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| 1 | 茶树基因组DNA提纯与鉴定显示文摘采用在细胞核被裂解之前去除细胞质中的茶多酚和蛋白质,而后用SDS裂解细胞核,异丙醇和乙醇沉淀基因组DNA的方法,分别从不同茶树品种新梢、干梢及冰冻新梢中成功地提取和纯化基因组DNA,并对其DNA的得率和质量进行了鉴定。DNA的得率在205~963ng/mg鲜重之间,所得到的DNA样品片段均大于21kb,适宜于进行限制性酶切和RAPD反应。实践证明,上述提取富含酚类物质植物基因组DNA的方法,不仅迅速简单,而且经济有效。 | 陈亮 陈大明 高其康 杨亚军 虞富莲 | 1997 | 茶叶科学1997，17，2： | 82 |
| 2 | 15个茶树品种遗传多样性的RAPD分析显示文摘应用十聚体随机引物.对原产于福建、湖南、浙江、陕西、贵州、江西和湖北等省的15个无性系品种及其中2个品种的扦插繁殖后代的基因组DNA的遗传多样性进行RAPD分析,结果表明,20个随机引物在15个品种中共扩增出1050个位点.平均每个引物52.5个,每个品种70个位点。在得到的137条谱带中只有8条是所有品种共有的(单态的),129条是多态的,多态性程度达94.2%,证明了中国茶树品种资源在DNA分子水平上具有很高的遗传多样性。类平均法聚类结果表明,可将15个品种分成五个类群:A类群为江苦2号、蓝山苦茶、蓝标1号、北斗1号、福建水仙和政和大白菜等6个品种,B类群为早春早芽、乌牛早和黄叶早等3个品种,C类群为蒿坪茶、狗牯脑、大方贡茶和恩标等4个品种,汝城早芽、龙井43单独成为二个类群。从类群内多态度来看,类群B多态性最低,类群C次之,类群A最高。从类群间平均多态度和净遗传距离反映出类群A与B、B与C之间的差异程度较小且基本相似.而类群A与C之间的差异程度要大得多。 | 陈亮 杨亚军 虞富莲 高其康 陈大明 | 1998 | 茶叶科学1998，18，1： | 75 |
| 3 | 蔗扁蛾触角扫描电镜观察显示文摘用扫描电子显微镜对蔗扁蛾触角感器的观察结果表明:蔗扁蛾触角上共分布有6种感器,它们是毛形感器、刺形感器、锥形感器、具缘毛腔锥感器、鳞形感器和端毛.其中鳞形感器的着生方式与其它昆虫有明显的区别,从正面看只有一个感器,但在它的下面还有3~5个感器,而且每组相互排列非常整齐有规律. | 沈杰 楼兵干 沈幼莲 高其康 | 2005 | 浙江林业科技2005，25，6： | 31 |
| 4 | 茶树RAPD反应系统和扩增程序优化显示文摘以龙井43为材料,使用国产PCR仪,对茶树RAPD分析中影响PCR扩增结果的因素进行了研究,确定了茶树RAPD的最适反应系统和扩增程序,即在25μl反应体系中,含25~50ng模板DNA、2mmol/LMgCl2、各0.2mmo/LdNTPs、0.2μmol/L引物和0.5~1.0UTanDNA聚合酶;扩增程序为:94℃预变性180s,94℃变性60s,38℃退火90s,72℃延伸120s,共进行40~45个循环,最后72℃延伸300~600s,这样可以取得较好的扩增结果。 | 陈亮 高其康 杨亚军 虞富莲 陈大明 | 1998 | 茶叶科学1998，18，1： | 28 |
| 5 | 印度梨形孢对水稻的促生作用及其机理的初探显示文摘印度梨形孢(Piriformospora indica)是一种能与植物建立互惠共生关系的根部内生真菌,能促进植物生长,增加作物产量。为了研究印度梨形孢对水稻生长发育的影响,将印度梨形孢与籼稻苗共培养后,分析印度梨形孢对水稻植株高度、生物量、分蘖数、抽穗期、穗粒性状、叶绿素含量、硝酸还原酶活性、根系活力以及生长相关调控基因表达水平的影响。结果显示,接种印度梨形孢的水稻株高、地上部干鲜质量、分蘖数、硝酸还原酶活性和根系活力显著高于对照;与对照相比,印度梨形孢定殖的水稻植株抽穗期提前4~6d;印度梨形孢处理第3、4周后,叶片叶绿素含量比对照分别增加了19.77%和17.89%。RT-PCR分析表明,印度梨形孢定殖的水稻植株叶片中生长素相关调控基因OsIAA13和YUCCA的上调表达,表达量分别为对照的1.49倍和1.30倍;负调控水稻生长的NRR基因表达量为对照的58%。印度梨形孢促进水稻地上部的生长与叶绿素含量、硝酸还原酶活性、根系活力和生长相关调控基因的表达有关,印度梨形孢可能通过提高光合速率、增强水稻对矿质营养的吸收与利用和诱导生长素的分泌,促进水稻地上部的生长。 | 吴金丹 陈乾 刘晓曦 林福呈 高其康 楼兵干 | 2015 | 中国水稻科学2015，29，2： | 28 |
