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| 1 | 鸭疫里默氏杆菌RA-LZ01株GE296_RS01450基因介导其对重金属离子产生耐受性的分析显示文摘本研究旨在阐明鸭疫里默氏杆菌RA-LZ01株GE296_RS01450基因介导其对重金属离子产生耐受性的作用。构建RA-LZ01株的GE296_RS01450基因缺失株Δ1450和回复株cΔ1450,测定菌株的生长曲线、抗菌素对菌株的最小抑菌浓度(MIC)、菌株对重金属离子的耐受程度以及GE296_RS01450基因在特异性重金属离子刺激下的转录水平。结果显示,与亲本株相比,缺失株的生长能力以及11类抗菌素对缺失株的MIC值均无明显变化;与亲本株和回复株相比,缺失株对重金属离子Ni、Mn和Co的敏感性显著上升,并且在Ni、Mn刺激下,GE296_RS01450基因的转录水平显著上调。上述结果表明,GE296_RS01450基因不参与亲本株的生长及菌株对抗菌素的耐药性,可介导菌株对Ni、Mn和Co产生耐受性。GE296_RS01450基因属于GE296_RS01445-GE296_RS01450-GE296_RS01455 RND外排泵,编码外膜蛋白,我们将其命名为RopM。 | 秦明星 宫晓炜 陈启伟 王燕萍 权衡 朱雨佳 郑福英 蔺国珍 | 2021 | 畜牧兽医学报2021，52，10： | 2 |
| 2 | 铜绿假单胞菌生物膜对消毒剂抗性研究进展显示文摘消化内镜根据Spaulding分类被归属为中度危险性器械[1]。临床使用后的消化内镜必须经过规范清洗和高水平消毒后才能用于下一位患者[2,3],目前广泛使用的高水平消毒剂包括戊二醛、邻苯二甲醛、过氧乙酸、酸性氧化电位水和含氯消毒剂等。随着消毒剂的广泛使用,消毒剂抗性研究也开始被关注。早在20世纪50年代Chaplin发现细菌对消毒剂有类似抗药性的性质[4],之后Lowbury就提出铜绿假单胞菌对季铵盐类消毒剂有抗性[5]。Chapman报道称细菌对氯已定、戊二醛、季铵盐及酚类化合物等部分消毒剂也产生了抗性[6]。 | 何荣攀 马久红 | 2019 | 中国消毒学杂志2019，0，4： | 2 |
| 3 | 大肠埃希菌外排泵AcrAB-TolC调控基因的表达与季铵盐化合物抗性关系的研究显示文摘目的研究大肠埃希菌外排泵AcrAB-TolC的调控基因marR、marA、soxS、rob在季铵盐化合物(quaternary ammonium compounds,QACs)耐药中的作用。方法取6株大肠埃希菌临床分离株,应用苯扎溴铵进行诱导,采用琼脂稀释法检测菌株在加入外排泵抑制剂氰化羰基-3-氯苯腙(Carbonyl cyanide 3-chlorophenylhydrazone,CCCP)前后对苯扎溴铵的敏感性;PCR扩增外排泵调控基因marR、marA、soxS、rob并测序;采用实时荧光定量PCR检测marR、marA、soxS、rob基因的转录水平。结果5株诱导株的苯扎溴铵最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)较其亲代增高4~8倍;加入外排泵抑制剂后11株菌的苯扎溴铵MIC值较加入前下降50.00%~99.61%,且诱导后的菌株下降率显著高于诱导前(Z=-2.943,P=0.003),5株诱导株的MIC值较其亲代下降50.00%以上;4株诱导株marA基因的转录水平较其亲代增高17~33倍,5株诱导株marR基因的转录水平较其亲代增高1~10倍(P<0.05);12株菌中有10株菌外排泵调控基因marR存在142位Tyr的缺失,11株菌marA基因存在145位Ser缺失和Met1Val突变,10株菌soxS基因存在Ser12Ala突变。结论marA基因转录增加致外排泵AcrAB-TolC的高表达与季铵盐化合物对大肠埃希菌的抗性产生可能有一定关联。 | 代冰洁 祁萌 贾宇驰 祁伟 | 2020 | 中国病原生物学杂志2020，15，5： | 1 |
