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| 1 | 单克隆抗体在农药残留检测中的应用显示文摘自1975年Kohler和Milstem创建了杂交瘤技术制备单克隆抗体以来,单克隆抗体已广泛应用于医学、农业及其他生物领域中。本文阐述了农药单克隆抗体的制备流程、已发展的农药单克隆抗体种类及农药残留常用的免疫分析方法,并就农药单克隆抗体制备值得注意的问题提出了建议。 | 赵肃清 蔡燕飞 李军 孙远明 余林 方岩雄 张(火混) | 2005 | 免疫学杂志2005，21，B06： | 6 |
| 2 | 农药氟虫腈作用下斑马鱼miR-155对UHRF1的调控作用显示文摘农药氟虫腈对生物体具有慢性神经毒性,对生态环境具潜在的危险性。通过实验分析不同浓度氟虫腈等农药处理后,miRNA和相关靶基因在核酸和蛋白水平的表达,有助于明确miR-155和相关靶基因在外源化学物质毒理学效应中的作用与关系。本研究以dre-miR-155为研究对象,通过生物信息学分析,对其靶标进行预测,结合互补'种子'序列、结合的自由能以及各数据库中的排位等因素,选取所预测靶基因UHRF1进行研究,并利用荧光定量PCR、Western blot从基因和蛋白水平研究miR-155对基因UHRF1的调控作用。结果表明,在氟虫腈的作用下miR-155表达上调,UHRF1表达下调;UHRF1蛋白表达量随miR-155表达的增加而减少,miR-155可能对UHRF1的表达有负调控作用。miR-155对UHRF1的调控作用的研究对毒理学、生物医学等领域具有重要意义。 | 张杰 张凯 李鹿丰 郭江峰 | 2013 | 浙江理工大学学报(自然科学版)2013，30，6： | 2 |
| 3 | 盐酸克伦特罗生物素化单链抗体在大肠埃希氏菌中的表达显示文摘目的 提取盐酸克伦特罗(CLB)生物素化抗体片段蛋白进行表达,为下一步纯化及农兽药品快速检测奠定基础。方法 确定一株生物素化CLB噬菌体抗体 “pHEN1-BHNS-CLB1”对其进行蛋白表达,即从噬菌粒“PHEN1-BHNS-CLB1”切下scFv基因片段,亚克隆至能引导可溶性表达的载体pCANTAB5E上,完成了重组质粒的构建,将所构质粒转化大肠埃希氏菌感受态细胞BL21。命名“5E-BHNS-CLB1”,并对“5E-BHNS-CLB1”进行PCR及酶切鉴定后,测序分析。结果 ELISA结果证明其具有较好的亲和性,竞争抑制ELISA、与gp120蛋白及三聚氰胺的交叉反应ELISA结果均证明其具有很好的特异性,片段大小与预想目的片段大小一致,SDS-PAGE及Western blotting的结果显示,其分子量大小与目的一致,并能与抗E-tag标签抗体结合显色。结论 说明表达的蛋白能与表达载体5E后带有E-Tag标签的短肽作用,含有E-Tag标签,是我们要表达的目的蛋白,为下一步纯化蛋白创造了条件。 | 马巍娜 刘雪林 宋宏彬 沈建良 黄友章 刘毅 向丹 | 2016 | 现代检验医学杂志2016，31，4： | 1 |
| 4 | 毒死蜱单克隆抗体制备及icELISA检测方法优化显示文摘目的:制备毒死蜱单克隆抗体,建立 icELISA(间接竞争酶联免疫吸附方法)检测方法并对其进行优化。方法以毒死蜱为基础物质,制备半抗原CPF-H1和CPF-H2,偶联蛋白制备人工抗原,进而通过免疫、细胞融合、筛选得到特异性的单克隆抗体,建立毒死蜱的icELISA检测方法,并对其分析条件进行优化。结果质谱鉴定结果表明毒死蜱半抗原制备成功;半抗原偶联蛋白,紫外全波长扫描鉴定人工抗原制备成功;免疫动物、细胞融合并制备单克隆抗体;建立了icELISA检测方法,优化得到最佳反应条件: PBST为标准品稀释液,包被抗原最佳稀释倍数为1:1000,抗体最佳稀释倍数为1:1000,一抗反应最佳时间为40 min,二抗反应最佳时间为30 min,制得毒死蜱标准曲线,毒死蜱对抗体的 IC50为73.25 ng/mL,线性范围 IC20~IC80为32.52~260 ng/mL, LOD为19.34 ng/mL。结论本研究为毒死蜱快速检测技术奠定了理论基础,对保障人们的身体健康具有重要的意义。 | 王伟华 田木星 韩占江 | 2014 | 食品安全质量检测学报2014，5，6： | 1 |
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