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| 1 | GST-TAT-P53c融合蛋白的表达及对p53基因突变型肿瘤细胞的促凋亡作用显示文摘目的研究P53蛋白C端(P53c)对p53基因突变型肿瘤细胞SW480的促凋亡作用。方法用人类免疫缺陷病毒TAT蛋白的蛋白转导域(TAT)将P53c运载进入肿瘤细胞,用氧依赖性降解区域(ODD)控制P53c在组织中的稳定性。通过PCR方法制备TAT-ODD-p53c(TOPc),TAT-p53c(TPc)及p53c基因,与pGEX4T载体连接后在大肠杆菌中表达谷胱甘肽-S-转移酶(GST)-TAT-ODD-P53c(GST-TOPc),GST-TAT-P53c(GST-TPc)及GST-P53c等融合蛋白。免疫组化方法检测TAT蛋白运载融合蛋白穿过SW480细胞膜的作用,MTT法检测融合蛋白对SW480细胞活力的影响,流式细胞仪检测致SW480细胞凋亡作用。结果成功构建pGEX系列表达载体,并在大肠杆菌中可溶性表达。Western印迹结果表明,重组蛋白可以和GST单克隆抗体特异性结合。免疫组化显示GST-TPc,GST-TOPcm及GST-TOPc均能进入SW480细胞,GST-TPc能明显降低SW480细胞活性,导致SW480细胞凋亡。含ODD的融合蛋白在常氧环境中对肿瘤细胞有轻度促凋亡作用。结论TAT可以介导其融合蛋白跨越细胞膜。GST-TPc可引起p53突变型肿瘤细胞凋亡。 | 吴少平 王玉霞 武军华 贾培媛 王晨宇 李前 孙曼霁 | 2007 | 中国药理学与毒理学杂志2007，21，1： | 1 |
| 2 | 重复加热对肝癌HepG2细胞谷胱苷肽-S-转移酶π表达的影响显示文摘目的探讨多次加热后对残存的肝癌HepG2细胞的谷胱苷肽-S-转移酶竹(GSTπ)基因/蛋白表达的影响。方法HepG2细胞43℃加热,每次80min,2次/d,10个循环后,MTT法分析其对阿霉素的敏感性,免疫组化法检测细胞GSTπ蛋白的表达。RT-PCR法检测细胞GSTπmRNA的表达。结果热处理后的HepG2细胞对阿霉素的化疗耐受性升高,GSTπ基因/蛋白的表达增强。结论热处理后HepG2细胞对化疗药物的耐受性可能与其GSTπ基因/蛋白的表达增强有关。 | 秦春宏 李永国 吴江 何苦寒 申昕 费书柯 | 2008 | 中国医师杂志2008，10，3： | 0 |
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