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1CRISPR/Cas9基因编辑技术在家畜中的应用研究进展显示文摘美国食品药品监督管理局(Food and Drug Administration,FDA)于2020年12月14日批准了名为GalSafe转基因猪上市。它是首个既可以有效减轻异种器官移植中的急性免疫排斥,又可以生产肉类过敏者可安全食用的转基因家畜。随着基因编辑技术不断发展,转基因动物走入市场已势不可挡,尤其近年来,规律成簇的间隔短回文重复序列及相关蛋白9(clustered regularly interspaced short palindromic repeats and CRISPR-associated protein 9,CRISPR/Cas9)系统成为基因编辑技术的一种重要的方法。CRISPR/Cas9基因编辑系统由于结构简单、效率高、应用范围广和成本低等优点被广泛应用于作物育种、家畜遗传改良、人类疾病治疗等方面。论文主要对CRISPR/Cas9基因编辑系统在家畜应用上取得的研究进展进行综述,并对未来发展前景进行展望。王彤 高元鹏 韩静 张景程 李喜和 何婷依 曹贵方 2021动物医学进展2021,42,11:2
2异种肾移植的临床研究进展显示文摘血液透析是终末期肾病患者维持生命的重要方式,但这种治疗方式会严重降低患者的生活质量,肾移植是治疗终末期肾病的最有效手段,能极大程度上改善患者的生存质量和生存率,但由于受到供肾资源短缺的限制,中国每年在分配系统中等待肾移植的患者约有10万余人,仅有3%的患者能够成功配型并接受肾移植手术。目前,通过使用血型不相容以及扩大标准的边缘供肾等策略在一定程度上改善了肾源短缺这一现状,但仍无法满足患者对于供肾的需求,因此供需之间的巨大差异是临床亟需解决的难题。陈玲 成家友 邱涛 王天宇 盛梦丹 唐艳 李金珂 周江桥 2023实用器官移植电子杂志2023,11,2:1
3利用CRISPR/Cas9技术构建ACE2基因修饰的猪胎儿成纤维细胞系显示文摘目的:利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建血管紧张素转换酶2(angiotensin converting enzyme 2,ACE2)基因编辑的长白猪胎儿成纤维细胞(porcine fetal fibroblast,PFF)细胞系,为构建新型冠状病毒即严重急性呼吸综合征冠状病毒2型(severe acute respiratory syndrome coronavirus type 2,SARS-CoV-2)不易感猪模型提供实验材料。方法:(1)利用生物信息学方法对大鼠和鸡的ACE2氨基酸序列进行比对,将大鼠ACE2与SARS-CoV-2 S蛋白相互作用的关键氨基酸残基替换为鸡ACE2的氨基酸残基,设计嵌合的ACE2基因并构建ACE2基因敲入供体。(2)设计并合成靶向猪ACE2基因的sgRNA,克隆到p X330载体上构建ACE2基因打靶载体。(3)将ACE2打靶载体和ACE2基因敲入供体以及Neomycin抗性质粒共转染至长白猪PFF细胞,筛选G418抗性单细胞克隆并进行测序鉴定。结果:根据氨基酸序列比对结果,将大鼠ACE2蛋白的第19、31、34、35、42、353、354位氨基酸残基替换为鸡ACE2的氨基酸残基,设计合成了嵌合的ACE2基因。G418抗性单细胞克隆基因型分析结果显示获得了阳性单细胞克隆。结论:利用CRISPR/Cas9技术成功获得了内源ACE2基因敲除、嵌合ACE2敲入的长白公猪PFF细胞系,为构建SARS-CoV-2不易感猪模型奠定了基础。张成霖 方斌 刘晓蕊 李琳 王盈 杨海元 戴一凡 2022南京医科大学学报(自然科学版)2022,42,11:0
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