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| 1 | 应用DPO引物技术同时检测5种蚊媒病毒的多重RT-PCR方法显示文摘目的应用双启动寡核苷酸引物(Dual Priming Oligonucleotide,DPO)技术建立同时检测日本脑炎病毒(JapaneseEncephalitisVirus,JEV)、黄热病毒(YellowFeverVirus,YFV)、西尼罗病毒(WestNileVirus,WNV)、圣路易斯脑炎病毒(St.Louis encephalitis virus,SLEV)和登革病毒(Dengue virus,DV)5种蚊媒病毒的多重RT-PCR方法。方法利用Primer Premier5.0软件设计5种病毒的特异性DPO引物,对引物浓度、Mg2+浓度和退火温度进行优化,测定多重RT-PCR反应的特异性和敏感性。结果应用DPO引物技术建立的多重RT-PCR方法可特异性扩增JEV、YFV、WNV、SLEV和DV的142 bp、293 bp、377 bp、630 bp和521 bp基因片段,灵敏度分别为5 000 PFU/ml、4 500 PFU/ml、2.3×105copies/μl、2.6×104copies/μl和1.37×104copies/μl,蚊虫模拟添加实验未发生非特异反应。结论应用DPO引物技术建立的针对5种蚊媒病毒的多重RT-PCR检测方法有良好的敏感性和特异性,可以同时对JEV、YFV、WNV、SLEV和DV进行检测。 | 徐焕洲 平芮巾 季汝武 王琳 杨鹏飞 张丽萍 岳启安 胡孔新 | 2012 | 中国国境卫生检疫杂志2012，35，2： | 20 |
| 2 | 中国首例黄热病输入病例的实验室检测显示文摘目的通过实验室检测发现并确诊中国首例输入性黄热病病例。方法利用ELISA法检测1例疑似登革热病例样本中登革病毒NS1抗原,采用实时荧光RT-PCR法检测样本中黄热病、登革热与寨卡等几种病毒的核酸。结果ELISA法检测登革病毒NS1抗原阴性,实时荧光RT-PCR法检测该病例样本中登革热与寨卡病毒核酸阴性,黄热病毒核酸阳性。结论该病例为全国首例输入性黄热病实验室确诊病例。 | 吕燕宁 李洁 陈丽娟 窦相峰 田丽丽 王全意 黎新宇 庞星火 | 2016 | 首都公共卫生2016，10，2： | 11 |
| 3 | 重组酶介导扩增方法快速检测黄热病毒显示文摘目的本研究采用重组酶介导的等温核酸扩增方法(RAA),通过使用逆转录酶,建立黄热病毒的一步法等温核酸扩增(RT-RAA)方法。方法根据黄热病毒基因组保守序列设计引物和探针,建立并分析RT-RAA的重复性、特异性、灵敏度;以所建立方法对黄热病毒样本进行检测,同时以基因测序进行验证。结果黄热病毒RT-RAA扩增,体系中加入40 U的逆转录酶扩增效果最佳。该方法检测时间短(<20 min),并且灵敏度高,检测下限可达100 copy,与登革病毒、西尼罗病毒、日本乙型脑炎病毒、基孔肯雅热病毒等蚊媒病毒无交叉反应,具有良好的特异性。结论构建的黄热病毒RT-RAA方法具有快速、特异以及灵敏的特点,适应于黄热病毒的口岸快速检测。 | 郑伟 徐琦 罗鹏 冯娟 郭利川 应清界 | 2016 | 中国卫生检验杂志2016，26，1： | 7 |
| 4 | 云南省思茅地区乙型脑炎病毒及黄热病毒的分子流行病学监测显示文摘2009年至2010年,在云南省思茅地区普文镇、思茅区、震东乡、六顺乡、勐旺乡等地共采集17880只蚊子(分为91管),其中库蚊16500只(83管),按蚊1380只(8管)。采用RT-PCR方法,对91管蚊虫样本进行流行性乙型脑炎病毒NS1基因及黄热病毒E基因片段扩增,回收阳性PCR产物,并进行测序和遗传进化分析。结果表明,思茅地区库蚊乙型脑炎病毒检测阳性率为18.1%(15管/83管),黄热病毒检测阳性率为15.7%(13管/83管),思茅地区按蚊乙型脑炎病毒检测阳性率为25%(2管/8管),黄热病毒检测阳性率为12.5%(1管/8管)。克隆的流行性乙型脑炎病毒NS1基因及黄热病毒E基因与JEV和YFV参考株进行序列比对,与乙型脑炎病毒参考株同源性为88.3%~90.7%。监测结果显示,思茅地区蚊子JEV和YFV带毒率均较高,表明当地两种虫媒病毒病流行风险高。 | 刘振江 金宁一 鲁会军 李国江 刘昊 岳云强 郭欢欢 周红宁 杨中华 谢辉 | 2011 | 中国动物检疫2011，28，3： | 5 |
| 5 | 黄热病病毒检测技术研究进展显示文摘本文综述了黄热病病毒检测技术的研究进展。黄热病病毒的检测技术对于黄热病爆发的快速诊断、流行病学研究以及接种黄热病疫苗后的血清抗体监测都有重要的意义。 | 苏艳丽 王树祥 | 2011 | 旅行医学科学2011，17，2： | 4 |
| 6 | 黄热病毒逆转录环介导等温扩增检测方法的建立显示文摘【目的】建立一种简便快速的黄热病毒分子检测方法。【方法】运用RT-LAMP(Reserve transcription loop-mediated isothermal amplification)技术设计一套引物特异性识别黄热病毒E基因中的6个区域,建立高效简便的黄热病毒等温扩增检测方法。【结果】该检测方法具有良好的特异性,与其他虫媒病毒无交叉反应。同时检测灵敏度可达到0.066 pg,与RT-PCR相比,灵敏度高100倍左右。模拟样本检测与预期相符,临床样本未检测到阳性标本。【结论】该方法为黄热病毒检疫提供了一种可在简便环境中特异、灵敏的快速检测手段。 | 吕沁风 陈寅 吴忠华 郑伟 张严峻 李禾 | 2014 | 微生物学通报2014，41，1： | 4 |
| 7 | 黄热病毒实时荧光定量PCR方法的建立显示文摘目的建立黄热病毒的实时荧光定量PCR检测技术,以实现黄热病毒感染早期的筛选和检测。方法以带有黄热病毒基因质粒为阳性模板,采用TaqMan探针法,制作标准曲线,以实现对黄热病毒的简单快速的高灵敏度、高特异性实时检测。结果该方法检测的最低拷贝数可以达到3.457copies/μl。组内及组间变异系数均低于5%,证明该方法具有良好的敏感性及稳定性。以1~4型登革病毒和乙脑病毒基因组为模板,检测结果为阴性,证明该方法有良好的特异性。结论该方法可快速、灵敏、特异、定量检测黄热病毒,能用于黄热病毒感染的早期诊断。 | 祁倩 劳小荣 陈蔼珍 熊建英 周旋 张其威 朱利 李凌 万成松 赵卫 | 2013 | 现代预防医学2013，40，15： | 1 |
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