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| 1 | 出血性大肠杆菌O157基因缺失疫苗株的构建及其免疫显示文摘出血性大肠杆菌O157感染是重要的新发食物源性传染病,主要致病特征之一是能引起人肠上皮细胞特征性的A/E损伤,A/E损伤主要是由LEE致病岛所编码的毒力因子所引起,ler是LEE致病岛毒力基因群的中心调节基因,对LEE致病岛所编码的毒力因子有正调控作用。O157:H7另一个毒力因子是由整合到染色体上的原噬菌体编码的Stx毒素。以O157:H786-24为始发菌株,利用自杀性质粒pCVD442和同源重组的原理构建了O157:H7的ler基因缺失突变菌株(缺失了ler基因中第73-351位的碱基,共279bp),并利用噬菌体消除技术筛选到消除了编码Stx的原噬菌体DNA的菌株,构建出了O157:H7ler/stx基因缺失突变弱毒菌株,并对该菌株的Vero细胞毒性、小鼠模型的安全性以及乳鼠的被动免疫保护作用进行了研究。结果表明,O157:H7ler/stx基因缺失突变菌株丧失了对Vero细胞的毒性作用,并丧失了对实验小鼠的致病性,具有良好的安全性。乳鼠被动免疫保护性实验表明,用该菌株免疫母鼠后,乳鼠通过吸吮母乳可以获得良好的被动免疫保护作用。因此本研究所构建的O157:H7ler/stx基因缺失突变弱毒菌株可作为预防EHEC O157:H7感染的疫苗候选株,为最终研究制出O157的基因工程菌苗奠定基础。 | 刘军 孙洋 冯书章 | 2007 | 生物工程学报2007，23，2： | 2 |
| 2 | 肠出血性大肠杆菌O157ler基因缺失突变株的构建及其特性显示文摘以肠出血性大肠杆菌O157∶H786~24为始发菌株,利用自杀性载体pCVD442,根据同源重组的原理敲除了染色体上的ler基因,构建了O157∶H7 ler基因缺失突变菌株,并对其生物学特性进行了初步研究。荧光定量PCR试验结果表明,始发菌株对HEp-2细胞的平均黏附数量是突变菌株的17倍。试验也证实了ler基因对LEE致病岛毒力基因的正调控作用,这为O157∶H7基因缺失突变弱毒疫苗株的建立奠定了基础。 | 孙洋 刘军 郭学军 张勇 祝令伟 周博 冯书章 | 2008 | 中国兽医学报2008，28，11： | 2 |
| 3 | 肠致病性大肠杆菌O45基因缺失疫苗菌株的构建及其免疫原性分析显示文摘为得到肠致病性大肠杆菌O45弱毒疫苗候选菌株,以肠致病性大肠杆菌O45为出发菌株,利用自杀性载体pCVD442和同源重组的原理构建了O45的ler基因缺失突变菌株PEPEC O45(△ler),并对该菌株的Vero细胞毒性、小鼠模型的安全性以及乳鼠和乳猪的被动免疫保护作用进行了研究。结果表明,O45(△ler)基因缺失突变菌株丧失了对Vero细胞的毒性作用,并丧失了对实验小鼠的致病性,具有良好的安全性。乳鼠和乳猪被动免疫保护性实验表明,用该菌株分别免疫母鼠和母猪后,乳鼠和乳猪均可通过吸吮母乳可以获得良好的被动免疫保护作用。因此本研究所构建的O45(△ler)基因缺失突变弱毒菌株可作为预防PEPEC O45感染的疫苗候选株,为最终研制出O45的基因工程菌苗奠定基础。 | 胡奕 宋杰 赵宝华 | 2009 | 生物工程学报2009，25，2： | 1 |
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