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| 1 | RNA干扰抑制MyD88表达对小鼠骨髓树突状细胞生物学活性的影响显示文摘目的:采用RNA干扰技术抑制小鼠骨髓树突状细胞(DC)髓样分化因子88(MyD88)的表达,并检测其对细胞生物学活性的影响,为DC的临床应用奠定基础。方法:针对MyD88基因,采用化学合成法合成3对MyD88 siRNA(序列1、序列2及序列3),并转染DC2.4细胞。采用半定量RT-PCR及Western blot分别从mRNA和蛋白质水平检测DCMyD88的表达情况,筛选其中一对高效RNA(序列3)转染DC2.4细胞(RNA干扰组),以未转染RNA的DC2.4细胞作为对照组,分别给予1 mg/L的脂多糖(LPS)刺激。流式细胞术(FCM)检测DC细胞表面CD80、CD86及MHC-Ⅱ分子的变化,ELISA法检测DC分泌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)和白介素-12(IL-12)的浓度,免疫细胞化学检测DC核因子-κB(NF-κB)的表达,混合淋巴细胞培养检测T细胞增殖能力,观察RNA干扰对LPS促DC成熟的影响。结果:与空白对照组相比,序列2组及序列3组DC的mRNA和蛋白质表达分别降低90%和85%、92%和88%,差异有统计学意义;脂质体对照组、无义siRNA对照组及序列1组DC的mRNA和蛋白质表达无显著差异。经LPS刺激后,与对照组相比,RNA干扰组CD80、CD86及MHC-Ⅱ分子的表达,TNF-α、IFN-γ及IL-12的浓度及T细胞增殖能力均显著下降,且未见明显NF-κB核转位。结论:RNA干扰技术能显著下调小鼠DC MyD88的表达,并显著抑制LPS促DC成熟的效应,为以DC MyD88为靶向、相关疾病的基因治疗提供了新思路和手段。 | 陈家军 孙宗全 董念国 苏刚 刘超 刘金平 邓勇志 | 2007 | 细胞与分子免疫学杂志2007，23，3： | 14 |
| 2 | HCVIRES介导萤火虫荧光素酶翻译的双顺反子载体的构建与在小鼠体内的表达显示文摘将HCVIRES插入双报告基因海肾荧光素酶 (Rluc)基因和萤火虫荧光素酶 (Fluc)基因之间 ,建立了“依赖帽子的扫描机制”翻译表达Rluc ,HCVIRES调控Fluc翻译的双顺反子表达载体pCI Rluc HCVIRES Fluc ,通过酶切反应及转染HepG2细胞鉴定双荧光素酶瞬间表达活性等试验 ,证实获得了表达双荧光素酶的双顺反子载体 .并应用水压转染法将双顺反子表达质粒导入小鼠体内 ,在小鼠肝脏检测到高水平表达的Rluc和Fluc .该研究成功构建一种HCVIRES介导萤火虫荧光素酶基因表达的双顺反子载体 ,并在HepG2细胞及小鼠体内进行了瞬时表达 。 | 詹林盛 饶林 彭剑淳 王全立 | 2004 | 中国生物化学与分子生物学报2004，20，3： | 6 |
| 3 | 丙型肝炎治疗的研究进展显示文摘丙型肝炎病毒(HCV)是慢性肝病的主要病原之一,呈世界流行,感染率为1%~3%,目前全球约有1.7亿HCV感染患者。约60%的急性丙型肝炎(HC)患者转化为慢性,而慢性患者中分别有8%~46%和11%~19%发展成肝硬化和肝细胞癌[1],因此,HCV的治疗至关重要。 | 张立营 梁冰 王军 冯玉奎 禹华伟 苑同业 王华强 | 2011 | 肝脏2011，16，2： | 5 |
