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| 1 | 噬菌体在畜牧养殖及肉制品加工中的应用显示文摘随着抗菌药物在畜牧养殖行业的大量使用,引起了细菌耐药性,抗菌药物残留等多种问题,亟需新的抗菌药物替代品。在自然界中广泛存在的噬菌体因具有特异性强、杀菌效果显著、安全性高且成本低廉等众多优点被用于新型抑菌剂的研发,随着技术的不断发展,相关的研究也更加深入,目前噬菌体在生物防治、细菌检测、食品安全保障等众多方面都发挥了巨大作用。论文介绍了噬菌体的分类、作用机制以及目前的市场现状,总结分析了噬菌体在畜禽幼龄期、成长发育和产品加工三个阶段中的应用现状,并对噬菌体未来的应用方向进行了预测,以期为噬菌体在畜牧养殖和肉制品加工中的应用提供参考。 | 孙新城 许素月 李侠颖 赵成鑫 胡旭阳 胡金强 高辉 杨德良 白艳红 张晓根 | 2022 | 动物医学进展2022，43，7： | 3 |
| 2 | 一株嗜水气单胞菌噬菌体的分离鉴定与生物学特性显示文摘本试验以嗜水气单胞菌CVCC-4002为宿主从鲤鱼内脏中分离得到一株噬菌体,命名为BLCC16-001,用PEG8000浓缩、超速离心获得高纯度的噬菌体进行电镜观察。测定噬菌体宿主谱、最佳感染复数(MOI)、一步生长曲线、热稳定性、pH稳定性及噬菌体体外杀菌效果。结果表明:电镜下,噬菌体BLCC16-001头部直径约60 nm,尾部长约140 nm,还能够裂解4株嗜水气单胞菌,其最佳感染复数为0.0001。噬菌体BLCC16-001潜伏期为20 min,随后进入平台期,爆发量约为1000 PFU/cell;能够耐受60℃以下的温度,超过70℃会急剧失活;对酸碱均具有一定的抵抗力,在pH为4.0~10.0时稳定;在感染复数为0.1时,3 h对宿主菌杀菌率超过90%,感染复数为1时,3 h对宿主菌杀菌率超99%。噬菌体BLCC16-001是一株宽宿主谱的能够耐受一定温度和酸碱环境的肌尾科新型烈性噬菌体,对其研究可为嗜水气单胞菌噬菌体的研究提供理论基础。 | 高绪娜 李金敏 桑瑞新 丁庆华 徐海燕 | 2021 | 中国饲料2021，，13： | 3 |
| 3 | 致奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌Csa1A、Hlɑ和EsxA-B重组蛋白的表达及免疫效果的评价显示文摘为评价金黄色葡萄球菌(S. aureus)Csa1A、Hlɑ和EsxA-B蛋白的免疫保护作用,本研究构建了重组质粒p GEX-4T-2-Csa1A、pET-22b-Hlα、pGEX-4T-2-EsxA-B并分别转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导并利用相应层析柱纯化后,采用SDS-PAGE检测重组蛋白的表达。结果显示,获得了纯度较高的重组蛋白Csa1A(rCsa1A)、Hlɑ(r Hlɑ)和EsxA-B(r EsxA-B),纯度分别为89%、95%、85%,大小分别为54 ku、33 ku和39 ku。以纯化的r Csa1A、rHlɑ和rEsxA-B 60μg/只分别免疫BALB/c小鼠,共免疫3次,每次间隔14 d,采用间接ELISA法检测各组小鼠免疫后14 d的抗体效价。结果显示,3种重组蛋白免疫后均能刺激小鼠产生较高效价的抗体,三免后抗体效价分别为1:14 700(rCsa1A)、1:16 890(rHlɑ)、1:15 760(rEsxA-B)。利用5型NM2株(2×10^(7)cfu/只)、8型LZ145株(2×10^(7)cfu/只)、336型XJ44株(2×10^(7)cfu/只)3种血清型S. aureus分别经尾静脉注射攻菌,观察并统计各组小鼠的发病和死亡率,评价各重组蛋白的免疫保护率。结果显示,分别经原核表达了rCsa1A、rHlɑ和rEsxAB。