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| 1 | 体外诱导糖尿病小鼠模型中性粒细胞胞外诱捕网的研究显示文摘目的建立佛波酯(phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA)诱导糖尿病小鼠骨髓来源中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps,NETs)形成的模型,为研究糖尿病足溃疡NETs产生和调节机制奠定基础。方法提取链脲佐菌素(streptozocin,STZ)诱导的糖尿病小鼠骨髓来源中性粒细胞,使用100、200、400nmol/L的PMA刺激细胞3~7h。采用核酸染料Sytox Green染色胞外DNA,通过激光共聚焦显微镜检测各组网状结构的形成、荧光免疫组化法检测瓜氨酸化组蛋白H_(3)(citrulline histone H_(3),Cit-H_(3))的表达、荧光探针测定细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,电子扫描显微镜下观察NETs形成情况。结果各组PMA刺激中性粒细胞,刺激5h形成少量NETs,6h时形成大量网状NETs结构,其中100nmol/L PMA处理组有明显NETs生成,7h时各组NETs开始消退;同时100nmol/L PMA刺激中性粒细胞6h时Cit-H_(3)的表达以及ROS水平显著升高;扫描电子显微镜可见NETs网状结构。结论100nmol/L PMA刺激STZ诱导的糖尿病小鼠骨髓中性粒细胞6h,可显著促进Cit-H_(3)表达和ROS生成,诱导NETs生成,可作为研究糖尿病小鼠NETs研究的模型。 | 马慧可 李萍 陈佳 刘欣 姚文涛 林燕 何秀娟 | 2022 | 医学研究杂志2022，51，9： | 1 |
| 2 | 基于circRNA-miRNA-mRNA三元转录网络探讨糖尿病动脉粥样硬化小鼠模型舌象形成的机制显示文摘目的:探讨糖尿病动脉粥样硬化模型小鼠与美国癌症研究所(ICR)小鼠舌组织中差异表达的环状RNA(circRNA)、微小RNA(miRNA)及信使RNA(mRNA),构建circRNA-miRNA-mRNA三元转录网络。方法:9只ICR小鼠为对照组,9只MKR小鼠(骨骼肌特异性胰岛素样生长因子1受体功能缺失)为模型组。各组用于组织病理染色6只,基因测序3只。模型组小鼠采用N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)腹腔注射+高脂饲料饲养。29 d后检测心电图改变、主动脉改变(HE染色)、舌面丝状乳头高度变化(HE染色)及舌面丝状乳头白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6和IL-8的蛋白表达。使用微阵列技术筛选舌组织中差异表达的基因,进行基因本体(GO)功能分析及京都基因和基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,采用qRT-PCR验证基因芯片结果,构建circRNA-miRNA-mRNA转录网络。结果:与对照组相比,模型组心电图出现“红旗飘飘”样改变,病理染色提示主动脉有脂质突出,舌组织出现炎症浸润,IL-1β、IL-6及IL-8蛋白表达均明显增高(P<0.01),舌面丝状乳头角化层和上皮层高度显著降低(P<0.01)。Tox2、Ncor2、Paqr6和R3hdm1基因表达的变化与微阵列结果一致(P<0.01),这些差异表达基因主要通过AGERAGE、TRP及GnRH等通路参与炎症反应、糖脂代谢紊乱及免疫细胞招募趋化等过程,由此构建28个circRNA、23个miRNA和46个mRNA组成的三元转录网络。结论:糖尿病动脉粥样硬化模型小鼠舌组织存在差异表达的circRNA和miRNA,这些差异基因可能通过circRNA-miRNA-mRNA三元转录网络系统调控糖尿病动脉粥样硬化的舌象形成。 | 王瑾茜 喻嵘 刘秀 邹婷 王存福 王霞 史留阳 陈亚 | 2023 | 中国病理生理杂志2023，39，4： | 0 |
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