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1利用CRISPR/Cas9技术改良三系杂交稻恢复系外观品质显示文摘【目的】通过CRISPR/Cas9技术同时编辑多个粒型基因,获得粒长增加、粒宽降低的理想粒型,快速提高三系杂交稻恢复系的外观品质,为三系杂交稻提供优良亲本材料。【方法】利用CRISPR/Cas9技术在恢复系桂恢582(GH582)中同时敲除粒型基因GS3、GW8和TGW3,在T2代选择突变位点纯合无标记基因且符合预期目标的单株鉴定为新恢复系,并对新恢复系进行主要农艺性状及透明度、垩白度、垩白粒率等米质相关性状分析。【结果】对恢复系GH582多个不同粒型突变单株的3个突变基因位点进行测序分析,获得4种突变类型:GW8tgw3GS3、GW8TGW3gs3、gw8TGW3gs3和gw8tgw3gs3。结合粒型分析显示gs3和tgw3基因的单独突变均显著增加了籽粒长(P<0.05,下同);籽粒宽的显著下降主要来自gw8基因突变;三者同时突变(gw8tgw3gs3)使得籽粒长增加的叠加效应明显。选择3基因位点突变体(gw8tgw3gs3)鉴定为新恢复系GH582E。农艺性状分析结果显示,GH582E相较GH582,籽粒长由8.62 mm增加至10.21 mm,增加18.4%;籽粒宽度由2.82 mm下降至2.45 mm,下降13.1%,其他农艺性状无显著变化(P>0.05)。米质分析结果显示,由于GH582E米粒长增加,米粒宽降低,使得透明度升高,垩白粒率和垩白度极显著下降(P<0.01),外观品质得到提升。【结论】通过CRISPR/Cas9技术改良粒型可快速提升水稻恢复系的外观品质,促进现有资源的有效利用,提高杂交稻亲本的育种效率。黄娟 高利军 李经成 周维永 邓国富 潘英华 卿冬进 陈韦韦 伍豪 戴高兴 2023西南农业学报2023,36,9:1
2The mitochondria-localized protein OsNDB2 negatively regulates grain size and weight in rice显示文摘Grain size is a determinant of rice grain yield.In plants,mitochondria supply energy for cellular metabolism via the mitochondrial electron transport chain.Here we report that OsNDB2,which encodes a putative rotenone-insensitive typeⅡNAD(P)H dehydrogenase(ND),negatively regulates grain size and weight in rice.Six ND members representing three major types of rice were identified,and the predicted OsNDB2 protein was localized to mitochondria.Contents of OsNDB2 transcripts were higher in young panicles and leaf blades.OsNDB2 overexpression reduced grain length,grain width,and 1000-grain weight and moderately influenced plant height,while knockout of OsNDB2 increased grain size and 1000-grain weight.Allelic mutations of OsNDB2 were associated with diverse grain appearances.Cellular observations revealed that variations in grain size of transgenic lines were caused by change in cell expansion but not cell proliferation in spikelet hulls.Our study sheds light on OsNDB2 function and provides a new potential breeding approach for increasing rice grain size and weight.Mingxin Guo Jiajia Liu Linlin Hou Suna Zhao Nana Zhang Lili Lu Xusheng Zhao 2022The Crop Journal2022,10,6:0
3CRISPR/Cas基因编辑系统在水稻中的研究进展显示文摘基因编辑是一种能对特定基因进行修饰的基因工程技术,能快速对靶点基因编辑,是高效捕获目的基因、快速研究目标基因功能的重要手段,在基因功能研究和作物育种等方面有着重要意义和广阔的应用前景。基因编辑利用特异的DNA结合元件和切割元件开展编辑工作,然而该技术最需注意的是特异性和脱靶率问题,不同时期的基因编辑技术也针对上述2个问题进行改良,目前应用最为广泛的是CRISPR/Cas9,Cas12a由于其特异性高且脱靶率大大降低也受到越来越多的关注。本文对基因编辑的技术发展及特点、CRISPR/Cas9和Cas12a的技术优势进行介绍,并对这2种技术在水稻产量、抗性及品质中的研究进展进行综述,同时对拓展CRISPR/Cas基因编辑技术在水稻中的应用提出展望,为基因功能鉴定及遗传改良提供参考。刘建菊 肖宁 吴云雨 蔡跃 潘存红 时薇 陈梓春 朱书豪 李育红 余玲 王志平 刘广青 周长海 黄年生 张小祥 季红娟 李爱宏 2023江苏农业科学2023,51,11:0
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