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1盐度对不同蜕皮时期罗氏沼虾生理生化及蜕皮相关基因表达的影响显示文摘【目的】分析盐度对不同蜕皮时期罗氏沼虾蜕皮生理生化指标、能量代谢酶活性及蜕皮相关基因表达的影响,为实际生产中罗氏沼虾培育提供理论参考。【方法】以300尾平均初始湿体质量4.28±0.53 g/尾的健康罗氏沼虾为对象,试验设0.2‰(对照)、3.0‰、6.0‰、9.0‰、12.0‰等5个盐度梯度,记录不同盐度条件下罗氏沼虾的蜕皮周期、每日蜕皮率和蜕皮增重率。按照不同蜕皮时期取肝胰腺、肌肉和鳃丝,使用生化试剂盒测定丙酮酸激酶(PK)和琥珀酸脱氢酶(SDH)活力,并用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测蜕皮抑制激素(MIH)、维甲酸X受体(RXR)、蜕皮激素受体(EcR)、保幼激素酯酶环氧水解酶(JHEH)基因的表达情况。【结果】罗氏沼虾的蜕皮周期随盐度的升高而不断延长,其中6.0‰盐度组蜕皮周期最长,显著高于0.2‰盐度组(P<0.05);蜕皮增重率随盐度的升高总体呈下降趋势,在盐度6.0‰、9.0‰和12.0‰组中的蜕皮增重率显著低于0.2‰盐度组。在5个盐度条件下,肝胰腺、鳃丝的PK和SDH的活力均在蜕皮后期B有最大值,随着蜕皮后时间的延长,到蜕皮前期D时,其活力呈现下降的趋势,表明肝胰腺、鳃丝组织在蜕皮后期时能量代谢酶活力达到最高水平。在4个蜕皮阶段下,随着盐度的升高,肝胰腺和鳃丝的PK和SDH活力总体呈先上升后下降的趋势。低盐度的刺激导致罗氏沼虾肌肉的PK和SDH活力升高,而在12.0‰盐度组活力下降。MIH基因在各盐度组的相对表达量均随蜕壳时间的延长而明显下降,在0.2‰和3.0‰盐度组蜕皮后期A与蜕皮后期B的相对表达量显著高于蜕皮间期C。RXR基因在蜕皮间期C的相对表达量最高,其他蜕皮时期均极显著低于0.2‰盐度组(P<0.001)。与蜕皮间期C相比,各盐度组JHEH基因均在蜕皮前期D的相对表达量最高,而在3.0‰、6.0‰和12.0‰盐度组时,鳃丝EcR基因的相对表达量在蜕皮前期D极显著高于蜕皮间期C(P<0.001)。【结论】低盐度对罗氏沼虾的生长蜕皮有较大影响,不仅导致蜕皮增重率下降,蜕皮周期变长,对生产实践产生负面影响,还可使罗氏沼虾肌肉和肝胰腺的PK和SDH活力升高,从而促使肝胰腺和肌肉中的糖酵解速率加快,三羧酸循环作用加强,但在高盐度(12.0‰)条件下受到抑制。盐度胁迫下,MIH基因上调表达、EcR基因下调表达会引发蜕皮前期D时间延迟,蜕皮困难,致使JHEH和RXR基因表达下调,是导致罗氏沼虾生长缓慢的主要原因。罗氏沼虾养殖适宜的水体盐度为0.2‰~3.0‰。黎兰诗 戴习林 2022南方农业学报2022,53,8:1
2水体外源钙补充对罗氏沼虾蜕皮周期的影响显示文摘钙离子在甲壳动物蜕皮通路中发挥着重要作用,也是甲壳动物蜕皮后期新表皮矿化过程中的必需元素。为探究水体中外源钙的补充对罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)蜕皮周期的影响,本研究开展了水体钙离子浓度25(对照组)、85、145和205 mg/L的养殖实验,统计了不同水体钙离子浓度下罗氏沼虾蜕皮率,测定了罗氏沼虾蜕皮周期内血淋巴组织钙离子浓度变化,并通过扫描电镜分析了“补钙”对罗氏沼虾钙吸收与外骨骼矿化的影响。同时,获得了罗氏沼虾蜕皮通路中钙调蛋白(calmodulin,MrCaM,GenBank No.OQ411017)和钙网蛋白(calreticulin,MrCRT,GenBank No.OQ411018)基因CDS全长序列,通过qPCR分析了MrCaM和MrCRT基因在罗氏沼虾蜕皮各个阶段的表达情况。结果表明,罗氏沼虾在145 mg/L实验组的蜕皮率最高,当钙离子浓度为205 mg/L时蜕皮率显著低于对照组(25 mg/L)(P<0.05)。在不同的蜕皮时期,罗氏沼虾血淋巴钙离子含量随着水体钙浓度的增加呈现先上升后下降的趋势,均在145 mg/L实验组达到最大值,随后下降。扫描电镜结果表明,水体外源钙补充对蜕皮后期的外骨骼矿化具有促进作用。qPCR结果显示,MrCaM和MrCRT基因在不同的蜕皮阶段均在145 mg/L实验组表达量最高(P<0.05),205 mg/L实验组显著低于145 mg/L实验组(P<0.05)。不同蜕皮时期MrCaM和MrCRT基因与血淋巴钙离子含量的相关性分析结果表明,MrCaM在蜕皮期(E期)与其呈强相关性(r=0.8854),MrCRT基因在不同蜕皮时期都与血淋巴钙离子含量呈极显著相关(P<0.01)。综上所述,水体中的Ca^(2+)浓度在适宜范围内增加,可促进罗氏沼虾的蜕皮和外骨骼矿化。本研究为罗氏沼虾高密度养殖池塘水体的“补钙”提供了科学依据。都婷婷 丁丽 潘玺方 唐琼英 夏正龙 杨国梁 易少奎 2023农业生物技术学报2023,31,12:0
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