| 6 | 野蚕黑卵蜂触角感器的超微结构研究显示文摘扫描电镜观察表明:野蚕黑卵蜂Telenomus theophilae Wu et Chen触角上存在着9种感觉器。其中锥形感器、毛形感器Ⅰ型、具沟端弯感器、多侧孔感器、栓锥感器和钟形感器雌雄均有,仅数量和分布存在差异;毛形感器Ⅱ型和端孔坛形感器只在雌蜂触角上存在,而端突柱形感器则为雄蜂所特有。感器种类、数量和分布在性别间的差异,为研究该蜂寻找生境和寄生行为提供了形态学依据。 | 高其康 胡萃 | 1993 | 浙江农业大学学报1993，19，4： | 25 |
| 7 | 中华蜜蜂气味结合蛋白ASP2 cDNA的克隆及原核表达显示文摘【目的】克隆、分析和原核表达编码中华蜜蜂气味结合蛋白ASP2的cDNA。【方法】以13个不同日龄中华蜜蜂工蜂触角为材料,通过RT-PCR技术以获得编码中华蜜蜂Apis cerana cerana气味结合蛋白ASP2基因成熟蛋白开放阅读框序列,并在pET-30a(+)/BL21(DE3)系统中进行原核表达。【结果】克隆了命名为Acer-ASP2(GenBank登录号:DQ449667)的中华蜜蜂气味结合蛋白ASP2基因,该序列全长429bp,编码142个氨基酸残基,预测分子量和等电点分别为15.7kD和4.36。预测蛋白具有昆虫气味结合蛋白典型的6个保守的半胱氨酸残基的特征,进一步分析表明Acer-ASP2极有可能属于GOBP家族。构建的原核表达载体pET/Acer-ASP2,在大肠杆菌BL21(DE3)中成功地表达出一个分子量约为21kD的融合蛋白,融合蛋白大部分以包涵体的形式存在于菌体沉淀中(约59.7%),经洗涤和尿素梯度溶解对包涵体进行了纯化,经凝胶光密度扫描分析,约占最终产物的81.2%左右。【结论】克隆、分析和表达了一个新的编码中华蜜蜂气味结合蛋白ASP2cDNA序列,为进一步研究其分子结构和功能奠定了基础。 | 李红亮 聂文敏 高其康 程家安 | 2008 | 中国农业科学2008，41，3： | 26 |
| 8 | 印度梨形孢诱导油菜抗旱性机理的初步研究显示文摘印度梨形孢(Piriformospora indica)是一种根部内生真菌,能够促进许多植物的生长,提高作物的产量,而且还能诱导植物产生对生物或非生物胁迫的抗性。为了研究印度梨形孢对油菜(Brassica napus L.)抗旱性的影响,本研究用20%的聚乙二醇6000(PEG)对有印度梨形孢定殖和无印度梨形孢定殖的油菜植株进行模拟干旱胁迫处理,分析两者在受干旱胁迫后丙二醛(MDA)含量、相对电导率大小、脯氨酸(Pro)含量、抗氧化酶(超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT))活性以及干旱相关基因表达水平的差异。结果表明,接种印度梨形孢的油菜植株叶片中MDA含量和相对电导率均显著低于未接种印度梨形孢的油菜植株;Pro含量显著高于未接种印度梨形孢的油菜植株,在PEG处理后的第72小时,接种印度梨形孢的油菜叶片中Pro含量是未接种印度梨形孢的油菜的1.3倍;SOD、POD和CAT活性明显高于未接种印度梨形孢的油菜植株,PEG处理后的第24小时SOD、POD和CAT活性分别是对照油菜的1.17、1.38和1.27倍。RT-PCR分析表明,干旱胁迫下有印度梨形孢定殖的油菜叶片中编码合成脂质转运蛋白的基因575表达上调,PEG处理后的第9小时其表达量是对照的3.2倍。本研究研究结果表明印度梨形孢提高油菜对干旱胁迫的抗性与MDA含量、质膜透性、Pro含量、抗氧化酶活性和干旱相关基因的表达相关,印度梨形孢可能是通过提高油菜整体抗氧化能力、维持细胞生物膜完整性和细胞内渗透压以及降低膜脂的过氧化水平,从而增强了油菜对干旱胁迫的抗性。本研究初步明确了印度梨形孢提高油菜抗旱性的作用与部分机理,为深入研究印度梨形孢提高油菜的抗逆性作用及其机理提供基础资料。 | 陈佑源 楼兵干 高其康 林福呈 | 2013 | 农业生物技术学报2013，21，3： | 26 |
