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| 1 | 联合应用FISH和巢式RT-PCR技术检测慢性髓系白血病bcr/abl融合基因显示文摘目的 检测慢性髓系白血病 (CML)bcr/abl融合基因 ,协助临床诊断。方法 联合应用荧光原位杂交 (FISH)、Northern杂交和巢式RT PCR技术。结果 在 16例被检测的CML患者中 ,有 3例两种方法的结果不一致 ,经Northern杂交验证发现 ,RT PCR较FISH更敏感 ,但存在假阳性 ;另外 ,FISH较容易检测到bcr/abl融合的少见类型 ,而巢式RT PCR需要同时设计多对特殊引物 ,否则极易漏诊。结论 联合应用FISH和巢式RT PCR技术检测CMLbcr/abl融合基因可以优势互补 ,使结果更加准确、可靠 ,更适合于临床诊断、疗效判定以及对微量残留病的监测。 | 吴彬 周淑芸 刘晓力 宋兰林 张燕 | 2003 | 中华血液学杂志2003，24，5： | 8 |
| 2 | 巢式聚合酶链反应检测慢性粒细胞白血病bcr/abl融合基因显示文摘目的 探讨Ph染色体和bcr/abl融合基因在慢性粒细胞白血病 (CGL)的发病机制、诊断、治疗、预后判断的价值。方法 对 46例CGL患者作巢式逆转录聚合酶链反应 (RT PCR )检测bcr/abl融合基因 ,同时对其中 2 8例作细胞遗传学检查。结果 46例CGL患者中 ,44例bcr/abl融合基因阳性 ,阳性率为 95 .7% ;2 8例CGL患者作细胞遗传学检查 ,2 6例Ph染色体阳性 ,阳性率为 92 .9% ;2例Ph染色体阴性的CGL患者 ,用RT PCR检测出bcr/abl融合基因。结论 巢式RT PCR是一种快速、敏感而准确的检测方法 ,可以为部分Ph染色体阴性的CGL患者提供分子生物学的诊断依据。 | 罗军 卢玉英 赖永榕 周吉成 宁自觉 向直富 牛威林 | 2001 | 临床内科杂志2001，18，1： | 8 |
| 3 | 应用YAC探针进行荧光原位杂交检测慢性粒细胞白血病BCR基因重排显示文摘为检测慢性粒细胞白血病(CML)中BCR基因重排,采用酵母人工染色体(YAC)DNA的In-ter-Alu-PCR产物为探针进行荧光原位杂交(FISH)研究了10例CML,其中包括初诊患者2例,CML急变并接受化疗2例,α干扰素治疗2例,自体骨髓移植术(ABMT)后3例和Ph染色体阴性CML1例。同时进行细胞遗传学和RT-PCR检测。结果:9例CML的46%~100%的可分析核型显示t(9;22)易位,其中携带t(9;22)细胞最少者为1例自体骨髓移植术后8个月的患者,其64%的分裂相存在t(9;22),36%为正常核型;1例Ph(-)CML未见BCR基因易位,而RT-PCR(+),提示ABL基因片段插入22q11,造成隐匿性Ph染色体。结果表明:应用YAC探针进行原位杂交的定位明确。FISH检测微小残留病(MRD)比常规细胞遗传学方法更敏感,而且可以完成PCR方法不易进行的定量分析。 | 刘晓力 周淑芸 刘孟珉 叶菁 宋兰林 牛超 郑维扬 曹琪 刘启发 苏欣莹 孙竞 冯茹 管忠震 陈赛娟 | 1997 | 中华医学遗传学杂志1997，14，4： | 6 |
| 4 | 三尖杉酯碱诱导慢性髓系白血病K-562细胞凋亡的实验研究显示文摘目的阐明三尖杉酯碱(HT)作用于K562细胞的机制。方法应用细胞形态、DNA凝胶电泳和流式细胞仪等检测,观察HT对K562细胞株的作用方式,进一步用RT-PCR方法研究bcr/abl基因在转录水平的改变。结果0.01~100.00μg/ml浓度HT可诱导K562细胞凋亡,并呈时间和剂量依赖性。随着药物作用时间的延长,bcr/abl基因的转录下调。结论低浓度HT就可通过抑制bcr/abl基因的表达,诱导K562细胞凋亡。 | 李荣 刘晓力 杜庆锋 田红 宋兰林 张燕 杨艺 周淑芸 | 2002 | 第一军医大学学报2002，22，9： | 6 |
