HBV preS2S-rhGM-CSF融合基因表达质粒的构建和表达

查看全文 作　　者：[1]郭晓兰;[1]邓健康;[2]朱道银;[3]唐恩洁

机构地区：[1]川北医学院附属医院检验科,四川南充637000;[2]重庆医科大学微生物学与免疫学教研室,重庆400016;[3]川北医学院免疫学与分子生物学研究所,四川南充637007

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》索引2004年第20卷第5期,共4页

摘　　要：目的 :研究GM CSF和preS2对乙肝DNA疫苗的免疫增强作用。方法 :采用PCR方法 ,扩增HBVpreS2 +S基因约 84 6bp的片段和rhGM CSF(包括甘氨酸接头 )基因 4 5 0bp的片段。通过T A克隆技术和基因定向克隆 ,构建融合基因的真核表达质粒pcDNA3.1 S2S rhGM CSF ,并在HepG2细胞中表达。结果 :经酶切、PCR及DNA测序鉴定 ,融合基因表达质粒HB VpreS2S rhGM CSF成功地构建。将其转染HepG2细胞后 ,目的基因的转录通过RT PCR得到证实 ,而且表达的融合蛋白能与抗 HBs、抗 preS2和抗 GM CSF单克隆抗体 (mAb)均产生特异性反应。结论 :融合基因表达载体pcDNA3.1 S2S rhGM CSF的成功构建并表达。 关键词：HBV PRES2 GM-CSF 融合基因

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