| 9 | 茶树优质资源遗传稳定性的RAPD分析显示文摘应用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术,对汝城早芽、蓝标1号、云桂大叶、日铸茶、举岩茶等5份茶树优质资源及其扦插繁殖后代的遗传稳定性进行了分析。结果表明,基因组DNA的平均得率为772μg/g鲜重,A260/A280在169~183之间,20个随机引物在5份资源中共扩增出412个位点,平均每个引物206个,每份资源824个位点,扩增产物片段大小约在04~25kb之间,多态性程度达849%。20个随机引物在5份优质资源及其扦插繁殖后代的RAPD扩增结果显示,无论是谱带的类型还是谱带的强弱,资源内是一致的,从而在DNA分子水平上证明了扦插繁殖的遗传稳定性。 | 陈亮 虞富莲 杨亚军 陈大明 徐昌杰 高其康 | 1999 | 茶叶科学1999，19，1： | 24 |
| 10 | 山茶属8种1变种花粉形态比较显示文摘在光学显微镜和扫描电子显微镜下,对山茶属Camelia8个种1变种植物花粉形态进行了比较观察。结果表明,山茶属植物花粉粒为中粒或大粒,多为长球形,极面观多为三裂圆形;具3孔沟,沟较细长,内孔有多种形状;表面多具网状或拟网状纹饰,网眼和网脊的大小、形状在种间存在一定的差异。本属植物花粉形态较为一致,表明是一个自然类群。茶组植物花粉形态是从表面较光滑的小穴网状类型向较为突起的网状演化的。 | 陈亮 童启庆 高其康 束际林 虞富莲 | 1997 | 茶叶科学1997，17，2： | 22 |
| 11 | 茶树新梢cDNA文库的构建和ESTs测序成功率初步分析显示文摘报道了国内第一个茶树cDNA文库的构建及其EST测序成功率分析。以Trizol一步法从龙井43春茶新梢中提取总RNA,分离纯化富含Poly (A)的mRNA,LD-PCR反转录合成双链cDNA,以λTripEX2为载体,构建了龙井43新梢cDNA文库。以XL1-Blue为受体菌测定原始文库的滴度为6.8×105 pfu/ml,总克隆数为3.5×105个,重组率为98.05%,扩增后文库总滴度为7.2×109 pfu/ml。对随机挑取的噬菌斑进行PCR鉴定,表明插入片段大多分布在0.5-2.0 kb之间,绝大部分在1.0-1.5 kb左右。文库质量鉴定结果表明,构建的茶树新梢cDNA文库具有较好的库容量、较高的重组率以及较大的插入片段。对4320个克隆的序列测定表明,获得有用序列2963个,测序成功率为68.5%,剔除短序列后,首批共获得1687个茶树ESTs。 | 陈亮 赵丽萍 高其康 | 2004 | 茶叶科学2004，24，1： | 20 |
| 12 | 水稻大规模质粒测序影响因素分析显示文摘以水稻cDNA克隆为材料 ,讨论了应用MegaBACE 10 0 0DNA分析系统进行大规模质粒测序的特点 ,并着重对影响大规模质粒测序效果的相关因素进行了分析 ,认为质粒DNA的质量是影响测序效果的决定性因素 ,而同一批测序反应中保证各反应终产物的均一性是提高大规模测序成功率的关键。 | 毛伟华 高其康 | 2004 | 中国水稻科学2004，18，5： | 18 |
| 13 | 高通量测序及其在食物网解析中的应用进展显示文摘高通量测序是DNA测序技术发展中的重大突破,它的出现为现代生物科学研究提供了前所未有的机遇,例如基于猎物和寄主植物DNA分子解析生态系统的食物网研究已逐渐成为捕食性动物与植食性动物食物网研究的新型模式。在简要总结Roche 454、Illumina和Ion Torrent为代表的第二代测序技术的原理及最新进展的基础上,综述了近年来利用高通量测序技术在捕食性和植食性动物食物网解析构建研究方面取得的最新进展及存在的问题,以期为探索捕食性和植食性动物的猎物/寄主范围、猎物/寄主转换、资源分配、生物防治、生物保护和生态恢复新方法提供思路和启发。 | 王雪芹 王光华 乔飞 高其康 Kong Luen HEONG 祝增荣 程家安 | 2017 | 生态学报2017，37，8： | 17 |