| 5 | STR-PCR联合RT-PCR技术在慢性髓细胞白血病患者异基因造血干细胞移植后微小残留病变检测中的应用显示文摘为了探究STR PCR联合bcr/abl融合基因转录本RT PCR定性检测技术对慢性髓细胞白血病 (CML)异基因造血干细胞移植 (allo HSCT)后复发的预测价值 ,对接受allo HSCT的 2 4例CML患者进行微小残留病变(MRD)的动态检测 ,对供体细胞嵌合率 (DC)采用复合扩增荧光标记STR PCR结合毛细管电泳方法进行定量检测 ,对bcr/abl融合基因转录本采用巢式RT PCR方法检测。结果显示 :移植后长期处于完全供体细胞嵌合状态(FDC)即DC≥ 95 %的患者bcr/abl均转为阴性 ,MRD消失 ;稳定混合嵌合状态 (MC)即 90 %≤DC <95 % ,并且bcr/abl阴性的患者 ,也可达到分子水平的缓解并长期生存 ;但是bcr/abl的阳性结果并不总是与复发相关 ,只有当DC进行性下降 (DC <90 % ) ,而同时bcr/abl阳性时 ,才有复发或植入失败的可能 ,对该类患者应尽早实施临床干预性治疗。本研究中有 5例患者出现DC下降和MRD阳性 ,其中 3例为分子水平复发 ,1例为细胞遗传学水平复发 ,1例为植入失败。结论 :STR PCR在敏感范围内 ,其结果与RT PCR的结果符合率高 ,两种技术的结合是一种检测MRD高度敏感的手段 ,可检出allo HSCT后发生分子生物学或细胞遗传学复发的高危患者。 | 唐晓文 王玮 吴德沛 阮长耿 | 2004 | 中国实验血液学杂志2004，12，4： | 6 |
| 6 | Ph^+/bcr-abl^+急性淋巴细胞白血病微小残留病变的细胞遗传学分析、巢式RT-PCR及流式细胞术检测显示文摘为了探索检测Ph+ /bcr abl+ 急性淋巴细胞白血病 (ALL)患者的微小残留病变 (MRD)的简便而灵敏的方法 ,对 84例初治ALL患者和其中的缓解期患者的骨髓分别用细胞遗传学、流式细胞术和巢式RT PCR检测。结果表明 ,缓解期患者骨髓中不存在Ph′染色体 ,巢式RT PCR方法检测到 11/ 14例缓解期患者存在MRD(bcr abl融合基因 ) (阳性率 78 5 7% ) ,而流式细胞术检测到 5 / 14的缓解期患者阳性 (阳性率 35 71% )。巢式PCR的灵敏度达到 10 -6- 10 -7水平 ,流式细胞检测的灵敏度达到 10 -4- 10 -5水平。结论 :Ph染色体核型分析技术检测MRD不够灵敏 ,而巢式RT PCR检测MRD较流式细胞技术检测灵敏度更高 ,且更易于开展应用。 | 薛芳 董作仁 张冰 高丽霞 | 2003 | 中国实验血液学杂志2003，11，4： | 4 |
| 7 | 髓系白血病患者T细胞受体基因重排的检测及其意义显示文摘目的了解髓系白血病患者T细胞受体基因重排及临床意义。方法应用聚合酶链反应(PCR)技术检测急性非淋巴细胞白血病(ANLL)41例和慢性粒细胞白血病(CML)8例患者T细胞受体γ链(TCRγ)基因重排。结果ANLL8例(19.5%)和CML5例(62.5%)患者存在TCRVγI-Jγ基因重排,CML病人TCRVγI-Jγ基因重排阳性率显著高于ANLL病人(P<0.025);TCRVγI-Jγ基因重排阳性ANLL病人治疗后完全缓解率低于基因重排阴性ANLL病人(P<0.01);ANLL3例完全缓解期病人TCRVγI-Jγ基因重排持续检测阳性,均于缓解后6个月内出现临床复发。结论TCR基因重排也可发生于部分髓系白血病病人,检测髓系白血病病人TCR基因重排对预后判断和微小残留病检测具有一定意义。 | 张剑 徐兵 | 1999 | 实用肿瘤杂志1999，14，2： | 3 |
