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1Developing an efficient and visible prime editing system to restore tobacco 8-hydroxy-copalyl diphosphate gene for labdane diterpene Z-abienol biosynthesis显示文摘Prime editing(PE)is a versatile CRISPR-Cas based precise genome-editing platform widely used to introduce a range of possible base conversions in various organisms.However,no PE systems have been shown to induce heritable mutations in tobacco,nor in any other dicot.In this study,we generated an efficient PE system in tobacco that not only introduced heritable mutations,but also enabled anthocyanin-based reporter selection of transgene-free T_(1) plants.This system was used to confer Zabienol biosynthesis in the allotetraploid tobacco cultivar HHDJY by restoring a G>T conversion in the NtCPS2 gene.High levels of Z-abienol were detected in the leaves of homozygous T_(1) plants at two weeks after topping.This study describes an advance in PE systems and expands genome-editing toolbox in tobacco,even in dicots,for use in basic research and molecular breeding.And restoring biosynthesis of Z-abienol in tobacco might provide an efficient way to obtain Z-abienol in plants.Jianduo Zhang Lu Zhang Chengwei Zhang Yongxing Yang Huayin Liu Lu Li Shengxue Zhang Xianggan Li Xinxiang Liu Ya Liu Jin Wang Guangyu Yang Qingyou Xia Weiguang Wang Jinxiao Yang 2023Science China(Life Sciences)2023,66,12:1
2引导编辑系统研究进展显示文摘引导编辑(Prime editing,PE)系统是一种全新的、革命性的基因组编辑策略。该系统由引导编辑器(Prime editor)组成,包括nCas9(H840A)与逆转录酶(Reverse transcriptase,RT)的融合蛋白;以及包含PBS(Primer binding site)序列和RT模板(RT template,RTT)序列的pegRNA(Prime editing guide RNA)两大部分。PE系统可以在双链不断裂的情况下实现所有12种类型的碱基替换及小片段DNA增删,是精准编辑的全新范式。自2019年开发至今不到4年时间,PE系统作为一种通用的技术平台,已广泛应用于医疗、农业等各个领域,产生了一大批新种质资源、基因治疗药物等优秀应用案例。PE作为目前最灵活、最具发展前景的基因组精准编辑新手段,仍旧存在效率偏低、大片段操纵能力不足、系统组分设计复杂(如pegRNA)、安全性未全面评估等问题,仍需要深入研究。本文详细介绍了PE系统的技术原理及限制因素,全面总结了PE系统自开发以来的优化策略及在动植物系统、医疗领域的应用现状,并对PE的发展前景进行了展望。林秋鹏 朱秀丽 马琳莎 姚鹏程 2024华南农业大学学报2024,45,2:0
3基因编辑技术及其在农作物中的应用进展显示文摘全球气候变化、人口增长、耕地减少和极端天气频发等为粮食安全和农业可持续发展带来诸多挑战。以CRISPR/Cas为代表的基因组编辑技术能够快速定向创制农作物新种质,提高育种效率,为保障粮食安全和生态安全提供有力的技术和材料支撑。综述了CRISPR/Cas系统介导的基因敲除、单碱基编辑、精准替换和引导编辑技术的研发及其在农作物遗传改良中的应用进展,并对我国农作物基因编辑研究进行了展望和建议,以期为今后农作物基因编辑研究的发展和应用提供参考。闫磊 张金山 朱健康 夏兰琴 2022中国农业科技导报2022,24,12:0
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