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| 1 | 重组华支睾吸虫诊断抗原研究进展显示文摘华支睾吸虫多种诊断抗原的基因已被克隆和重组表达,一些重组抗原已初步应用于华支睾吸虫病的免疫学诊断,显示出较高的诊断价值。 | 蒋守富 | 2007 | 中国病原生物学杂志2007,2,2: | 8 |
| 2 | 华支睾吸虫重组蛋白应用于ABC-ELISA检测特异性循环抗体的研究显示文摘目的评价重组蛋白在华支睾吸虫病诊断上的价值,探索以重组蛋白替代天然抗原用于ELISA等血清学方法诊断华支睾吸虫感染的可能性。方法分别使用重组华支睾吸虫半胱氨酸蛋白酶(CysB)与华支睾吸虫成虫可溶性抗原(CAA),以ABC-ELISA检测华支睾吸虫病、其它寄生虫感染及健康人血清特异性IgG,比较两种抗原用于检测的敏感性与特异性。结果共检测了112份华支睾吸虫感染血清,使用重组抗原CysB与成虫粗抗原CAA的阳性检出率分别为92.9%(104/112)及94.6%(106/112);分别检测健康人血清56例、日本血吸虫病血清20例及肺吸虫病血清10例,对于两种抗原,华支睾吸虫特异性IgG检测阴性率均相同,上述三类血清的阴性率分别为96.5%(54/56)、95%(19/20)及90%(9/10)。结论华支睾吸虫重组蛋白CysB用于血清特异性抗体检测具有较高的敏感性及特异性,与成虫可溶性抗原(CAA)的诊断应用价值相近,有望成为应用于华支睾吸虫病诊断的替代抗原之一。 | 崔惠儿 裴福全 长野功 吴军 方悦怡 潘波 吴志良 高桥优三 | 2004 | 热带医学杂志2004,4,2: | 8 |
| 3 | 华支睾吸虫成虫虫体与排泄-分泌物抗原在ELISA检测中的评价显示文摘目的:探讨华支睾吸虫成虫可溶性抗原和排泄-分泌物抗原ELISA检测的临床诊断价值。方法:分别以虫体可溶性抗原和排泄-分泌物抗原作为诊断抗原,采用间接ELISA检测方法检测感染者(来自流行区,粪便虫卵检测阳性)血清107份和健康人(来自非流行区,粪便虫卵检测阴性)血清50份,计算其敏感性、特异性和符合率,并进行两种诊断抗原间的统计学比较与评价。结果:可溶性抗原的敏感性为58.88%,特异性为98%,符合率为71.34%;排泄-分泌物抗原的敏感性为87.85%,特异性为100%,符合率为91.72%。经统计学分析,两者敏感性和符合率差异具有统计学意义(P<0.05)。特异性差异无统计学意义(P>0.05)。结论:作为诊断抗原,排泄-分泌物抗原优于可溶性抗原。排泄-分泌物抗原具有较高的敏感性与特异性,对于华支睾吸虫感染具有较高的诊断价值。 | 叶春艳 王峰 吴秀萍 李玉香 杨秀云 于申业 邓洪宽 刘相叶 刘明远 | 2008 | 实用诊断与治疗杂志2008,22,4: | 6 |
| 4 | 华支睾吸虫重组半胱氨酸蛋白酶用于血清学调查的效果评价显示文摘目的以华支睾吸虫重组半胱氨酸蛋白酶(CsCp)为ELISA包被抗原检测流行人群血清特异性抗体水平,与成虫粗抗原比较,评价其用于华支睾吸虫病血清学调查的价值。方法以佛山市南海区的1个行政村为调查点,用改良加藤厚涂片法检查粪便华支睾吸虫虫卵。同时采集血清,分别以rCsCP与成虫粗抗原(CsCAA)的ELISA方法检测血清特异性抗体水平,对粪检及两种抗原的ELISA结果进行统计学分析。