| 8 | 荧光定量逆转录-聚合酶链反应检测白血病bcr/abl mRNA显示文摘目的 建立荧光定量RT PCR法检测白血病融合基因bcr ablmRNA的方法 ,为白血病临床诊断及微量残留病监测提供有用工具。方法 RT PCR扩增培养的K5 6 2细胞bcr abl融合基因 ,A T载体克隆法构建定量标准模板 ,用PE770 0型检测仪 ,建立荧光定量RT PCR方法 ,对方法的灵敏性、稳定性、重复性进行测定 ;定量检测 14例慢性髓细胞白血病 (CML)患者和 4例急性淋巴细胞白血病(ALL)患者外周血样本。结果 建立的荧光定量RT PCR方法 ,可检测出约 10 - 5μgK5 6 2总RNA中的bcr abl融合基因和 10个bcr abl重组质粒拷贝 ,重复性的CT值 (Cyclethreshold)管间、批间变异系数 (CV)分别为 :2 0 % ,3.7%。 14例CML患者bcr abl融合基因表达量中位数为 5 .15× 10 4 拷贝 μgRNA ,产物经电泳分析 ,其中 11例为b2a2 ,3例为b3a2 ,1例 12× 10 4 拷贝 μgRNA的CML患者 ,骨髓移植后 1个月变为 0 .2 3× 10 4 拷贝 μgRNA。 4例ALL患者中 1例有bcr abl融合基因的表达 ,为b2a2 ,表达量为 8.2×10 5拷贝 μgRNA。 结论 建立的荧光定量RT PCR方法灵敏、特异、重复性好 ,结果用拷贝数表示 ,准确可靠 ,利于统一标准。该方法能检测出b2a2、b3a2两种类型的融合基因 。 | 高劲松 仝明 何蕴韶 聂常富 周远帆 | 2002 | 中华血液学杂志2002，23，7： | 3 |
| 9 | BCR-ABL融合抗原诱导特异性同源白血病融合细胞杀伤效应研究显示文摘目的:观察多表位BCRABL融合抗原在体外激发的免疫反应对同源白血病融合细胞的杀伤效应,探索慢性髓性白血病chronicmyeloidleukemiaCML免疫治疗的新途径。方法:用人工合成含有不同HLAhumanleukcyteantigen限制性的BCRABL多个表位的融合蛋白免疫C57BL/6小鼠,取小鼠脾细胞进行体外培养,以四唑盐MTT比色法测定鼠CTLscytotoxiclymphocytes介导的特异性杀伤效应。结果:融合抗原激发产生的鼠CTL能特异性杀伤靶细胞(P<0.01但不杀伤对照组靶细胞(P>0.05。结论:设计的多表位BCRABL融合抗原能激发特异性免疫反应,并对同源白血病细胞产生特异性杀伤,为进一步实验奠定了关键基础。 | 郑维扬 刘晓力 张明徽 黄建生 兰和魁 尹芳 任大明 周淑芸 | 2001 | 癌症2001，20，2： | 2 |
| 10 | 巢式聚合酶链反应对白血病融合基因的检测分析显示文摘目的:探讨并分析巢式聚合酶链反应在白血病融合基因中的检测与应用。方法:回顾性分析71例白血病患者的临床资料,运用巢式聚合酶链反应,检测患者包括bcr/abl、PML/RARa、AML/ETO所有融合基因融和变异的引物阳性率。结果:38例慢性粒细胞白血病患者,bcr/abl融合基因的总阳性率为83.4%。12例急性早幼粒细胞白血病患者,PML/RARa融合基因的总阳性率为57.1%。6例急性粒细胞白血病M2患者,AML/ETO总阳性率为27.9%。结论:巢式聚合酶链反应具有较高准确性、灵敏性、简便性,为临床治疗提供较高的参考价值。 | 李运斌 李欣 | 2012 | 吉林医学2012，33，9： | 2 |
| 11 | bcr/abl mRNA反义寡核苷酸对慢性粒细胞白血病Ph^+细胞的作用显示文摘Ph^+慢性粒细胞白血病(CML)的bcr/abl融合基因在其发病机制中具有重要作用。为研究bcr/abl反义寡核苷酸对CML细胞的作用,将合成两种18个碱基的bcr/abl硫代反义寡核苷酸与相应CML细胞系(K562细胞)及患者细胞共同孵育。结果发现,bcr/abl反义寡核苷酸可明显抑制K562细胞生长;对CML细胞CFU-GM抑制率为54%—91%,部分病例CFU-GM可有bcr/abl mRNA消失而PCR检测为阴性。上述抑制都是序列特异性的,与剂量呈正相关关系。通过流式细胞仪PI染色分析DNA含量,检测具有凋亡间接特征的亚二倍体细胞数量,发现反义寡核苷酸诱导细胞凋亡是其主要作用机制。本实验为bcr/abl反义寡核苷酸CML基因治疗及体外骨髓净化提供了依据。 | 孙竞 周淑芸 冯茹 伍柏松 | 1996 | 中国实验血液学杂志1996，4，3： | 2 |