| 14 | 印度梨形孢诱导烟草对黑胫病的抗性及其机理的初步研究显示文摘印度梨形孢(Piriformospora indica)是分离自印度塔尔沙漠的植物根系内生真菌,能够诱导多种植物对生物和非生物逆境产生抗性,目前已作为一种模式真菌用于内生真菌与植物互作关系的研究.为了研究印度梨形孢对烟草(Nicotiana tobacum)抗黑胫病的影响,本研究采用烟草疫霉菌(Phytophthora parasitica var.nicotianae)分别接种根部有印度梨形孢定殖与未定殖的烟草,观察接种后根部有印度梨形孢定殖与未定殖的烟草发病情况,测定抗病相关防御酶苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)的活性变化及抗病相关基因的表达量,并通过平皿对峙试验研究印度梨形孢对烟草疫霉菌生长的影响.结果表明,接种烟草疫霉菌后,根部有印度梨形孢定殖的烟草发病严重度要显著低于对照;接种烟草疫霉菌后第1~10 d,根部有印度梨形孢定殖的烟草叶片中防御酶PAL、POD和PPO活性高于对照,在第1d,PAL活性是对照烟草的3.99倍,在第2d,POD活性是对照烟草的1.5倍,在第4d,PPO活性是对照烟草的2.66倍;实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR,qRT-PCR)结果显示,接种烟草疫霉菌后第6~96 h,根部有印度梨形孢定殖的烟草叶片中抗病相关基因PR1b、P450-2、hrs203J、NmIMSP和P450-1的表达量高于对照;在第12h,PR1b、P450-2、hrs203J的表达量分别是对照烟草的3.8、15.7和3.1倍,在第48 h,NmIMSP的表达量是对照烟草的2.6倍,在第72 h,P450-1的表达量是对照烟草的1.5倍;平皿对峙试验结果显示印度梨形孢对烟草疫霉菌的生长没有抑制、重寄生作用.研究结果表明,印度梨形孢可显著提高烟草对黑胫病的抗性,对黑胫病的抗性不是通过印度梨形孢分泌的抗菌物质实现的,是与烟草中抗病相关基因表达量的上升、防御酶活性的提高有关.本研究初步揭示了印度梨形孢诱导烟草抗黑胫病的相关机理,为进一步深入研究烟草黑胫病的生物防治及其机理提供基础资料。 | 彭兵 刘剑 惠非琼 王玉平 高其康 楼兵干 | 2015 | 农业生物技术学报2015，23，4： | 15 |
| 15 | 茶树新梢cDNA克隆测序和表达序列标签(ESTs)特性分析显示文摘采用定向克隆法,构建了茶树(Camellia sinensis(L.)O.Kuntze)龙井43和安吉白茶等2个品种新梢cDNA文库.对龙井43 cDNA文库共4 320个克隆的序列进行了测定,获得有用序列2 963个,其中空载体和去除载体后序列短于150 bp有416个,重复的有863个,首批共获得1 684个茶树ESTs.绝大部分ESTs的长度在300~700 bp之间,平均为478 bp.通过与NCBI等核酸数据库进行比对、查询和注释,获得已知功能基因或具推测功能的基因130多个(607个ESTs),新的表达基因1077个,证明ESTs测序分析是一个发现和鉴定茶树功能基因的高效快速新途径. | 陈亮 赵丽萍 高其康 | 2005 | 农业生物技术学报2005，13，1： | 14 |
| 16 | 中华蜜蜂化学感受蛋白基因Acer-CSP1克隆与表达特征分析显示文摘化学感受蛋白(chemosensory proteins,CSPs)是昆虫化学感受系统中重要的组成部分之一。本研究克隆了中华蜜蜂Apis cerana cerana化学感受蛋白基因Acer-CSP1,其核苷酸全长351bp(GenBank登录号为FJ157352),编码116个氨基酸残基,预测蛋白分子量为13.85kD,等电点为4.89,且含有4个保守的半胱氨酸残基,均符合昆虫CSPs的一般特征,且与意蜂CSP1基因具有99.1%的相似性,与其他昆虫也有45.3%~68.0%的相似性。利用2-ΔΔCt法及绝对定量法的real-time PCR技术对Acer-CSP1在中蜂不同器官表达特征进行了研究,得出的一致结论为Acer-CSP1显著水平地高丰度表达于中华蜜蜂触角,其次大量表达于头部。由于触角为中华蜜蜂最主要的嗅觉器官,而头部则具有发达的感觉神经系统和味觉系统,这也提示Acer-CSP1极有可能参与中华蜜蜂的嗅觉以及其他化学感受功能。 | 李红亮 倪翠侠 姚瑞 高其康 商晗武 | 2010 | 昆虫学报2010，53，9： | 13 |
