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1吴茱萸碱对肝癌HepG2细胞侵袭和迁徙的影响显示文摘目的:研究吴茱萸碱对人肝癌细胞Hep G2细胞外调节蛋白激酶(extracellular-regulated protein kinases 1/2,ERK1/2)表达的影响.方法:Transwell小室检测吴茱萸碱对Hep G2细胞侵袭及迁徙的影响.集落形成实验检测吴茱萸碱对Hep G2细胞集落形成能力的影响.Western blot检测Hep G2细胞ERK1/2、phospho-ERK1/2(P-ERK1/2)蛋白.结果:吴茱萸碱5、25、50μmol/L作用后,H e p G 2细胞侵袭细胞数分别为3 2.3个±1.3个、22.3个±2.5个、10.6个±3.7个,对照组为97.6个±6.3个,差异有统计学意义(P<0.05);迁徙细胞数为57.7个±3.2个、26.8个±1.6个、15.4个±3.9个,对照组为106.3个±3.2个,差异有统计学意义(P<0.05).5、25、50μmol/L吴茱萸碱作用Hep G2细胞集落形成数分别为147.0个±12.1个、94.3个±4.0个、0个,对照组为231.3个±15.4个,差异有统计学意义(P<0.05).Western blot分析5、25、50μmol/L吴茱萸碱处理Hep G2细胞24 h及30μmol/L吴茱萸碱处理Hep G2细胞24、48 h后,ERK1/2蛋白的表达无明显变化,但其活化形式P-ERK1/2蛋白的表达量减少.结论:吴茱萸碱可显著抑制人肝癌Hep G2细胞侵袭和迁徙及克隆增殖能力,其机制可能与吴茱萸碱抑制ERK1/2蛋白活化有关.孙建超 娄方方 史云 王豫萍 2015世界华人消化杂志2015,23,10:2
2不同肝癌细胞上清对细粒棘球蚴原头节体外培养活性的影响显示文摘目的通过比较3种肝癌细胞上清对体外培养细粒棘球蚴原头节的活性影响,探讨较长时间维持细粒棘球蚴原头节体外活性的新模型。方法收集培养48 h后的Huh7、Hepa1-6和HepG-2等3种肝癌细胞无血清上清,分别与细粒棘球蚴原头节(每组约5000个)共培养,对照组采用无血清培养基培养。培养后第1、3、5、7天,取各组混悬液50μl,台盼蓝染色后光镜下观察、计数并计算存活率;培养后第7天,于扫描电镜下观察原头节超微结构,并用ELISA测定4组细粒棘球蚴原头节半胱氨酸蛋白酶-3酶的活性。采用SPSS 20.0统计学软件对计量数据进行方差分析。结果台盼蓝染色可见,随原头节培养时间延长,各组存活率均不断下降,无血清组、Huh7组、Hepa1-6组和HepG-2组原头节在第5天时存活率分别为(46.54±1.11)%、(46.19±3.60)%、(55.90±2.33)%和(68.73±1.06)%;至第7天,Hepa1-6组和HepG2组原头节存活率分别为(36.09±0.95)%和(45.69±0.40)%,与对照组(17.99±1.52)%差异均有统计学意义(P<0.01),Huh7组(19.04±1.7)%与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。培养后第7天,光镜下可见对照组和Huh7组原头节蓝染数目多,透光度差,有较多崩解坏死物质;Hepa1-6组也可见较多蓝染原头节,透光度尚可,镜下崩解坏死物质少;HepG-2组原头节蓝染数目少,透光度较好,镜下崩解坏死物质少。扫描电镜下可见对照组和Huh7组原头节形态大体破坏,微毛、吸盘等超微结构紊乱、崩解,Hepa1-6组、HepG2组虫体表面较为饱满且平滑,超微结构也较为清晰完整。半胱氨酸蛋白酶-3酶的活性检测结果显示,Hepa1-6组和HepG2组酶活力单位分别为20.51±0.61和17.51±0.59,与对照组(22.15±1.14)比较差异均有统计学差异(P<0.01);Huh7组为22.67±0.96,与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论肝癌细胞上清可改善无血清体外培养条件下细粒棘球蚴原头节活性,并以HepG2细胞上清作用更明显。陈贺捷 姜慧娇 梁倩 武杰 桂显伟 邹海亮 邢稚坤 王二强 陈雪玲 吴向未 2020中国寄生虫学与寄生虫病杂志2020,38,3:1
3肝刺激因子稳定转染人肝癌细胞系的方法建立与表达鉴定显示文摘目的建立稳定表达肝刺激因子(hepatic stimulator substance,HSS)的BEL-7402肝癌细胞系,并对其生物学特性进行鉴定。方法采用脂质体法将鉴定后的Flag-HSS-pc DNA3.0质粒转染到肝癌细胞系BEL-7402中,进行G418筛选,获得稳定转染的人肝癌细胞系。通过real-time PCR、Western blotting和免疫荧光染色等方法鉴定HSS mRNA和蛋白质表达及亚细胞定位。结果免疫荧光染色实验证实HSS基因能在稳定转染的肝癌细胞系中表达,并定位于线粒体中。同时发现在稳定转染细胞中HSS mRNA和蛋白质的表达也均高于野生型BEL-7402细胞。结论目前已成功构建稳定转染HSS的BEL-7402肝癌细胞系。为深入研究HSS的生理功能提供实验工具和研究基础。吴媛 张静 董凌月 安威 2015首都医科大学学报2015,36,6:0
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