2篇
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| 1 | 外膜孔道蛋白ompC、ompF的表达与大肠埃希菌耐药的相关性研究显示文摘目的研究外膜孔道蛋白ompC、ompF引起细胞膜通透性改变与大肠埃希菌(ECO)对抗菌药物形成耐药的相关性。方法设计复合引物对ompC全基因序列和ompF、ompA、fepA、cirA、chuA等基因序列进行扩增,回收PCR产物、钝化后测序;菌体外膜蛋白进行SDS-PAGE电泳,回收的目标膜蛋白条带经胰蛋白酶消化,采用质谱仪分析蛋白成分并进行蛋白序列的测定。结果SDS-PAGE电泳图谱和质谱分析显示,7株大肠埃希菌均有相应的外膜孔道蛋白ompC和ompA表达,无外膜孔道蛋白ompF表达;第6、7菌株的孔道蛋白ompC和ompA表达量明显减少,但有铁运输蛋白chuA、cirAf、epA的表达;基因扩增显示7株大肠埃希菌均有ompF产物,耐药性较强的第6、7菌株还有fhuA和cirA扩增产物,但产物fhuA的相对分子质量小于ECO-k12(少54 bp)。结论持续使用抗菌药物将导致细菌外膜孔蛋白ompF低表达或不表达,外膜孔蛋白ompC氨基酸序列的改变影响相应蛋白的表达,使细胞膜通透性降低,从而增加细菌对抗菌药物的耐药性;高度耐药的大肠埃希菌伴随代偿性铁运输蛋白chuA、cirA、fepA的表达,维持细菌的新陈代谢,保持其高水平耐药性。 | 戎建荣 王淑峰 Alison S.Low Ian R.Booth | 2009 | 中华医院感染学杂志2009，19，6： | 9 |
| 2 | 构建相应ompC基因质粒了解孔道蛋白突变与大肠埃希菌耐药的关系显示文摘目的:研究和分析细胞膜孔道蛋白OmpC的突变与大肠埃希菌对抗生素生耐药的关系。方法:将野生株E.coliK-12的低拷贝孔道蛋白ompC基因转入两株临床分离的对抗生素耐药性不同的大肠埃希菌菌体细胞中(1号和7号),检测比较它们在转化前后对不同抗生素的MIC值。同时克隆1号和7号菌株的孔道蛋白ompC基因,构建相应的质粒分别转化入HN705受体细胞内,观察其细菌对药物的最低抑菌浓度(MIC)值的变化,了解孔道蛋白改变与细菌耐药的相关性。外膜蛋白采用SDS-PAGE电泳和质谱仪进行分析。结果:临床分离的1号大肠埃希菌在获得野生株ompC基因前后其MIC值无显著变化;临床分离菌株7号大肠埃希菌在获得野生株ompC蛋白基因后,对卡巴培能、美罗培南和亚胺培南的MIC值显著下降,对药物的敏感性增强,说明野生株ompC基因在7号菌体内表达以后恢复了细胞膜的部分通透功能,使更多的抗生素进入细菌体内达到作用靶位,降低了细菌对抗生素的耐药水平。结论:大肠埃希菌孔道蛋白ompC氨基酸序列的改变影响相应蛋白的表达,使细胞膜通透性降低,增加细菌对抗生素的耐药性。 | 戎建荣 王淑峰 李连青 Alison S.low Ian R.Booth | 2010 | 中国卫生检验杂志2010，20，5： | 1 |
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