结果接受血清检测的97人中,华支睾吸虫虫卵阳性率60.8%,CsCAA-ELISA阳性率75.3%,rCsCP-ELISA阳性率76.3%,特异性抗体阳性率高于虫卵阳性率(P<0.05),不同抗原ELISA阳性率差异无统计学意义(P>0.05);CsCAA-ELISA、rCsCP-ELISA结果与粪检结果的符合率分别为56.7%和55.7%,两种抗原ELISA结果的符合率为82.5%。59例粪检阳性者CsCAA-ELISA和rCsCP-ELISA阳性率均为76.3%,38例粪检阴性者CsCAA-ELISA和rCsCP-ELISA阳性率分别为73.7%和76.3%。结论以rCsCP为包被抗原,用ELISA检测华支睾吸虫病流行区人群血清特异性IgG抗体与使用CsCAA的检测结果有较高的符合率,但同样不能区分现症与既往感染。 | 裴福全 长野功 方悦怡 崔惠儿 吴军 阮彩文 | 2008 | 中国病原生物学杂志2008,3,8: | 6 |
| 5 | 华支睾吸虫半胱氨酸蛋白酶基因克隆表达和血清学诊断效果显示文摘目的克隆、表达华支睾吸虫半胱氨酸蛋白酶(CSCP),并评价其免疫学诊断效果。方法根据已知的CSCP(Gen Bank序列号:AF093242)基因序列设计引物,从华支睾吸虫成虫总cDNA中扩增该目的片段,克隆入真核表达载体pPIC9K,转化至巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115中,甲醇诱导表达、纯化;采用Westernblot技术鉴定该重组蛋白;用纯化的重组CSCP(rCSCP)免疫小鼠,ELISA法检测抗体效价;应用DotELISA法和Western blot法评估该重组蛋白的诊断效果。结果从华支睾吸虫成虫cDNA中扩增获得长度为927bp的CSCP基因,并成功进行了真核表达、纯化,纯化的rCSCP免疫小鼠后的血清能被华支睾吸虫成虫可溶性抗原识别,其血清抗体效价达1∶64000;采用该重组蛋白建立的DotELISA法检测华支睾吸虫病人的敏感性为91.7%(55/60),检测正常人的特异性为97.6%(82/84);Western blot分析显示,rCSCP与日本血吸虫病人血清无交叉反应,与卫氏并殖吸虫病人交叉反应率为20.0%(2/10)。结论 rCSCP具有较好的诊断效果,是华支睾吸虫重组蛋白中一个有潜在诊断价值的抗原。 | 江文才 金小林 沈明学 曹汉钧 徐祥珍 蒋岗 陶志勇 高琪 | 2011 | 中国血吸虫病防治杂志2011,23,6: | 5 |
| 6 | 重组抗原应用于SPG-ELISA检测华支睾吸虫循环抗体的效果评价显示文摘目的评价重组抗原用于SPG-ELISA诊断华支睾吸虫感染的价值。方法分别使用重组华支睾吸虫半胱氨酸蛋白酶(Cs-CysB)与华支睾吸虫成虫可溶性抗原(CAA),以SPG-ELISA检测华支睾吸虫病患者血清特异性IgG,比较两种抗原包被SPG-ELISA方法的敏感性与特异性。结果检测50份华支睾吸虫感染者血清,重组Cs-CysB与CAA包被的SPG-ELISA阳性率均为94.00%,健康人血清50例均为阴性;检测日本血吸虫病血清20份、并殖吸虫病血清20份、囊虫病血清10份,交叉反应率分别为5.00%、10.00%、20.00%和5.00%、0、20.00%。结论以重组Cs-CysB为包被抗原用SPG-ELISA检测血清华支睾吸虫抗体具有较高的敏感性及特异性,检测效果与CAA包被的SPG-ELISA相当。 | 裴福全 崔惠儿 长野功 吴军 方悦怡 阮彩文 | 2008 | 中国病原生物学杂志2008,3,4: | 4 |
