美洲拟鲽抗冻蛋白基因在E.coli中表达的研究

查看全文 作　　者：[1]杨志兴;Lender [2]Force 机构地区：[1]黑龙江省科学院应用微生物研究所,哈尔滨150010;[2]加拿大阿尔伯塔省研究院生物工程系 出　　处：《遗传》索引1992年第14卷第1期,共4页 基　　金：加拿大阿尔伯塔政府资助 摘　　要：本文阐述了美洲拟鲽抗冻蛋白基因在E.coli中表达的研究。用Hpa Ⅱ酶切pCT5质粒,分离出抗冻蛋白基因片段,再经Bal引酶、绿豆核酸酶处理,并连接上Bgl Ⅱ接头,插入到pORF-2表达质粒的BglⅡ位点上,筛选出正确插入方向的转化子,称pORF-AF。并对pORF-AF质粒作出部分限制性酶切图谱,测定出插入基因的DNA序列,同时用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析检测插入基因,在E.coli TK1046中的表达产物,发现在电泳图谱上有明显的融合蛋白带,分子量大于标准蛋白β-半乳糖苷酶是由大肠杆菌外膜蛋白F、抗冻蛋白和β-半乳糖苷酶组成。融合蛋白含量占总的菌体提取蛋白20%左右。 关 键 词：美洲拟鲽 抗冻蛋白基因 融合蛋白