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| 1 | 布鲁菌病防控根本之策——动物感染的源头控制和净化显示文摘布鲁菌病(简称布病)已在全球170个国家和地区流行,严重制约畜牧业绿色健康的快速发展,威胁着人类公共卫生安全和食品安全。动物布病感染的居高不下是人间布病高发的根本原因,动物布病感染的源头防控和净化是布病防控的根本之策。参考国外动物布病的根除经验,分析我国当前布病防控形势和存在的实际问题,对动物布病的源头防控提出几点建议和对策。 | 孙长江 顾敬敏 韩文瑜 | 2020 | 中国兽医学报2020，40，4： | 6 |
| 2 | 错流萃取糠醛水溶液溶剂比的研究显示文摘本文研究了原料/溶剂(体积比)对错流萃取糠醛的影响,通过四级错流萃取试验并采用相分配系数法用UNIQUAC模型进行模拟计算,确定以溶剂比2.5∶1错流萃取糠醛较合适,且模拟计算结果与试验结果误差较小。 | 毛梅芳 顾正桂 丁敬敏 | 2006 | 天津化工2006，20，2： | 4 |
| 3 | 噬菌体解聚酶的分类与结构特征及其应用研究进展显示文摘噬菌体解聚酶(depolymerase)是一种可特异性降解细菌表面多糖的噬菌体蛋白。自该蛋白于1956年被首次报道以来,相关学者不断对其功能进行挖掘和探索。现已证实该蛋白具有快速鉴定微生物荚膜类型、清除并抑制生物被膜(biofilm)、降低细菌毒力等功能,在控制病原细菌感染等公共卫生领域具有重要的应用价值。现主要围绕噬菌体解聚酶的分类学特征、结构生物学特性以及相关应用研究进展进行综述。 | 蔡若鹏 顾敬敏 韩文瑜 | 2020 | 中国兽医学报2020，40，6： | 4 |
| 4 | 鼠伤寒沙门菌LH430株asd基因缺失株平衡致死系统的构建及生物学特性分析显示文摘本研究旨在构建基于减毒鼠伤寒沙门菌的平衡致死系统。将打靶基因片段Cat基因重组入鼠伤寒沙门菌LH430株asd基因位置,之后将温敏型质粒pCP20转入菌体中用以消除Cat基因片段,通过PCR技术两步法筛选出缺失株Δasd LH430;将asd+的原核表达质粒pYA3493转入Δasd LH430,经PCR及测序鉴定表明鼠伤寒沙门菌平衡致死系统Δasd LH430(pYA3493)构建成功。对构建的基因缺失株研究表明,该缺失株失去了在二氨基庚二酸(DAP)阴性环境中生存的能力;糖发酵试验表明,缺失菌株在利用碳源的能力方面与亲本菌株保持一致;9种生化试验结果显示,缺失菌株遗传了亲本菌株的生化特性;遗传稳定性试验表明,缺失菌株能够稳定遗传缺失的423 bp的基因片段;将绿色荧光基因转入所构建的平衡致死系统,成功构建携带绿色荧光基因的重组菌Δasd LH430(pYA-gfp),对其研究表明该重组菌能够有效表达绿色荧光蛋白。本研究成功构建了鼠伤寒沙门菌平衡致死系统Δasd LH430(pYA3493),能够有效表达所携带的基因,该系统可作为疫苗活载体来携带外源基因。 | 张明亮 孙长江 顾敬敏 崔子寅 韩文瑜 | 2019 | 中国畜牧兽医2019，46，11： | 1 |
