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1大口黑鲈源维氏气单胞菌的分离鉴定显示文摘为查明2020年春季广东省佛山市某养殖场人工养殖大口黑鲈(Micropterus salmoides)鱼苗出现暴发性死亡的病因,该研究对患病大口黑鲈鱼苗肝脏组织中分离的一株细菌GZXR2020进行了分子鉴定,PCR扩增获得该菌株的16S rRNA基因和gyrB基因全长序列,BLAST显示其与维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)的相应序列高度同源,同源性分别高于99.5%和98.3%。根据VITEK2全自动细菌鉴定系统45个理化项目的鉴定结果、羊血琼脂平板溶血实验呈β-溶血的结果,进一步通过毒力基因检测并结合补充理化鉴定结果,可判断此分离菌株为维氏气单胞菌温和生物型(A.veronii bv.sobria)。人工回归感染实验采用低、中、高3种菌液浓度(3×10^(7)、1.5×10^(8)和3×10^(8)CFU·mL^(−1))进行腹腔注射攻毒,可分别导致7%、40%和100%的死亡率,证实维氏气单胞菌温和生物型是引起此次大口黑鲈暴发性死亡的致病原。药物敏感性实验显示,在所检测的17种抗菌药物中,该菌株对大观霉素、氟罗沙星、氟苯尼考等7种药物敏感。杨超 董浚键 刘志刚 孙成飞 赵飞 叶星 2021南方水产科学2021,17,3:13
2超声引导下经皮经肝胆管穿刺引流术治疗急性梗阻性化脓性胆管炎患者疗效分析显示文摘目的探讨在超声引导下经皮经肝胆管穿刺引流术(PTCD)治疗急性梗阻性化脓性胆管炎(AOSC)患者的疗效。方法2015年3月~2018年11月我院肝胆外科收治的78例AOSC患者,被随机分为开腹组(n=39)和PTCD(n=39),分别采取开腹手术和在超声引导下PTCD治疗。结果PTCD组手术时间、出血量、留置引流管时间和住院时间分别为(89.7±7.5)min、(26.3±2.4)ml、(8.8±1.0)d和(9.7±1.5)d,均显著少于或短于开腹组【分别为(120.8±10.6)min、(40.4±4.3)ml、(13.2±2.9)d和(18.6±3.8)d,P<0.05】;治疗后,两组患者肝功能指标变化无统计学差异(P>0.05);PTCD治疗患者血清降钙素原、白介素-6、白介素-4和C反应蛋白水平分别为(5.9±0.8)ng/L、(87.8±7.4)ng/L、(14.7±1.5)ng/L和(2.1±0.5)mg/L,均显著低于开腹组【分别为(8.9±1.2)ng/L、(102.9±11.3)ng/L、(22.4±2.1)ng/L和(3.1±0.7)mg/L,P<0.05】;PTCD治疗组术后并发症发生率显著低于开腹组(5.1%对23.1%,P<0.05)。结论超声引导下PTCD治疗AOSC患者可有效改善手术相关指标,减少并发症的发生,可能与引起机体炎症反应较轻有关。李蔚 王锡斌 崔卫东 杨青 刘会苗 杨金雨 王锡斌 2020实用肝脏病杂志2020,23,3:7
3鲫鱼致病性维氏气单胞菌的分离鉴定及生物学特性分析显示文摘为了分离并鉴定吉林省松原市查干湖地区引起鲫鱼多种脏器出血导致死亡的病原菌,试验从患病鲫鱼的鳃及脏器中进行病原菌的分离纯化,对分离的病原菌进行形态观察、生化特性鉴定、16S rDNA和管家基因gyrB PCR扩增及序列鉴定、动物回归试验(锦鲫鱼和斑马鱼)、半数致死量(LD50)的测定、毒力基因的检测、生物学特性的检测及药敏试验。结果表明:从患病鲫鱼脾脏中分离纯化得到一株优势菌株,命名为PC-1,根据生化特性初步判断该菌株为维氏气单胞菌。分离菌株PC-1的16S rDNA基因与管家基因gyrB经PCR扩增后,分别得到大小约为1470 bp和1022 bp的目的条带,目的条带测序后分别与GenBank中已公布的序列进行BLAST比对分析,发现与其他维氏气单胞菌的核苷酸相似性在99%以上。构建的进化树显示分离菌株PC-1与其他维氏气单胞菌菌株处于同一分支。健康锦鲫鱼感染PC-1后的临床症状与自然发病鲫鱼相似,经计算,锦鲫鱼的LD50为2.0×10^(5)cfu/mL,斑马鱼的LD50为3.2×10^(4)cfu/mL。该菌携带Ⅳ型菌毛(tapA)基因、气溶素(aer)基因、细胞毒性肠毒素(act)基因、细胞兴奋性肠毒素(alt)基因、极性鞭毛(fla)基因、核酶(exu)基因、丝氨酸蛋白酶(ser)基因、弹性蛋白酶(ahyB)基因、酯酶(lip)基因9种毒力基因,不携带热稳定肠毒素(ast)基因。分离菌株PC-1培养24 h后形成较为稳定的生物被膜且生物被膜形成能力最强,同时OD600值在1.8以上。分离菌株PC-1对红霉素、羧苄西林和氨苄西林3种抗生素耐药,对米诺环素、庆大霉素和头孢氨苄3种抗生素中度敏感,对多西环素、四环素、新霉素等13种抗生素敏感。说明吉林省松原市查干湖地区鲫鱼感染的病原菌为维氏气单胞菌,该菌对鲫鱼具有较强的致病性。齐燕玲 方琼亚 丁妍 杨炳坤 黄淇星 薛智洋 陈思 胡曼洁 王丽霞 张蕾 2023黑龙江畜牧兽医2023,,4:1
4氧化胁迫下维氏气单胞菌qPCR内参基因筛选显示文摘[目的]筛选氧化应激胁迫下用于检测维氏气单胞菌基因变化的稳定实时荧光定量PCR(RT-qPCR)内参基因。[方法]选取16S rRNA、gyrB、recA、tmRNA、GAPDH作为候选内参基因,通过RT-qPCR方法检测其在维氏气单胞菌经不同浓度过氧化氢(H_(2)O_(2))溶液处理后的表达情况;利用NormFinder和BestKeeper对候选基因表达稳定性进行分析。[结果]在不同浓度H_(2)O_(2)溶液处理下,维氏气单胞菌中候选内参基因Ct值最稳定的是16S rRNA、GAPDH和tmRNA,分别约为14、30和22;NormFinder软件分析表达最稳定的内参基因是gyrB、GAPDH和16S rRNA,稳定值M分别为0.38、0.38和0.46;BestKeeper软件分析表达最稳定的内参基因是16S rRNA和GAPDH,P值分别为0.023和0.001,标准差分别为0.52和0.54,变异系数分别为3.81和1.83,相关系数分别为0.337和0.520。[结论]16S rRNA和GAPDH的Ct值稳定,NormFinder分析其稳定值低,稳定性好,BestKeeper显示16S rRNA和GAPDH的P值、标准差均符合要求,16S rRNA和GAPDH可作为氧化应激条件下进行维氏气单胞菌qPCR检测的内参基因。孙灵敏 唐燕琼 李宏 李娟娟 刘柱 马香 2022生物技术2022,32,3:0
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