| 4 | 女贞子提取物主要活性组分及其抗丙型肝炎病毒复制活性分析显示文摘中药女贞子(Ligustrum lucidum,LL)具有肝保护和抗炎症作用.本研究分析女贞子提取物对丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)复制的影响及其活性成分.薄层层析法分离女贞子水提取物,获得5个分离组分.Real-time RT-PCR和Western印迹发现,分离组分1和2抑制HCV JFH1细胞感染模型中的JFH1病毒复制.分离组分的高效液相色谱(high-performance liquid chromatography,HPLC)分析表明,熊果酸和齐墩果酸可能是组分1和2的抗病毒活性成分.熊果酸和齐墩果酸抗病毒实验发现,熊果酸和齐墩果酸抑制HCV JFH1的复制,它们的选择指数(SI)分别为6.7和30.8.这些研究结果表明,女贞子及其化学成分熊果酸和齐墩果酸具有潜在的丙型肝炎治疗价值. | 孙瑞娜 郭韫丽 汪俊 吴晓玉 孔令保 | 2013 | 中国生物化学与分子生物学报2013，29，10： | 5 |
| 5 | Bcl-XL siRNA抑制人结肠癌细胞生长的研究显示文摘目的:探讨应用siRNA技术下调Bcl-XL对人结肠癌细胞生长的抑制作用。方法:采用人结肠癌细胞株DLD1, 利用人工合成的Bcl-XL靶向小分子干扰RNA(siRNA)转染DLD1细胞,通过Western blot法检测转染细胞Bcl-XL蛋白的表达,流式细胞仪检测处理后细胞的凋亡情况,锥虫蓝染色法计数存活细胞。结果:与空白组和对照组相比,转染Bcl-XL siR- NA组的Bcl-XL蛋白表达显著性下降,凋亡细胞的数量显著增加(P<0.05),细胞存活率显著降低(P<0.05)。结论:Bcl-XL siRNA能显著降低人结肠癌细胞的Bcl-XL蛋白表达,有效抑制细胞的生长,为结肠癌的治疗提供了一种新的治疗策略。 | 胡静姿 李玉莉 刘惠敏 孙志勇 杨志慧 | 2006 | 中国肿瘤生物治疗杂志2006，13，1： | 3 |
| 6 | RNA干扰技术抑制Polo-like激酶1表达对A549细胞的影响显示文摘Polo-like激酶1(Plk1)是参与细胞周期调控的重要分子,已在多种肿瘤中检测到Plk1的高表达,并发现与肿瘤细胞的增殖和预后密切关联.为明确Plk1在肺癌细胞系A549细胞增殖和周期运行中的作用,采用RNA干扰技术,构建能产生siRNA的质粒载体psiRNA-hH1-Plk1并导入A549细胞中.采用RT-PCR检测Plk1mRNA表达的变化,Western印迹检测Plk1、细胞周期蛋白B1、p53蛋白的表达变化,流式细胞术分析细胞周期变化和凋亡;免疫荧光染色检测α微管蛋白的表达.以此观察RNA干扰能否有效抑制Plk1的表达水平,以及抑制后对A549细胞生长的影响.结果表明,psiRNA-hH1-Plk1质粒能特异性地抑制Plk1基因的表达并使其活性下降,细胞周期蛋白B1及p53蛋白的表达水平升高,微管聚集障碍或形成单极的纺锤体,A549细胞增殖减慢,出现G2/M期阻滞并存在细胞凋亡.针对Plk1基因的RNA干扰有望用于肿瘤的基因治疗. | 周琼 白明 金阳 张晓菊 苏远 | 2005 | 中国生物化学与分子生物学报2005，21，5： | 2 |
| 7 | 基因体外转录的应用研究显示文摘 | 侯伟 沃健儿 刘克洲 | 2005 | 医学综述2005，11，2： | 1 |
| 8 | RNA干扰技术抗乙型、丙型肝炎病毒的新进展显示文摘乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)感染引起的慢性肝病严重影响人类健康,而防治此类严重肝病的关键在于抗病毒治疗,RNAi作为一种有效抵抗外来病毒入侵的机制,其在抗肝炎病毒上的应用有着巨大的前景,本文就近年来在RNAi抗HBV、HCV方面的研究进展进行综述。 | 彭国平 陈智 | 2005 | 国外医学(流行病学.传染病学分册)2005，32，5： | 1 |