| 5 | 基于新型佐剂的驴流产沙门菌病-兽疫链球菌病二联灭活苗的制备及其安全性和免疫原性显示文摘旨在研制预防以马流产沙门菌(S.abortus equi)和马链球菌兽疫亚种(SEZ)感染引起的孕驴流产和新生驴驹腹泻的驴流产沙门菌病-兽疫链球菌病二联灭活疫苗,并进行安全性与免疫原性评价。从山东某驴场分离和鉴定出的S.abortus equi、SEZ分离株为疫苗候选菌株,经甲醛灭活,分别与氢氧化铝佐剂和角鲨烯佐剂制备驴流产沙门菌病-兽疫链球菌病二联灭活苗。首先,检测灭活疫苗对BALB/c小鼠的安全性,比较2种不同佐剂诱导免疫保护的效果;以驴流产沙门菌病-兽疫链球菌病二联角鲨烯佐剂灭活疫苗免疫驴,凝集试验检测免疫血清的总抗体水平及血清杀菌试验检测功能性抗体水平,进一步评价二联灭活疫苗的免疫原性。结果显示,以氢氧化铝佐剂二联灭活苗免疫对5倍LD_(50)S.abortus equi和SEZ攻击BALB/c小鼠的保护率分别达到62.5%(5/8)和75.0%(6/8),而角鲨烯佐剂二联灭活疫苗对2种病原的攻击保护率均达到100%(8/8);以角鲨烯佐剂制备的二联灭活疫苗免疫驴的血清中抗流产沙门菌(10^(8)CFU/mL)的抗体凝集效价几何平均值可达1∶32,功能性抗体对S.abortus equi和SEZ的血清杀菌效价为1∶16(杀菌效率68.99%)和1∶4(杀菌效率65.47%)。S.abortus equi和SEZ 2种抗原免疫不会产生免疫干扰,角鲨烯配方佐剂与抗原结合诱导的抗S.abortus equi和SEZ致死剂量攻毒产生的保护作用强于氢氧化铝佐剂,且该二联灭活疫苗在小鼠和驴体内具有较强的保护效力与免疫原性,且安全性良好。本研究为该基于新型疫苗佐剂二联疫苗的研发奠定了坚实的基础。 | 刘明 孙长江 顾敬敏 董建宝 韩文瑜 | 2023 | 中国兽医学报2023，43，6： | 0 |
| 6 | 表达铜绿假单胞菌保护性抗原基因F1I2重组鼠伤寒沙门菌在水貂上的免疫原性研究显示文摘本试验旨在研究携带铜绿假单胞菌保护性抗原基因F 190-342(F1)和I 21-83(I2)的重组鼠伤寒沙门菌株ΔasdLH430(pYA-F1I2)在水貂上的免疫原性。将9只7月龄健康水貂随机分为3组,每组3只:对照组,皮下注射无菌生理盐水;LH430菌株免疫组,皮下注射菌株2.0×10^8 CFU/只;ΔasdLH430(pYA-F1I2)菌株免疫组,皮下注射菌株2.0×10^8 CFU/只。首免后第15天各组加强免疫一次。分别于第1次免疫后第15、30及45天断指采集水貂血液,测定血清中IgG水平。在第1次免疫后第45天分离外周血单核细胞,Eli-Spot检测F1I2特异性抗体分泌细胞数量和沙门菌特异性抗体分泌细胞数量。同时,取脾脏分离淋巴细胞,MTT法检测F1I2和沙门菌特异性的淋巴细胞增殖情况。结果表明,ΔasdLH430(pYA-F1I2)组血清中F1I2特异性IgG抗体和沙门菌特异性IgG抗体滴度在取样点逐渐升高,同时在第45天达到最大值;免疫后第45天,ΔasdLH430(pYA-F1I2)组F1I2特异性IgG分泌细胞的数量极显著高于对照组及LH430组(P<0.01),沙门菌特异性抗体分泌细胞的数量极显著高于对照组(P<0.01),与LH430组差异不显著(P>0.05)。同时,F1I2抗原和沙门菌抗原刺激组极显著增强了水貂脾脏淋巴细胞的增殖(P<0.01)。本研究可为开发防控水貂出血性肺炎和沙门菌感染的实用新型双价基因工程疫苗提供理论依据。 | 张明亮 孙长江 顾敬敏 崔子寅 韩文瑜 无 | 2020 | 中国畜牧兽医2020，47，4： | 0 |
