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| 1 | 诱导型巨噬细胞特异性敲除GRK2基因小鼠模型的构建及应用显示文摘目的 建立诱导型巨噬细胞特异性敲除G蛋白偶联受体激酶2(GRK2)基因(GRK2^(flox/flox)Lyz2-CreERT^(+))小鼠模型。方法 基于Cre/LoxP系统构建GRK2^(flox/flox)Lyz2-CreERT^(+)小鼠。通过PCR扩增程序及琼脂糖凝胶电泳鉴定GRK2^(flox/flox)Lyz2-CreERT^(+)小鼠的基因型。二氧化碳法处死小鼠后,Western blot检测骨髓源巨噬细胞(BMDMs)和腹腔巨噬细胞(PMs)中GRK2表达。免疫荧光检测小鼠脑、心脏和脾脏巨噬细胞中GRK2表达。流式细胞术分析前列腺素E2(PGE2)诱导的PMs中M1/M2比例。结果 基因型鉴定结果表明,flox扩增产物长度在355 bp处有一条条带且Cre扩增产物长度在355 bp处有一条条带的小鼠即为GRK2^(flox/flox)Lyz2-CreERT^(+)小鼠。Western blot结果显示,与GRK2^(flox/flox)小鼠相比,GRK2^(flox/flox)Lyz2-CreERT^(+)小鼠BMDMs和PMs中GRK2表达降低(P<0.01)。免疫荧光结果显示,与GRK2^(flox/flox)小鼠相比,GRK2^(flox/flox)Lyz2-CreERT^(+)小鼠脑、心脏和脾脏中GRK2表达降低(P<0.01)。流式细胞术结果显示,与GRK2^(flox/flox)小鼠相比,GRK2^(flox/flox)Lyz2-CreERT^(+)小鼠PMs中CD86/CD206比例变化差异无统计学意义。在PGE2(10μmol/L)刺激下,GRK2^(flox/flox)Lyz2-CreERT^(+)小鼠PMs中CD86/CD206比例升高(P<0.01),且GRK2^(flox/flox)小鼠PMs中CD86/CD206比例高于GRK2^(flox/flox)Lyz2-CreERT^(+)小鼠(P<0.01)。结论 该研究成功构建出GRK2^(flox/flox)Lyz2-CreERT^(+)小鼠模型,且该小鼠可促进PGE2诱导的PMs向M2型巨噬细胞极化。 | 魏琦 朱学敏 刘潇一 杨雪枝 魏伟 | 2023 | 安徽医科大学学报2023，58，4： | 0 |
| 2 | 鱼鳞膏调节IL-6/STAT3信号通路对难愈性皮肤溃疡模型大鼠创面愈合的影响显示文摘目的初步探讨鱼鳞膏调节白细胞介素-6(IL-6)信号转导与转录激活因子3(STAT3)信号通路对难愈性皮肤溃疡模型大鼠创面愈合的影响。方法高脂高糖喂养联合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病大鼠模型,手术剪去背部皮肤构建难愈性皮肤溃疡大鼠模型;造模成功后按照随机数字表法分为模型组、鱼鳞膏组、激活剂组,每组12只,另外取12只大鼠作对照组(模型对照),各组贴敷和腹腔注射相应药物,每天1次,连续21 d;给药结束后测量大鼠创面愈合情况;HE染色观察创面损伤及新生毛细血管情况;酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠胎盘创面组织中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;免疫组化染色测定碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、血小板-内皮细胞黏附分子-1(CD31)表达;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测创面组织中IL-6与STAT3 mRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测大鼠创面组织中血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子-β1(TGF-β1)及IL-6/STAT3通路相关蛋白的表达。结果与对照组比较,模型组大鼠创面愈合率、新生血管数及bFGF、CD31、VEGF、TGF-β1蛋白表达水平显著降低,IL-6、IL-1β、TNF-α水平、IL-6、STAT3 mRNA及蛋白表达水平显著升高(P<0.05);与模型组比较,鱼鳞膏组大鼠创面愈合率、新生血管数及bFGF、CD31、VEGF、TGF-β1蛋白表达水平显著升高,IL-6、IL-1β、TNF-α水平、IL-6、STAT3 mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与鱼鳞膏组比较,激活剂组大鼠上述指标变化均显著逆转(P<0.05)。结论鱼鳞膏具有抑制炎症反应,促进难愈性皮肤溃疡大鼠血管形成及创面愈合的作用,其作用机制可能与抑制IL-6/STAT3信号通路有关。 | 王晋军 王品一 黄贤明 张中旺 陈啸 李强 | 2023 | 药学研究2023，42，12： | 0 |
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