| 9 | 内源性siRNA对RAB5A和RABEX5表达的抑制作用显示文摘目的研究内源性的siRNA对RAB5A和RABEX5表达的抑制作用。方法利用siRNA表达载体pS ilencerTM2.1U6-neo对RAB5A和RABEX5基因分别构建3个特异的siRNA表达载体,并将表达载体分别转染人卵巢癌高转移细胞HO-8910PM。应用逆转录-聚合酶链反应和蛋白印迹检测转染前后HO-8910PM细胞中RAB5A和RABEX5的表达情况,并用荧光免疫细胞化学技术对干扰效率最好的载体进行验证。结果在构建的6个siRNA表达载体中,pS ilencer/siRAB5A-1和pS ilencer/siRAB5A-2对RAB5A表达的抑制率分别为90%和70%,pS ilencer/siRAB5A-3对RAB5A表达没有抑制作用。pS ilencer/siRABEX5-1、pS ilencer/siRABEX5-2和pS ilencer/siRABEX5-3对RABEX5表达的抑制率分别为30%、50%和90%。结论成功构建了对RAB5A和RABEX5表达具有抑制作用的siRNA表达载体,为进一步研究RAB5A和RABEX5的生物学功能提供了实验工具。 | 张小爱 侍庆 吴华成 曹文俊 孙顺昌 倪培华 樊绮诗 | 2006 | 上海交通大学学报(医学版)2006，26，2： | 0 |
| 10 | 丙型肝炎治疗的研究进展显示文摘丙型肝炎严重威胁着人类的健康,目前寻找一种有效的疗法至关重要。撰文对丙型肝炎的药物治疗、RNA干扰、病毒抗原编码基因的转基因表达、反义核酸技术及表位疫苗等项治疗方案予以综述,提出了包含有多个保守丙型肝炎病毒(HCV)抗原表位的多价融合抗原基因的DNA疫苗将成为今后丙型肝炎治疗的研究方向。该疫苗可以在不同个体中激起广泛而强烈的对不同HCV基因型有交叉反应性的T细胞免疫应答,并有望用于丙型肝炎人群的治疗。 | 陈佳玉 | 2008 | 医学综述2008，14，11： | 0 |
| 11 | RNA干扰技术抗病毒感染的研究进展显示文摘RNA干扰(RNA interference,RNAi)是序列特异的双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)使细胞内同源性mRNA降解,产生特异的基因沉默的过程。其发生在基因转录后,在mRNA水平上进行调控,所以又称转录后基因沉默(posttranscriptional gene silencing,PTGS)。1998年,Fire等在秀丽线虫实验中发现了由dsRNA引起的序列特异性基因沉寂现象,并将此现象称为RNAi。 | 张永欣 刘馨 | 2008 | 中华传染病杂志2008，26，6： | 0 |
| 12 | RNAi抗肝炎病毒感染作用的研究进展显示文摘在机体抗病毒感染中,RNAi是一种由双链RNA介导的基因水平上的有效保护性机制,是由与沉默基因序列同源的dsRNA引发的转录后关闭特异基因的调节机制。RNAi作为调节特定基因表达的基因组免疫方法,成为生物药学的研究热点,同时也是机体抗病毒感染在基因水平的有效防御机制。本文概括了RNAi抗肝炎病毒作用的研究进展,分析了其在临床治疗病毒性肝炎的优势及当前存在的问题,为提高其抗肝炎病毒感染作用的进一步研究指明了方向。 | 张双民 吴忠道 | 2005 | 第二军医大学学报2005，26，10： | 0 |
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