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1胃腺癌细胞中miR-23a靶基因PPP2R5E的鉴定显示文摘目的利用双荧光蛋白报告基因分析系统验证mi R-23a的靶基因PPP2R5E。方法选取表达绿色荧光蛋白的质粒pc DNA3/EGFP,将PPP2R5E-3’UTR的特异性序列插入其中,并与红色荧光蛋白表达质粒p Ds Red2-N1及表达mi R-23a的质粒共同稳定转染胃腺癌细胞MGC803,稳定转染后提取细胞蛋白,荧光分光光度计进行定量检测。并通过半定量RT-PCR、实时定量PCR检测mi R-23a功能受抑制或过表达mi R-23a的MGC803细胞或胃腺癌组织中PPP2R5E基因m RNA的表达情况,验证mi R-23a对其调控作用。表达si RNA抑制MGC803中PPP2R5E m RNA的表达后,通过MTT和平板克隆形成实验观察其对胃腺癌细胞系MGC803细胞活性和克隆形成能力的影响。结果绿色荧光蛋白的表达量,稳定转染pc DNA3/EGFPPPP2R5E-3’UTR质粒和mi R-23a质粒组明显低于pc DNA3/EGFP-PPP2R5E-3’UTR和pc DNA3共同稳定转染组。mi R-23a功能受抑制的胃腺癌细胞MGC803中靶基因PPP2R5E的m RNA表达水平升高;相反,过表达mi R-23a的胃腺癌细胞MGC803及胃腺癌组织中靶基因PPP2R5E的m RNA表达水平下降。沉默MGC803细胞中的PPP2R5E后,细胞活性和克隆形成能力均加强。结论 PPP2R5E可能是mi R-23a的直接靶基因。朱丽华 李盖 刘爱华 张科 李冀 章广玲 2015中国现代医学杂志2015,25,5:4
2MiR-23a质粒的构建及其在胃腺癌细胞系MGC803中的表达显示文摘目的构建表达微小RNA-23a(miR-23a)的真核表达质粒,为进一步研究小RNA分子miR-23a在胃腺癌细胞系MGC803中的功能奠定良好的实验基础。方法首先设计并合成扩增miR-23a前体基因全长的PCR引物,提取胃腺癌细胞系MGC803基因组为模板,PCR扩增大小为324 bp的目的基因;PCR产物经过EcoR I和Bgl II酶切后,与线性化的pcDNA3载体连接后转化大肠杆菌,扩增、纯化获得所需质粒,以琼脂糖凝胶电泳、酶切鉴定以及基因测序鉴定其分子质量和插入片段的序列;构建的质粒经脂质体方法转染MGC803细胞,实时定量PCR检测转染细胞MGC803中miR-23a的表达水平,经MTT实验、平板克隆形成实验、软琼脂克隆形成实验、TUNEL实验及Transwell实验,观察过表达miR-23a后对MGC803细胞增殖、凋亡及侵袭能力的影响。结果纯化质粒的相对分子质量为5.7 kb,酶切及测序鉴定结果符合目的条带大小(324 bp),插入的寡核苷酸序列与miR-23a前体基因序列完全相符;实时定量PCR结果表明pcDNA3/miR-23a能够有效表达miR-23a;MTT、平板克隆形成及软琼脂克隆形成实验结果显示,过表达miR-23a可以促进MGC803细胞活性;TUNEL实验结果显示,过表达miR-23a可以减少胃腺癌细胞MGC803凋亡的发生;Transwell实验结果显示miR-23a可以促进胃腺癌细胞MGC803的侵袭能力。结论构建的真核表达质粒在胃腺癌细胞MGC803中有效表达miR-23a,能够促进细胞活性及侵袭能力,并能抑制凋亡的发生。陈力 王梅梅 周洪霞 熊亚南 章广玲 李淑英 袁丽杰 朱丽华 2014中国现代医学杂志2014,24,20:4
3与胃癌发生相关MicroRNA的研究新进展显示文摘MicroRNA(微小核糖核酸;miRNA)是一类长约20~25个核苷酸的非编码的单链RNA分子。它的表达与个体发育、增殖、分化以及恶性肿瘤发生密切相关。近期研究表明microRNA具有癌基因和抑癌基因的作用。新研究发现miR-20b,miR-150,miR-106a,miR-27a,miR107,miR-21,miR-20a与胃癌的发生过程呈正相关;而Let-7microRNA,miR-218,miR-101,miR-650,miR-29,miR-34,miR-451与胃癌的发生过程呈负相关。本文就胃癌发生相关microRNA的研究新进展予以综述。黄胜蓝 郑长黎 2012现代生物医学进展2012,12,24:4