| 12 | 异基因造血干细胞移植后复发慢性髓系白血病患者嵌合体和融合基因的动态观察显示文摘本研究利用STR-PCR结合RT-PCR定量和定性检测异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后患者嵌合体和融合基因的表达,分析其植入和微小残留病变情况,评价其对复发的预测价值。采用STR-PCR结合毛细管电泳进行定量检测嵌合体供体细胞嵌合率,采用RT-PCR方法检测融合基因转录本bcr/abl mRNA。结果表明:4例患者在移植后28天均为100%供者型嵌合,融合基因bcr/abl mRNA均为阴性。但在以后的随访过程中发现4例患者在不同时间出现不稳定混合嵌合(MC)状态(DC为0%-80.4%),融合基因bcr/abl mRNA阳性;其中2例复发后一直处于混合嵌合状态,另外2例在临床干预治疗后又转变为完全嵌合状态,目前处于分子生物学缓解状态。上述4例复发患者均在出现临床症状前发生供体细胞嵌合率(DC)下降;融合基因表达阳性。结论:STR-PCR在敏感范围内,其结果与RT-PCR的结果符合率高,两种技术的结合是一种检测异基因造血干细胞移植后供体是否植入的有效手段,对判断疾病复发及GVHD均有预警作用,对实施临床干预治疗有重要指导价值。 | 孙敬芬 赵丹丹 韩晓苹 金红实 于力 | 2008 | 中国实验血液学杂志2008，16，4： | 2 |
| 13 | 用于检测残留白血病细胞的基因标志显示文摘用于检测残留白血病细胞的基因标志四川省卫生管理干部学院(成都610041)陶元鋆残留白血病细胞或称白血病微小残留病(MRD),是指白血病经化疗或骨髓移植后达完全缓解(CR),骨髓中原始细胞已≤5%,但仍在体内残留的用传统方法检测不到的微量白血病细胞(... | 陶元鋆 | 1996 | 上海医学检验杂志1996，11，2： | 1 |
| 14 | bcr/abl反义核酸体外净化自体骨髓移植的临床报告显示文摘报告了国内首例bcr/abl反义核酸体外 净化的慢性髓细胞白血病自体骨髓移植、净化后存留CUF-GM的bcl/ablmRNAPCR(一),移植后12月仍保持50%的Ph(一)造血重建,至今已无病生存30个月。反义核酸体外净化尚未见明显毒副作用。 | 孙竟 周淑芸 | 1997 | 第一军医大学学报1997，17，1： | 1 |
| 15 | bcr-abl P210和abl基因实时荧光定量PCR检测共用质粒标准品的制备及应用显示文摘目的建立一个荧光实时定量PCR(RQ-PCR)共用质粒标准品,用于同时检测bcr-abl P210白血病融合基因和abl内参基因。方法分离K562细胞RNA,反转录为cDNA,以此为模板,设计引物进行PCR,PCR产物经琼脂糖电泳、胶回收,T-A载体克隆后,转化JM109工程菌,抽提质粒、测序、测定拷贝/μl,冻存备用。以RQ-PCR和定性巢式PCR进行验证,检测23例CML患者的骨髓标本,并同bcr-abl基因荧光原位杂交(FISH)结果比较。结果获得了预期的模板质粒,以欧洲抗癌协会推荐的引物探针RQ-PCR检测bcr-abl P210和abl基因,浓度相同时,Ct值相同;反复检测日内差和日间差均<5%。23例标本按FISH结果≥10%(n=8)、0.5%~10%(n=6)和阴性(n=9)分组,RQ-PCR结果分为0.492±0.263、0.023±0.033和(4.33±3.84)×10^(-4);FISH阴性组和其余两组间P值均<0.001,三组间P值均<0.05。结论该研究建立了bcr-abl P210基因和abl基因共用的质粒标准品,定量准确,性质稳定,能简化操作,满足临床检测和科研的要求。 | 江千里 孟凡义 江汕 杨柳 李冰 宋兰林 冯茹 周淑芸 | 2007 | 白血病.淋巴瘤2007，16，3： | 1 |
| 16 | PCR定点诱变方法构建BCR-ABL cDNA竞争性PCR内参照物显示文摘本实验通过合成与原有下游引物 (B)相似的一条新引物 (B′) ,经聚合酶链反应 (polymerasechainreaction ,PCR)扩增出比原BCR ABLcDNA序列减少了 4个碱基的参照物 ,达到定点诱变的目的。经酶切分析证明 ,两型BCR ABLmRNA均可通过此方法得到相应的cDNA参照物。参照物和待测模板的共扩增产物可通过毛细管电泳达到基线分离 ,证明了其可行性。该参照物可用于慢性粒细胞白血病BCR ABL融合基因的竞争性PCR 。 | 田红 孙竞 周小棉 周淑芸 徐兵 杨艺 | 2000 | 中国实验血液学杂志2000，8，2： | 1 |
