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    题名 作者 年代 出处 被引量
1蓝舌病病毒小反刍兽疫病毒羊口疮病毒和山羊痘病毒多重荧光定量PCR检测方法的建立与应用显示文摘为建立一种能够同时检测蓝舌病病毒(BTV)、小反刍兽疫病毒(PPRV)、羊口疮病毒(ORFV)和山羊痘病毒(CaPV)的方法,基于TaqMan探针技术,分别以NS3、N、F1L和P32为靶基因设计特异性探针和引物。以特异性引物扩增目的基因并构建重组质粒标准品。通过优化反应体系建立多重荧光定量PCR检测方法,并用此方法检测临床样品。结果显示,该多重荧光定量PCR标准曲线呈线性关系,对BTV、PPRV、ORFV和CaPV的扩增效率分别为100%、91%、91%、95%;该方法具有较高的灵敏性和特异性,对BTV、PPRV、ORFV和CaPV阳性质粒的最低检出量分别为17、12、8和9 copies/μL,与口蹄疫病毒、腐败梭菌、布鲁菌及弓形虫无交叉反应;其重复性较好,组间变异系数和组内变异系数均小于5%。对232份样品进行检测,用该多重荧光定量PCR分别检出9份BTV、3份PPRV、3份CaPV和24份ORFV阳性样品,而用常规PCR分别检出7份BTV、3份PPRV、0份CaPV、12份ORFV阳性样品。综上,该方法能够同时检测BTV、PPRV、ORFV和CaPV,可用于羊病的鉴别诊断、流行病学调查和疫病防控。勾倩倩 杜吉革 朱真 陈小云 赵辉 赵洋 钱莺娟 印春生 2022中国兽医科学2022,52,12:2
2羊痘病毒80、81基因真核表达载体构建及鉴定显示文摘试验旨在探究羊痘病毒80、81基因的生物学功能。利用在线软件对80、81基因进行生物信息学分析,以此为基础通过PCR技术扩增80、81基因,与真核表达载体pCDNA3.1构建重组质粒;重组质粒转染Vero细胞,CCK-8测定重组质粒在细胞中表达蛋白的毒力。结果显示:羊痘病毒80基因蛋白以α螺旋为主,表现出亲水性,具备功能酶位点;羊痘病毒81基因蛋白以无规则卷曲为主,表现出疏水性,也具有功能酶位点。以扩增80、81基因为模板成功构建pCDNA3.1-80、pCDNA3.1-81真核表达载体,CCK-8未检测到80、81基因在细胞中表达的蛋白具有毒力。研究表明,80、81基因具有功能位点,在转染细胞中未表现出毒力。葛志毅 赵微 程思危 周园霞 马欣欣 李有文 2023现代畜牧兽医2023,,11:0
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