| 7 | NDM-1肺炎克雷伯菌裂解性噬菌体的分离鉴定及其对小鼠菌血症的治疗研究显示文摘随着农村养鸡业的迅速发展,养鸡专业户越来越多。但很多饲养户缺乏养鸡的知识,没有掌握规范的饲养管理技术,不能做好疾病防治。同一批鸡苗,同期饲养,产生经济效益却有差异。1存在的问题1.1鸡舍部分鸡舍简陋,规模过小,村场紧邻,人鸡共栖。许多养鸡场多龄化饲养,鸡场内外毫不设防,饲养管理粗放;缺乏精细化管理,料位、水位、垫料、通风、隔离、消毒按各自习惯运作,基本上是"靠天吃饭"。 | 路荣 顾敬敏 刘晓贺 金连刚 曹辉 | 2013 | 中国畜牧兽医文摘2013，，9： | 0 |
| 8 | 铜绿假单胞菌F190-342-I21-83基因重组鼠伤寒沙门氏杆菌生物学特性研究显示文摘为了研究载体菌株Δasd LH430(pYA3493)携带外源基因的能力,试验采用分子生物学方法构建了携带铜绿假单胞菌的保护性抗原基因F190-342-I21-83(F1I2)的重组表达质粒pYA-F1I2,将其重组到减毒的鼠伤寒沙门氏杆菌Δasd LH430(pYA3493)中,成功构建重组菌株Δasd LH430(pYAF1I2),并研究了重组菌株的遗传稳定性、表型、毒力。结果表明:构建的重组菌株Δasd LH430(pYAF1I2)能够稳定遗传所携带的F190-342和I21-83基因;重组菌株生长速度略低于亲本菌株,且遗传了亲本菌株的糖利用能力,在碳源利用方面没有改变;与亲本菌株相比,重组菌株毒力略有下降,对动物更加安全。说明重组菌株Δasd LH430(pYA-F1I2)可作为铜绿假单胞菌-沙门氏杆菌二联疫苗的候选菌株。 | 张明亮 孙长江 顾敬敏 崔子寅 韩文瑜 | 2019 | 黑龙江畜牧兽医2019，0，21： | 0 |
| 9 | 仓鼠源缓慢葡萄球菌的分离鉴定及生物学特性研究显示文摘从死亡仓鼠的血液及内脏器官中分离出一株细菌,经镜检、菌落形态观察、培养特性观察、生化试验、PCR鉴定及16 S rRNA基因测序和同源性分析,确定该分离菌株为缓慢葡萄球菌。动物回归试验表明,分离菌可以引起实验小鼠的慢性死亡,这表明缓慢葡萄球菌具有致病性并很可能会对公共卫生安全具有潜在威胁。药敏试验显示,该分离菌株对大多数抗生素均十分敏感,但对氟喹诺酮类药物及复方新诺明有很强的耐药性。 | 盛相鹏 杜崇涛 许会会 顾敬敏 雷连成 韩文瑜 | 2010 | 动物医学进展2010，31，7： | 14 |
| 10 | 一种大肠杆菌噬菌体新裂解酶的表达与活性检测显示文摘前期分离得到1株具有较强裂解能力的大肠杆菌噬菌体vB_EcoM-ep3。测序后发现,噬菌体vB_EcoM?ep3的裂解酶基因在大肠杆菌噬菌体中尚未报道,能够编码一种新的裂解酶,并与绿脓杆菌噬菌体裂解酶具有很高同源性。为了探讨该裂解酶对大肠杆菌和绿脓杆菌的裂解活性,克隆了vB_EcoM-ep3的裂解酶基因,经原核表达和纯化,体外评价了Lysep3裂解活性。结果表明:克隆裂解酶基因Lysep3长为492 bp;表达蛋白分子质量为17.7 ku;裂解酶单独作用时,对大肠杆菌和绿脓杆菌均不能裂解,但是能够显著抑制生长;与柠檬酸配合使用(0.5 mg/mL终浓度的Lysep3和0.5 mmol/L终浓度的柠檬酸),对大肠杆菌和绿脓杆菌均表现出较好的裂解能力,作用从2~24 h持续有效,细菌数量分别下降7.2倍和17.3倍。该结果表明,vB_EcoM?ep3的裂解酶不但在基因序列上与绿脓杆菌存在进化关系,在功能上也具有相关性。该研究为解析裂解酶结构与功能的关系提供了一个良好的例证,同时有助于裂解酶的广谱性改造。 | 吕萌 王爽 闫广谋 冯新 顾敬敏 雷连成 | 2015 | 吉林农业大学学报2015，37，2： | 5 |
| 11 | 晚期胰腺癌立体定向放射治疗42例疗效观察显示文摘 | 樊锐太 冯堃 顾浩 张洪志 郭艳娜 王敬敏 | 2008 | 郑州大学学报(医学版)2008，43，1： | 5 |