| 17 | 榨菜胞质雄性不育系花器形态结构及遗传变异显示文摘以芥菜(Brassica juncea)不育胞质×结球白菜(B. campestris ssp. pekinensis)的种间杂种(F_1)为不育胞质供体,榨菜(B. juncea var. tumida)为受体,通过连续回交,每世代的全部植株的花器均具有雄性不育特征。初步育成了榨菜胞质雄性不育系(F_1BC_4),其雄蕊无正常花药结构,整个雄蕊呈丝状或瓣状或羽毛状;部分雄蕊心皮化,部分雄蕊的基部或上中段囊状物中有发育不良的花粉粒,表面无正常花粉的网状雕纹;其自然结实力(13.1粒/果)和蜜腺数(3.5枚)接近保持系。榨菜胞质不育系基本上克服不育胞质供体存在的黄叶株,雌性功能障碍、蜜腺缺失、败蕾等现象,从而提高了繁殖能力,并在育种上有较高的利用价值。我们还讨论了芸薹属蔬菜雄性不育表现型的分类。 | 陈竹君 高其康 吴根良 汪炳良 孙伟国 龚兰 | 1993 | 浙江农业学报1993，5，3： | 13 |
| 18 | 影响野蚕黑卵蜂寄主识别和接受的一些因素显示文摘对野蚕黑卵蜂寄主识别和接受的研究结果表明,野蚕黑卵蜂接受寄主除化学因子外,还与寄主卵的物理性状有关.野蚕黑卵蜂优先接受那些大小与其寄主卵相仿的人造卵,大于寄主卵的检验和接受率明显降低.在25℃下,随着涂利它素人造卵保存时间的延长,野蚕黑卵蜂对其识别接受率有所下降,至45天仍有80%的人造卵对野蚕黑卵蜂有引诱作用,到60天时有23.33%的人造卵有引诱作用. | 高其康 胡萃 | 1997 | 浙江农业大学学报1997，23，6： | 12 |
| 19 | 中华蜜蜂信息素结合蛋白ASP1 cDNA的克隆及时空表达显示文摘信息素结合蛋白(pheromone binding proteins,PBPs)在昆虫信息素的识别、传递和处理过程中具有重要作用。本研究首次克隆r中华蜜蜂Apis cerana cerana的一个PBP基因Ac-ASP1(GenBank序列号为DQ449670),其预测蛋白具有典型的气味结合蛋白(OBPs)标志(即成熟肽含有6个保守的半胱氨酸)。利用real-timePCR技术对Ac-ASP1在中蜂不同组织和发育历期的时空表达谱进行了鉴定。绝对定量结果显示Ac-ASP1高丰度地表达于工蜂触角(2.07×10^6拷贝数/μg),而在其他组织(如头、胸、腹、翅及足)中呈低丰度表达(10^2拷贝数/μg);相对定量结果显示Ac-ASP1在各发育历期如幼虫、蛹以及成虫发育早期(1-6日龄)均有大量表达,而在21日龄前后具有另外一个高丰度表达时期。这些结果可为明确Ac-ASP1在中蜂蜂王信息素信号识别传递过程中的作用提供参考。 | 李红亮 高其康 程家安 | 2008 | 昆虫学报2008，51，7： | 11 |
| 20 | 不同壳色皱纹盘鲍杂交家系J_1Rh F_1全长cDNA文库的构建显示文摘采用日本岩手县的野生皱纹盘鲍(J_1,♀)和中国的人工选育红壳色皱纹盘鲍突变体(Rh,(?))的配子,经人工授精建立了皱纹盘鲍杂交家系(J_1Rh)。取J_1Rh家系6月龄F_1个体的软体部组织为材料,以SMART技术构建了全长cDNA文库,命名为HD-J_1Rh文库。HD-J_1Rh未扩增文库的滴度为6.4×10~5pfu·mL^(-1)、重组率为93.75%,插入片段均大于400bp,81.25%克隆的插入片段分布在1000~1500bp之间;扩增后的文库滴度为3.07×10~9pfu·mL^(-1)。表明HD-J_1Rh文库是一个高质量的cDNA文库,可满足进行大规模EST序列分析和特定发育阶段相关基因的筛选等研究的需求。 | 刘晓 高其康 张国范 | 2004 | 水产学报2004，28，1： | 10 |
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