4封闭内源性miR-23a对人胃腺癌细胞系MGC803增殖及侵袭的影响显示文摘目的设计并合成miR-23aASO(ASO-23a),封闭内源性miR-23a的功能后,检测人胃腺癌细胞系MGC803增殖及侵袭能力的改变。方法首先设计并合成ASO-23a,经脂质体方法转染MGC803细胞,实时定量PCR检测转染细胞MGC803中miR-23a的表达水平;经MTT实验、平板克隆形成实验、软琼脂克隆形成实验、TUNEL实验及transwell实验-观察细胞内源性miR-23a功能被封闭后对MGC803细胞增殖、凋亡及侵袭能力的影响。结果实时定量PCR结果表明ASO-23a能够有效封闭细胞中内源性miR-23a;MTT、平板克隆形成及软琼脂克隆形成实验结果显示,封闭内源性miR-23a后可抑制MGC803细胞活性;TUNEL实验结果显示,ASO-23a可以促进MGC803细胞凋亡的发生;Transwell实验结果显示,ASO-23a可以抑制MGC803细胞的侵袭能力。结论设计并合成的.ASO-23a在人胃腺癌细胞系MGC803中有效封闭内源性miR-23a,能够抑制细胞活性及侵袭能力,并能促进细胞凋亡的发生。朱丽华 田家莉 陈力 王梅梅 熊亚南 章广玲 李淑英 袁丽杰 2013南方医科大学学报2013,33,5:3
5胃癌重要的调控因子——microRNAs显示文摘microRNAs(miRNAs)是细胞内一类保守的单链小分子RNA,仅19~25个核苷酸。miRNAs参与调节细胞的增殖、分化及凋亡等过程,对个体生长发育以及包括肿瘤在内的多种疾病的发生、发展起着重要的调节作用。近年来,胃癌相关miRNAs研究不断深入,从miRNAs表达谱研究、特定miRNAs的功能性分析以及特定miRNAs表达异常的内在机制等方面揭示了miRNAs在胃癌发生、发展中扮演的角色,探索了miRNAs在胃癌早期诊断、早期治疗和预后评估等方面的价值。叶耿泰 蔡建春 2011医学综述2011,17,9:2
6Dicer在胃癌细胞和胃癌组织的表达及意义显示文摘目的:探讨Dicer在胃癌(Gastric carcinoma)细胞和胃癌组织中的表达及意义。方法:应用Western-Blot和逆转录-聚合酶链反应(Reverse transcriptase polymerase chain reaction,RT-PCR)检测正常胃粘膜细胞株GES-1、人胃癌细胞株SGC-7901,25例胃癌手术标本及癌旁配对组织Dicer的含量。结果:1.Western-Blot和RT-PCR结果表明Dicer在人胃癌细胞株SGC-7901的表达水平明显低于正常胃粘膜细胞株GES-1(P<0.05),在胃癌手术标本组织的表达水平明显低于癌旁配对组织(P<0.05);2.Dicer表达水平与胃癌分化程度有关。低分化组低于中分化组(P<0.05),中分化组低于高分化组(P<0.05)。结论:在胃癌细胞株和胃癌组织中Dicer表达明显降低并且Dicer表达与胃癌分化程度相关。聂娜 吴小翎 刘波 2009重庆医科大学学报2009,34,6:2
7miRNA在造血调控及白血病中的作用显示文摘张翠云 谢书阳 2010滨州医学院学报2010,33,5:1
8胃癌相关微小RNA的研究进展显示文摘微小RNA(microRNAs)由一系列长度约22个核苷酸(nts)的内源性非编码RNA组成,广泛存在于真核生物内,具有重要的基因调节作用,在转录后水平通过与靶基因的3′端非转录区(3′-UTRs)的碱基完全或不完区互补配对,最终导致mRNA的降解或翻译抑制,对动植物的生长、发育,细胞的增殖、分化、凋亡,王霖沛 蔡建春 2011福建医科大学学报2011,45,1:0
9miRNA与不同癌症关系的研究进展显示文摘微小RNA(miRNA)为一类在动植物中广泛存在的非编码蛋白质,由21~25个核苷酸构成,其表达具有组织特异性和时序特异性。目前研究表明,miRNA参与了生命过程中一系列的重要过程,与癌症的发生、诊断、治疗和预后密切相关。杨源 雷小勇 2011中国医学创新2011,8,27:0
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