| 12 | 57例非小细胞肺癌脑转移综合治疗分析显示文摘随着癌症治疗手段的进步,患者生存期延长,非小细胞肺癌(NSCLC)脑转移发生率也随之升高,文献报道达30%-50%^[1]。2004年3月至2007年4月对57例NSCLC脑转移患者采用放化同步治疗即全脑放疗(WBRT)+分次立体定向放疗(FSRT)联合多西他赛+顺铂方案化疗,现将近期疗效及副反应报道如下。 | 樊锐太 张洪志 郭艳娜 王敬敏 顾浩 | 2008 | 中华放射肿瘤学杂志2008，17，2： | 5 |
| 13 | 同步放化疗综合治疗中晚期鼻咽癌的疗效观察显示文摘目的探讨同步放化疗综合治疗中晚期鼻咽癌的临床疗效。方法1998-2006年我科收治的中晚期鼻~咽癌64例,原发灶放疗方案为双侧面颈联合野常规分割放疗40Gy后局部光子刀加量,DT量至70~76Gy/5~7周。颈部淋巴结行常规分割放疗后局部加量。同步化疗应用DF方案,放疗的前、中、后期各行1周期化疗,每周期间隔21d。观察综合治疗的疗效和患者的耐受性。结果原发灶1、6、12个月的完全缓解率为87.5%、90.6%、93.7%,颈部淋巴结完全缓解率分别为92.1%、95.3%、98.4%,1、3、5年总生存率为91.5%、80.4%、62.5%。毒副反应早期主要为骨髓抑制,胃肠道反应和口腔黏膜炎;晚期则主要为口干和颈部纤维化,患者可耐受。结论同步放化疗临床疗效好,毒副反应患者可耐受,有较高的临床推广应用价值。 | 樊锐太 郭艳娜 王敬敏 张洪志 顾浩 | 2008 | 肿瘤基础与临床2008，21，2： | 4 |
| 14 | 铜绿假单胞菌噬菌体裂解酶LysYH6的表达与活性显示文摘以耐药性铜绿假单胞菌为宿主菌分离并筛选出1株烈性噬菌体YH6,根据电镜下的形态特征,YH6为短尾噬菌体家族的成员。通过对YH6的全基因组序列测定和分析,确定了其裂解酶基因,并通过原核表达获得了噬菌体的裂解酶Lys YH6。菌落计数及浊度下降法表明:该裂解酶在EDTA(25 mmol/L)存在的条件下对铜绿假单胞菌表现出了显著的抑菌活性。具有抑菌活性裂解酶Lys YH6的获得为治疗和预防耐药性铜绿假单胞菌引起的感染开辟了新思路。 | 杨梅 杜崇涛 顾敬敏 韩文瑜 宫鹏娟 雷连成 孙长江 | 2015 | 吉林农业大学学报2015，37，3： | 4 |
| 15 | 45例晚期胸腺癌的临床分析显示文摘目的:探讨晚期胸腺癌的预后影响因素。方法:回顾性分析1992年1月~2003年8月45例晚期胸腺癌患者,其中男33例,女12例,中位年龄为49岁。按Masaoka标准进行分期:Ⅲ期29例,Ⅳ期16例(Ⅵa期13例,Ⅵb期3例)。并根据WHO(2004)分类标准对肿瘤进行分类,其中低度恶性25例,高度恶性20例。所有病人均接受手术或SCT引导下穿刺病理活检,其中完全手术切除5例,不完全切除21例,仅做活检19例。42例患者接受放射治疗,中位剂量为60Gy。37例为常规放射治疗,照射范围分为局部照射(14例)和扩大照射(23例)。局部照射指瘤床边缘外放1~2cm2(术前影像为准),扩大照射包括全纵隔全心包照射(加或不加锁骨上区预防照射)。5例患者接受立体定向放射治疗,31例患者接受化学药物治疗,化疗药物包括顺铂,VP-16,环磷酰胺,氟尿嘧啶,紫杉醇等。结果:随访率为95.6%,中位随访时间为59个月。总体三年生存率为57.8%,中位生存时间为45个月。通过单因素分析组织学分型,临床分期影响其预后。