攻菌后对照组小鼠全部死亡;3组重组蛋白免疫组96 h内死亡的小鼠在攻菌48 h后出现精神沉郁,食欲不振等症状,而存活小鼠未出现临床症状。r Csa1A、rHlɑ和rEsxA-B免疫组小鼠提供的抵抗NM2、LZ145、XJ44菌株攻击的保护率分别为60%、60%、50%;80%、70%、70%;50%、60%、60%,其中rHlα的免疫保护效果最佳,其对3种攻毒菌株提供的平均保护率为73.3%,是较为理想的亚单位疫苗候选抗原。以上结果表明,S. aureus rHlα能够刺激免疫小鼠产生抗体,对小鼠提供不同程度的保护力。本研究为奶牛乳腺炎S. aureus亚单位疫苗的研制和应用提供参考依据。 | 王宇 段跃强 李建云 | 2021 | 中国预防兽医学报2021，43，8： | 1 |
| 4 | 一株宽宿主谱多重耐药铜绿假单胞菌噬菌体的生物学特性与基因组特征分析显示文摘为探究针对多重耐药铜绿假单胞菌(P.aeruginosa,PA)裂解性噬菌体生物学特性及其基因组结构特征,本研究以一株人源多重耐药PA 3099-2aT株为宿主菌,从养殖场污水中分离纯化到一株噬菌体,命名为p PA-3099-2aT.2。噬菌体经磷钨酸染色后采用透射电镜观察形态,经双层平板法测定其对温度和酸碱的稳定性、绘制一步生长曲线,通过双层平板法测定该噬菌体对各试验菌株的裂解情况确定其宿主谱,通过测定不同感染复数(MOI)细菌和噬菌体混合液的OD_(595nm)分析该噬菌体体外抑菌效果,通过不同浓度的PA 3099-2a T对大蜡螟幼虫致病性及攻毒保护率试验检测噬菌体体内抑菌效果。结果显示,噬菌体p PA-3099-2aT.2头部直径约为76.69 nm,有尾鞘,尾长123.89 nm,形态学分类为肌尾噬菌体;在-20℃~60℃和p H值为4~10的环境中稳定性良好,最适p H值为6,最适温度为37℃,潜伏期小于10 min,裂解期持续至100 min,裂解量约为178 pfu/cell;能裂解ST198型、ST274型、ST3683型、ST3875型、ST3216型等8株不同来源的PA;体外抑菌效果良好,其中MOI 0.01抑菌效果最好,能在0~15 h内有效抑制细菌生长;在体内也具有良好的抑菌效果,该噬菌体对大蜡螟幼虫的保护率与其MOI呈正相关,24 h内该噬菌体的MOI为100时对大蜡螟幼虫的保护率为100%,MOI 1时对大蜡螟幼虫的保护率为60%,MOI 0.01时对其的保护率为40%。采用高通量测序技术对p PA-3099-2aT.2进行全基因组测序,并于GenBank数据库下载32条噬菌体N-乙酰胞壁酰胺酶氨基酸序列,分析其遗传演化规律,采用DNAMAN v6对p PA3099-2aT.2、噬菌体JG004 lysozyme(Pae87)和v B_PaeM_C2-10_Ab1的N-乙酰胞壁酰胺酶的氨基酸序列进行比对分析。全基因组测序结果显示,p PA-3099-2a T.2基因组为ds DNA,长度为93031 bp,GC含量49.4%,含有穿孔素、N-乙酰胞壁酰胺酶、细胞壁水解酶等裂解相关蛋白;N-乙酰胞壁酰胺酶进化分析结果显示,该蛋白在噬菌体帕克普纳属和宿主菌铜绿假单胞菌种具有较高的保守性,与噬菌体JG004 lysozyme(Pae87)该蛋白氨基酸序列同源性为98.39%,但存在3个氨基酸突变。上述结果表明,噬菌体p A-3099-2a T.2具有生物学稳定性、潜伏期较短、裂解能力强、识别多种ST型宿主菌和抑菌效果良好等特性,能够显著提高感染多重耐药PA大蜡螟幼虫的存活率,为噬菌体治疗多重耐药PA感染提供参考依据。 | 曾君 王雪 王猛 左君豪 郭志良 赵佳男 季芳 邵建立 张立敏 徐莉莉 赵瑞利 王承民 | 2023 | 中国预防兽医学报2023，45，10： | 0 |
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