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| 1 | 禽白血病实验室诊断技术研究进展显示文摘禽白血病(AL)是以淋巴组织增生为特征的慢性恶性肿瘤病,禽白血病病毒(ALV)具有可垂直传播、潜伏期长、感染后持续排毒等特征。从ALV分离、血清学诊断技术和分子生物学诊断技术等方面对AL实验室检测技术的最新动态和前沿技术进行了研究,以期为ALV分子流行病学调查、监测净化和禽痘等活疫苗的外源病毒监测提供有效的技术支持,满足饲养场现场简易操作和疫控机构快速诊断等需求。 | 王哲 金晖 李寅博 陈晨 徐畅 刘贺 | 2023 | 畜禽业2023，34，7： | 0 |
| 2 | E3泛素连接酶RNF165在A亚群禽白血病病毒复制中的作用显示文摘【目的】探明鸡源环指蛋白165(ring finger protein 165,RNF165)在A亚群禽白血病病毒(ALV-A)复制中的作用,为进一步研究鸡源RNF165对ALV-A致病性的影响提供参考。【方法】将ALV-A接种于DF-1细胞和1日龄雏鸡,通过Western blotting和实时荧光定量PCR方法分别从体外和体内两个方面验证ALV-A对宿主RNF165表达的影响;参考已公布的RNF165基因序列设计过表达引物,通过PCR扩增RNF165基因,将其克隆至真核表达载体pcDNA3.1;将验证表达的重组质粒转染DF-1细胞,1 d后接种ALV-A,使用Western blotting检测过表达RNF165对病毒复制的影响;最后设计突变引物,构建RNF165功能结构域突变质粒,将过表达质粒和突变质粒分别转染DF-1细胞,1 d后接种ALV-A,Western blotting测定gp85蛋白表达差异。【结果】ALV-A感染DF-1细胞后未能检测到内源性的RNF165蛋白,但基因转录水平较对照组明显下调(P<0.01)。在体内试验中,与对照组相比,感染病毒雏鸡肝脏中RNF165基因和蛋白表达水平均有所下调(P<0.01);通过PCR成功扩增到大小为1068 bp的目的片段并成功克隆至pcDNA3.1,Western blotting结果显示,在39 ku处出现目的条带,RNF165过表达后促进了病毒复制;测序结果显示,成功构建出功能结构域突变质粒,与过表达质粒组相比,RNF165突变质粒组病毒的复制水平受到显著抑制。【结论】ALV-A感染抑制DF-1细胞和雏鸡肝脏RNF165的表达,在体外试验中,过表达RNF165会促进ALV-A的复制,且这种影响与其保守结构域有关。 | 王兴明 王后坤 陈雪阳 方春 梁雄燕 杨玉莹 | 2023 | 中国畜牧兽医2023，50，9： | 0 |
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