完全手术切除与非完全手术切除(包括活检)的三年生存率分别为80.9%、55.0%。放疗患者中常规放射治疗与立体定向放射治疗的三年生存率59.5%、80%,有统计学意义。晚期患者中化疗组与非化疗组的三年生存率分别为64.5%、42.9%,无统计学意义。但对于Ⅳ期患者,有统计学意义,化疗也影响其预后。结论:Ⅲ、Ⅳ期胸腺癌患者应尽可能做局部完全手术切除,并行常规术后放射治疗或立体定向放射治疗,必要时结合化学药物治疗。对于Ⅳ期患者,应结合化学药物治疗。 | 樊锐太 王敬敏 张洪志 郭艳娜 顾浩 | 2008 | 中国肿瘤临床2008，35，9： | 4 |
| 16 | 中晚期鼻咽癌放射治疗联合同步或诱导化疗的临床观察显示文摘目的:探讨同步放化疗与诱导化疗治疗中晚期鼻咽癌的近期疗效及毒副反应。方法:将48例患者依据临床资料相似、具有可比性原则分为同步组(A)26例和诱导组(B)22例。两组放疗方案相同,原发灶放疗方案为双侧面颈联合野常规分割放疗40Gy后光子刀加量,DT(70~76)Gy/(5~7)周;颈部淋巴结行常规分割放疗后局部加量。两组应用DF化疗方案(DDP20mg/m2,静脉滴入,d1~d5;5-FU500mg/m2,静脉滴入,d1~d5)。A组放疗的前、中、后期各行1个周期化疗;B组放疗前行3个周期化疗。结果:A、B两组原发灶有效率分别为92.3%(24/26)和82.0%(18/22),完全缓解率分别为73.0%(19/26)和68.1%(15/22),两组原发灶近期疗效差异有统计学意义,P=0.036;A、B两组颈部淋巴结有效率均为100%,完全缓解率分别为100%(20/20)和85.0%(17/20),两组颈部淋巴结疗效差异无统计学意义,P=0.317。毒副反应中,两组骨髓抑制及胃肠道反应差异有统计学意义,P值分别为0.024和0.019;口腔黏膜反应差异无统计学意义,P=0.339。结论:同步放化疗近期疗效优于诱导放化疗,但同步放化疗毒副反应大于诱导放化疗。 | 樊锐太 郭艳娜 王敬敏 张洪志 顾浩 | 2008 | 中华肿瘤防治杂志2008，15，24： | 4 |
| 17 | 一株牛源金黄色葡萄球菌噬菌体VB-SavM-JYL02生物学特性及基因组学研究显示文摘为了解金黄色葡萄球菌(S.aureus)噬菌体生物学及其基因组学特性,本研究利用牛源S.aureus从污水中分离得到一株烈性噬菌体,命名为VB-SavM-JYL02。形态学分析显示该噬菌体属于肌尾病毒科(Myoviridae),基因组全长141384 bp,编码218个开放阅读框,未发现其与细菌毒力、抗生素抗性以及溶原相关的基因。生物学特性研究结果显示,该噬菌体最佳感染复数为0.01,潜伏期20 min,爆发期约为20 min,裂解周期约40 min,表明该噬菌体具有很强的杀菌效率。此外,噬菌体VB-SavM-JYL02具有较宽的宿主谱(64%)。噬菌体全基因组同源性比对分析显示VB-SavM-JYL02与已报道的9个噬菌体存在极其相似的基因模块排布顺序。这些结果表明该噬菌体可能具有用于S.aureus感染治疗的潜力。本研究为噬菌体进一步用于奶牛乳腺炎的治疗研究奠定了基础。 | 冀亚路 雷连成 冯新 孙长江 韩文瑜 顾敬敏 | 2020 | 中国预防兽医学报2020，42，10： | 4 |
