,不同月份四倍体泡桐的净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)、蒸腾速率(Tr)和胞间二氧化碳浓度(Ci)等均高于其二倍体。四倍体泡桐及其二倍体泡桐的净光合速率、气孔导度、蒸腾速率日变化,在5月、7月、9月和10月为单峰,6月和8月为双峰,胞间二氧化碳浓度为单谷变化。王杨 张晓申 邓敏捷 赵振利 范国强 2013江西农业学报2013,25,8:1
17关帝林区野生风景植物树种资源白桦优树选择显示文摘白桦是山西野生乡土风景树种,在各林区广泛分布。研究桦树优树选择及繁育意义重大。为奠定白桦良种繁育良好基础,育种时必须根据表型选择的原理和方法,采用优势木对比法选择优树。以树高、胸径、健康状况、树冠、抗逆性、林龄、林分起源为主要指标,同时考虑海拔、坡向、降水、土壤等其他各项因子,经过初选、复选和决选,选出有育种价值的白桦优树50株。韩建明 2012中国园艺文摘2012,28,9:1
18Research progress on genetic improvement of Betula platyphylla Suk.显示文摘Betula platyphylla Suk. is one of the most widely distributed species of Betula, the fourth most valuable timber species in north-eastern China and also a common tree species for landscaping. Over the past 30 years, effective progress has been made in genetic improvement and molecular breeding of B. platyphylla.There has been extensive research on breeding techniques,including the collection and conservation of B. platyphylla germplasm resources, provenance trials, intensive breeding techniques, crossbreeding and asexual propagation techniques, ploidy breeding and mutation breeding technology, genome sequencing, gene cloning, transgenic and molecular mechanisms of wood formation. A Betula germplasm resource collection has been established by collecting different provenances, and full-sib and half-sib families. In addition, the geographic variation patterns of B. platyphylla provenances have been revealed, and the provenance division and superior provenance selections made. B. platyphylla flowering and seeding have been improved through intensive breeding techniques. Interspecific hybridization, intraspecific hybridization and parallel crosses were made using fine parents, and B. platyphylla intensive seed orchards have been established. Systems of asexual propagation, including cuttings,grafting and tissue culture have been established. A B. platyphylla tetraploid was successfully constructed and a B. platyphylla triploid seed orchard established. The growth, wood property and resistance genes of B. platyphylla have been cloned. An efficient B. platyphylla transgenic system mediated by Agrobacterium tumefaciens was established, and genes encoding B. platyphylla insect resistance, drought resistance and salt tolerance, lignin synthesis, flowering, hormone transport and balance obtained. B. platyphylla molecular markers were developed and the high density B. platyphylla genetic map constructed. All this researchhas provided a model and data for the foundation of forest genetic improvement and applied research.Chuanping YANG 2017Frontiers of Agricultural Science and Engineering2017,4,4:1
19NaHCO_3胁迫下四倍体白桦苗木光合特性分析显示文摘采用NaHCO_3胁迫处理四倍体白桦苗木,测定其光响应曲线、CO_2响应曲线和叶绿素荧光.结果表明:NaHCO_3胁迫后,四倍体白桦的光饱和点(LSP)、表观量子产量(AQY)、CO2饱和点(CSP)和羧化效率(CE)显著高于二倍体,分别提高19.25%,26.92%,13.14%和92.09%;PSII最大光化学效率(Fv/Fm)、PSII实际光化学效率(ФPSII)和光化学淬灭(q P)差异显著,较二倍体分别提高7.92%,20.05%和24.63%.由此表明,NaHCO_3胁迫下四倍体白桦的光合作用强于二倍体.穆怀志 林琳 于建国 李爽 姜效龙 夏富才 2017北华大学学报(自然科学版)2017,18,1:1
20濒危珍稀植物对开蕨组培苗的光适应性研究显示文摘【目的】研究适宜国家二级濒危珍稀植物对开蕨(Phyllitis scolopendrium)组培苗生长的光照条件,为其推广栽培提供技术指导。【方法】通过盆栽试验,在温度25~36℃,相对湿度55%~65%条件下,于温室内设置4种光照处理T1(CK)无遮光,T2遮光56%,T3遮光78%,T4遮光97%,对应光照强度分别为17 863~18 322,7 520~8 253,3 788~4 020,342~435lx。通过测定不同光照强度下3年生对开蕨组培苗的形态指标及光合色素含量、净光合速率日变化、光合-光照强度响应曲线和叶绿素荧光参数等指标,筛选适宜对开蕨组培苗生长发育的光照条件。【结果】经遮阴处理(除T4处理外)的对开蕨组培苗较对照组叶片变薄,比叶重降低,单叶面积增大,叶绿素含量增多。随光照强度减小,Pn日均值、L_(UE)、P_(max)、A_(QY)和ΦPSⅡ均表现出先增后降的变化趋势,并在T2处理下达到最大,T4处理最小;Chl a/b、L_(CP)、L_(SP)、R_d、Fv/Fm、Fv/Fo、Fv′/Fm′、qP及NPQ均呈下降趋势。T1处理的Pn日变化呈"双峰"曲线,T2、T3、T4处理呈"单峰"曲线。【结论】4组处理中以T2处理的植株生长状态最好,故认为对开蕨组培苗生长的最适光照强度是7 520~8 253lx。赵超 才燕 黄祥童 董然 顾德峰 严海燕 2016西北农林科技大学学报(自然科学版)2016,44,9:0
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