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1编码中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)一种组成型热休克蛋白70(HSC70)的cDNA克隆、测序及其表达分析显示文摘根据中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)EST序列信息设计引物,用RT-PCR方法,从经热休克处理的中国明对虾的肝胰腺RNA中克隆到长2090bp的hsc70 cDNA序列,包括长1956bp的完整编码序列(complete CDS)及部分5’端和3’端非翻译区(5’UTR和3’UTR).PCR及测序结果分析显示,hsc70cDNA的1-547bp碱基所对应的基因组序列可能含有内含子,548~2090bp碱基所对应的基因组序列不含内含子.根据编码序列推导出相应的652个氨基酸,与其他真核生物HSP70家族成员进行同源性比较.发现中国明对虾HSC70与虹鳟(Oncorhynchus mykiss)HSC71,人(Homo sapiens)HSC70,家鼠(Mus musculus)HSP70,烟草天蛾(Manduca sexta)HSC70的相似性分别是85.9%,85.9%,85.8%,85.4%,表现出较高的保守性.表达分析显示,hsc70 mRNA在中国明对虾正常肝胰腺、肌肉、眼柄、血细胞、心脏、卵巢、肠和鳃等组织存在,并呈组成性表达;受到整体热休克后的对虾肌肉组织hsc70 mRNA水平(以β-actin mRNA水平为内标)与对照组没有显著的差异.焦传珍 王在照 李富花 张成松 相建海 2004科学通报2004,49,21:12
2SDS-PAGE与液质联用技术分离和鉴定中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)血浆蛋白显示文摘提取中国明对虾的血浆蛋白用SDS-PAGE进行分离。将电泳条带从上到下平均切成4份,分别胶内酶解并利用液相色谱-串联质谱系统进行质谱分析。利用SEQUEST软件对NCBInr蛋白数据库进行检索,鉴定了66个中国明对虾血浆蛋白质。运用生物信息学手段,对鉴定的蛋白进行功能分类,包括转录、细胞结构和骨架、信号转导、蛋白质合成与处理、蛋白质折叠、分拣和降解、免疫功能、生长和发育、能量代谢、细胞周期、碳水化合物代谢、钙离子平衡、抗氧化剂和氨基酸和脂类代谢等。本研究丰富了中国对虾血浆蛋白质表达谱,可为进一步研究对虾免疫机制提供有力的支持。黄冰心 蒋昊 张继泉 相建海 2009海洋与湖沼2009,40,2:5
3Expression profiles of penaeidin from Fenneropenaeus chinensis in response to WSSV and vibrio infection by real-time PCR显示文摘Penaeidin from Chinese shrimp (Fenneropenaeus chinensis) has proved to be one of the most important antimicrobial peptides in the bodies of animals. The relative quantitative real-time PCR method is developed to study through time, the mRNA expression profile of penaeidin in the muscle and haemocyte tissue of Chinese shrimp infected with vibrio (Vibrio anguillarum) and WSSV (white spot syndrome virus). Research results showed that the same pathogens infection experiments produced similar gene expression profile in different tissues while different expression profiles appeared in the same tissues infected by different exterior pathogens. In vibrio infection experiments, a 'U' like expression profile resulted. Expression levels of penaeidin increased and surpassed the non-stimulated level, indicating that penaeidin from Chinese shrimp has noticeable antimicrobial activities. In WSSV infection experiments, the expression profile appeared as an inverse 'U' with the expression of penaeidin gradually decreasing to below baseline level after 24 h. The expression of antimicrobial peptides gene in mRNA level in response to virus infection in shrimp showed that international mechanisms of virus to haemocytes and microbial to haemocytes are completely different. Decline of penaeidins expression levels may be due to haemocytes being destroyed by WSSV or that the virus can inhibit the expression of penaeidins by yet undiscovered modes. The expression profiles of penaeidin in response to exterior pathogen and the difference of expression profiles between vibrio and WSSV infection provided some clues to further understanding the complex innate immune mechanism in shrimp.DONGBo LIUFengsong XIANGJianhai LIFuhua GAOHongwei 2005Acta Oceanologica Sinica2005,24,2:3
4基于中国明对虾不同组织EST数据的基因表达差异分析显示文摘对前期获得的中国明对虾头胸部、血液、眼柄、卵巢4种组织的EST测序数据进行了生物信息学挖掘和分析。4种组织的原始EST序列分别为10 446条、2 690条、1 067条和1 282条,通过聚类拼接得到unigene 3 454条、1 053条、406条和544条,对其进行了NR、GO、KEGG等数据库的功能注释,并在此基础上进行了组织差异分析。通过同源比对的方法找出了各组织特异的转录本,并根据注释信息将其进行了GO功能分类。结果显示,血液组在细胞杀伤、迁移和节律等功能分类上特异性富集;眼柄组在色素生成、信号传递和生物学调控等功能分类上特异性富集;卵巢组在营养贮存运输、繁殖和定位等功能分类上特异性富集。拼接时聚类到一起的EST数目在一定程度上可以代表基因的表达量,据此对各组织的高表达基因进行了分析。结果显示,peritrophin、elongation factor 1-alpha、thrombospondin和arginine kinase 4个基因在组织中分布较为广泛且表达量高,提示其可能参与对虾多种重要的生物学过程。而在血液组中注释到的高表达基因还包括penaeidin、cytochrome c oxidase和14-3-3 like protein基因,在眼柄组中注释到的高表达基因还包括arrestin和rhodopsin基因。此外,为了解各组织共有基因的差异表达情况,对peritrophin和peroxiredoxin进行了分析,发现了peritrophin基因的多形式和高表达现象。隗健凯 柳承璋 张晓军 王兵 董波 李富花 相建海 2013水产学报2013,37,5:0
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