| 18 | 猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒GP5蛋白羧基端的噬菌体展示及其诱导仔猪产生中和抗体水平显示文摘为了发现并验证猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)保护性抗原GP5蛋白羧基端新的中和性表位,本研究运用生物信息学软件预测PRRSV GP5蛋白羧基端的抗原性,全基因合成GP5蛋白羧基端168~198位氨基酸的编码序列,构建了重组噬菌体M13-GP5aa168~198,以临床阳性血清进行Western blot分析重组噬菌体表面展示的GP5aa168~198多肽的免疫反应原性。以1.0×10^(13) PFU/mL重组噬菌体混合氢氧化铝佐剂制备免疫抗原,按照灭活疫苗免疫程序肌肉注射免疫PRRSV抗体阴性断乳仔猪2次,间隔2周,分别于末次免疫后的第2,4和6周采血,分离血清,以临床分离PRRSV强毒株进行中和试验。结果显示:重组噬菌体表面展示的GP5aa168~198多肽具有免疫反应原性,免疫仔猪后,能够诱导仔猪产生较高水平的中和性抗体,为构建PRRSV GP5新型多表位疫苗的开发奠定了基础。 | 王艳梅 顾敬敏 雷连成 冯新 孙长江 韩文瑜 | 2019 | 中国兽医学报2019，39，5： | 3 |
| 19 | 仓鼠致病性大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验显示文摘为探讨长春地区某仓鼠饲养场中仓鼠急性死亡的原因及应对该突发性疾病,对死亡仓鼠进行实验室检查并分离得到1株细菌,通过对该分离株进行形态学观察、培养特性观察、生化试验、小鼠致病性试验、PCR鉴定和23SrRNA基因同源性分析,判定该分离菌为1株高致病性大肠杆菌。该菌可致仓鼠突发急性致死性大肠杆菌病,死亡率达到100%,死亡小鼠出现胃肠道极度膨胀的典型症状。药敏试验结果表明,该大肠杆菌对多种抗生素敏感,但对四环素类抗生素及复方新诺明(SXT)有很强的耐药性,可用庆大霉素进行治疗。研究结果为探讨急性大肠杆菌病的发病机制及其防治提供了理论基础。 | 盛相鹏 杜崇涛 许会会 顾敬敏 雷连成 韩文瑜 | 2010 | 中国畜牧兽医2010，37，8： | 1 |
| 20 | 铜绿假单胞菌F_(190—342)-I_(21—83)基因的克隆及其融合蛋白的原核表达显示文摘为了研究铜绿假单胞菌外膜蛋白F和I的重要表位,根据已公布的F和I基因序列设计2对特异性引物,以分离的水貂源铜绿假单胞菌ZHDL9基因组为模板,扩增重要的表位基因F_(190—342)(F1)和I_(21—83)(I2),并对得到的2段基因序列进行生物信息学分析。结果表明,PCR扩增所得F1和I2两段基因序列高度保守,不存在核苷酸的插入和缺失;通过融合PCR技术将得到的F1基因和I2基因无缝连接,得到651 bp的融合基因F1I2。将融合基因F1I2克隆至原核表达载体p ET-28a,成功构建了融合表达质粒p ET-28a-F1I2;将pET-28a-F1I2转化大肠杆菌BL21 (DE3),成功构建重组菌株BL21(pET-28a-F1I2),并对重组菌株进行IPTG诱导表达。SDS-PAGE检测表明,成功表达了融合蛋白F1I2,且融合蛋白能够被His镍柱纯化; Western Blotting检测表明,表达的融合蛋白F1I2与铜绿假单胞菌ZHDL9菌株感染的水貂血清具有较好的反应原性。 | 张明亮 闫新武 孙长江 顾敬敏 崔子寅 韩文瑜 | 2018 | 河南农业科学2018，47，12： | 1 |
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