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1人表皮生长因子慢病毒载体的构建及表达显示文摘目的:构建人表皮生长因子(hEGF)慢病毒(LV)载体。方法:酶切并收集pcDNA3.1-hEGF载体中的hEGF目的基因片段,克隆进入含有绿色荧光蛋白(GFP)基因的慢病毒载体内,将所得重组体LV-GFP-hEGF与辅助载体pΔ8.2和pVSVG共同转染人胚肾293T细胞,进行病毒包装。收集上清液,按按10-1~10-7倍比稀释后培养,检测病毒滴度;裂解细胞,进行Western Blot分析。结果:PCR扩增、HindⅢ酶切鉴定及测序结果均证实LV-GFP-hEGF构建成功。将LV-GFP-hEGF转染293T细胞,紫外光下检测可见绿色荧光;LV滴度达5×108TU/mL,转染效率>75%,Western Blot证实转染细胞可表达hEGF。结论:成功构建了含有GFP报告基因的hEGF慢病毒载体,包装后的慢病毒可在293T细胞内高效表达。张丽梅 冯龙 张艳敏 马晶 赵国强 安玉会 鲍玉洲 2010郑州大学学报(医学版)2010,45,4:3
2耳蜗疾病基因治疗载体显示文摘在人类基因组计划的推动下,基因治疗已成为最有希望的治疗策略,在耳聋康复方面,基因工程技术也是一种很有前景的实验和临床治疗手段。基因治疗研究的快速发展对基因导入系统提出了越来越高的要求。本文对近年来常用的耳蜗基因治疗载体进行综述。杨阳 孔维佳 2008国际耳鼻咽喉头颈外科杂志2008,32,4:0
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