| 7 | 华支睾吸虫病诊断抗原与抗体研究进展显示文摘华支睾吸虫病是由于华支睾吸虫感染后寄生在人体或动物的肝胆管内引起的一种重要的食源性人兽共患寄生虫病。主要分布在东亚和东南亚国家。在我国发病率局部地区呈增高趋势。实验室诊断方法主要有病原学诊断方法和血清免疫学诊断方法。病原学诊断主要是粪便查虫卵法,由于虫卵较小,容易漏诊。 | 叶春艳 李妍 吴秀萍 刘明远 王峰 | 2009 | 现代预防医学2009,36,2: | 2 |
| 8 | 华支睾吸虫半胱氨酸蛋白酶两种表达方式的比较显示文摘目的比较原核和真核2种表达系统重组表达华支睾吸虫半胱氨酸蛋白酶方法的优劣和目的产物的血清免疫学检测效果。方法根据已知的华支睾吸虫半胱氨酸蛋白酶序列分别设计引物扩增目的基因,与相应的表达载体相连分别构建原核表达质粒pET28a CP和真核表达质粒pPIC9K CP,双酶切及测序鉴定后,将正确的重组质粒分别转入大肠埃希菌(E.coli)BL21(DE3)和毕赤酵母GS115中诱导表达、纯化;将获得的纯化蛋白采用ELISA方法检测华支睾吸虫病人血清和正常人血清,比较诊断效果。结果原核表达系统表达的华支睾吸虫半胱氨酸蛋白酶以包涵体形式存在,表达量为6.84mg/L;真核表达系统表达量达到65.00 mg/L,且为可溶性蛋白;两者检测华支睾吸虫病的敏感性分别为95.00%(57/60)和93.30%(56/60),特异性分别为91.67%(77/84)和94.10%(79/84),差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论真核表达华支睾吸虫半胱氨酸蛋白酶较原核表达系统具有更高的应用价值。 | 江文才 金小林 高琪 沈明学 徐祥珍 曹汉钧 | 2012 | 中国血吸虫病防治杂志2012,24,4: | 1 |
| 9 | 华支睾吸虫磷酸甘油酸激酶基因的分子表达、蛋白纯化与定性显示文摘目的选取一个华支睾吸虫磷酸甘油酸激酶基因进行克隆表达、纯化,并鉴定该重组蛋白的分子特性及潜在的诊断应用价值。方法根据Genbank中华支睾吸虫磷酸甘油酸激酶基因顺序(L47982)设计引物,从华支睾吸虫成虫cDNA扩增特异性片段,与pTrcHis表达载体连接,重组质粒在大肠埃希菌DH5α中表达,使用亲合层析柱纯化重组蛋白。分别使用SDS-PAGE、Western blot及ELISA鉴定重组蛋白的一般分子特性和抗原活性,以免疫组化染色法探讨该抗原在成虫组织内的分布。结果重组质粒在大肠埃希菌中成功表达,亲合层析获得高纯度的磷酸甘油酸激酶融合蛋白(rCsPGK),分子量约4.7×104。Western blot显示该重组抗原与华支睾吸虫感染阳性血清有较好的结合反应。ELISA结果显示,rCsPGK用于检测特异性抗体在数值上可区分阴阳性血清,受检阳性与混合阴性血清A值之比(P/N)为1.22~1.86,明显低于使用全虫粗抗原的P/N值(4.24~8.21)。免疫组化显示,针对rCsPGK的抗体与成虫体壁的上皮组织、卵黄腺及卵巢内虫卵有明显的染色反应。结论该研究用pTrcHis原核表达系统成功克隆和表达了华支睾吸虫磷酸甘油酸激酶融合蛋白。使用亲合层析能获得高纯度、具有潜在诊断应用价值的rCsPGK抗原,但用于检测特异性抗体的敏感性低于全虫粗抗原。免疫组化表明,华支睾吸虫磷酸甘油酸激酶可能主要分布在成虫体壁的上皮组织、卵黄腺及卵巢内虫卵等组织内。 | 裴福全 长野功 吴志良 崔惠儿 张贤昌 高桥优三 | 2008 | 华南预防医学2008,34,6: | 0 |