| 17 | PDGFRB基因易位的不典型慢性髓细胞白血病的临床观察显示文摘目的探讨涉及PDGFRB基因易位的不典型慢性髓细胞白血病(CML)的诊断和治疗。方法对1例不典型CML患者进行骨髓细胞染色体核型分析,RT-PCR检测bcr/ab l融合基因,荧光原位杂交(FISH)检测PDGFRB基因易位,羟基脲和干扰素治疗并观察疗效。结果该例患者的骨髓细胞染色体核型为46,XY,t(5;12)(q33,p13),bcr/ab l融合基因阴性,FISH检测证实PDGFRB基因的断裂易位。应用羟基脲和干扰素治疗,随访34个月,外周血象平稳,骨髓未缓解。结论 PDGFRB基因易位的不典型CML是一特殊的MPD亚型,确诊依赖分子生物学检查,伊马替尼治疗可以改善该亚型MPD患者的预后。 | 吕书晴 龚胜蓝 杨建民 黄崇媚 韩凤来 王健民 | 2011 | 临床肿瘤学杂志2011，16，5： | 1 |
| 18 | 筑巢式PCR检测慢性粒细胞白血病bcr/ablm RNA显示文摘目的:观察慢性粒细胞性白血病(CML)患者bcr/ablmRNA的表达情况。方法:应用逆转录筑巢式聚合酶链反应(NestedPCR)检测了32例CML患者的bcr/ablmRNA。结果:30例检测到bcr/ablmRNA;其中19例检测到bcrexon3/ablexon2mRNA,7M表达bcrexon2/abl。exon2mRNA.4例同时表达这两种mRNA。结论:NestedPCR是检测CML患者bcr/ablmRNA有效而敏感的方法。 | 程久芬 荆腊滢 周云 李震宇 郑田春 | 1999 | 镇江医学院学报1999，9，1： | 0 |
| 19 | 原位逆转录PCR检测干细胞因子mRNA在白血病细胞的表达显示文摘目的探索应用原位逆转录PCR(RT-PCR)检测低拷贝的干细胞因子mRNA在白血病细胞表达的可行性。方法在普通的PE480型PCR仪进行原位RT-PCR,检测干细胞因子mRNA在K562、HL-60和慢性粒细胞性白血病细胞的表达。结果直接法和间接法原位RT-PCR均可以检测到干细胞因子mRNA在K562、HL-60和慢性粒细胞性白血病细胞表达,而常规的原位杂交则为阴性。结论(1)干细胞因子在K562、HL-60和慢性粒细胞性白血病细胞均有表达,但是表达量较低,应用原位RT-PCR可进行检测;(2)在普通的PE480型PCR仪上可以进行原位PCR。 | 吴彬 刘晓力 宣文兰 冯茹 尹芳 周淑芸 | 2002 | 第一军医大学学报2002，22，6： | 0 |
| 20 | 检测bcr/abl融合基因在急性淋巴细胞白血病治疗中的意义显示文摘目的了解急性淋巴细胞白血病患者治疗中bcr/abl融合基因的情况,探讨检测bcr-abl融合基因的临床意义。方法应用反转录一巢式聚合酶链反应(nest—PCR)检测52例急性淋巴细胞白血病(ALL)患者骨髓标本ber—abl融合基因。结果52例ALL患者bcr/abl融合基因阳性18例,其中ber—abl融合基因阳性者7例缓解,CR率为38.9%;阴性者27例缓解,CR率为79.4%。对34例缓解患者进行短期随访,共有13例复发。7倒诊断时ber/abl(+)的缓解期患者,证实仍有6例存在bcr/abl残余克隆。此6例CR期有MRD存在的患者在随访时间内全部复发。而27例缓解期不存在MRD的患者有7例复发。MRD阴性者复发率为25.9%,MRD阳性者复发率为100%,复发率差异有统计学意义(P〈0.05)。结论急性淋巴细胞白血病患者治疗过程中检测bcr—abl融合基因有助于ALL病情观察;对于缓解期患者MRD的检测,增加了预后评估价值。 | 吴兆勇 周君纯 郑丽 刘家华 龙亚银 | 2010 | 现代检验医学杂志2010，25，1： | 0 |
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