| 4 | RaeX蛋白在鸭疫里默杆菌耐受重金属离子中的作用分析显示文摘为例验证GE296_RS01455基因编码的RaeX蛋白是否在鸭疫里默杆菌耐受重金属离子中发挥作用。以RA-LZ01作为亲本株,利用结合转移和同源重组技术构建GE296_RS01455基因缺失株Δ1455和恢复株cΔ1455;测定菌株的生长曲线,说明RaeX蛋白是否参与菌株的生长;通过点板试验检测菌株对重金属离子的耐受,利用实时定量RT-PCR检测菌株在重金属离子压力下的转录水平,验证RaeX蛋白是否与菌株对重金属离子的耐受相关。结果显示,成功构建GE296_RS01455基因缺失株Δ1455和恢复株cΔ1455;RaeX蛋白灭活不影响菌株的生长能力,但菌株对重金属离子Mn、Ni和Co的耐受性显著降低;在Ni和Co离子的压力下,亲本株RA-LZ01株GE296_RS01455基因的转录水平显著上升。GE296_RS01455基因编码的RaeX蛋白介导鸭疫里默杆菌对重金属离子Mn、Ni和Co产生耐受。 | 秦明星 宫晓炜 陈启伟 王燕萍 权衡 朱雨佳 郑福英 蔺国珍 | 2022 | 中国兽医学报2022，42，8： | 1 |
| 5 | 基于pDS132的基因敲除中创伤弧菌氯霉素的耐药性变化及影响显示文摘【背景】基于自杀载体的基因敲除在单基因敲除上的应用较为常见,但在多基因敲除过程中细菌耐药性的变化及对后续敲除的影响尚未明确。【目的】探究基于自杀载体pDS132的创伤弧菌vvhA与rtxA1双基因敲除株构建过程中,创伤弧菌对氯霉素耐药性的变化及对后续基因敲除的影响。【方法】基于自杀载体pDS132的同源重组法构建创伤弧菌YJ016的单基因敲除株YJ016-ΔvvhA、YJ016-ΔrtxA1和双基因敲除株YJ016-ΔvvhAΔrtxA1,记录单交换筛选时的氯霉素浓度与筛选平板上成功重组的菌株所占比例。琼脂稀释法测定野生型与敲除株的氯霉素最低抑菌浓度(Minimum InhibitoryConcentration,MIC)和抗性突变频率,纸片扩散法测定菌株对其他药物的敏感性,分析其对单交换筛选的影响。【结果】单基因敲除株的氯霉素MIC及氯霉素抗性突变频率高于野生型;双基因敲除株的庆大霉素抑菌圈直径小于野生型。单基因敲除时,单交换重组菌株的占比为100%(20/20);在YJ016-ΔvvhA上敲除rtxA1基因,氯霉素筛选浓度为2、4μg/mL时,单交换重组菌株的占比分别为40%(8/20)、5%(1/20);在YJ016-ΔrtxA1上敲除vvhA基因,氯霉素筛选浓度为2、4μg/mL时,单交换重组菌株的占比均为0%(0/20)。【结论】基于自杀载体pDS132的基因敲除中创伤弧菌氯霉素的耐药性升高,可能影响后续单交换重组的筛选,该结果为基于自杀载体的同源重组技术应用于多基因敲除提供了参考。 | 凤梓涵 王静 金虹 辛文文 康琳 王菁 高姗 李岩伟 袁媛 王景林 | 2021 | 微生物学通报2021，48，8： | 0 |
| 6 | 一株污水源多重耐药大肠杆菌的耐药性检测及全基因组测序分析显示文摘【背景】水体环境分布广、流动性强,是耐药菌和耐药基因传播的主要媒介。【目的】了解北方污水厂大肠杆菌携带的耐药基因及可移动遗传元件情况。【方法】从北方污水厂筛选出一株多重耐药大肠杆菌,通过药敏试验进行耐药性检验,采用96孔板法测定菌株的最小抑菌浓度,利用酶标仪探究亚抑菌浓度抗生素对菌株生长的影响,并对菌株进行全基因组测序,对其携带的耐药基因及可移动遗传元件进行预测。【结果】大肠杆菌WEC对四环素、环丙沙星、诺氟沙星和红霉素具有耐药性,亚抑菌浓度的四环素、环丙沙星和诺氟沙星能够延缓或抑制菌株的生长。WEC菌株的基因组中包含一条大小为4782114 bp的环状染色体和2个大小分别为60306 bp(pWEC-1)和92065 bp(pWEC-2)的环状质粒。菌株共携带129个耐药基因,其中128个位于染色体上,在染色体上预测到原噬菌体、基因岛及插入序列的存在,部分可移动遗传元件携带有耐药基因。质粒pWEC-1中无耐药基因,pWEC-2含有1个耐药基因,在质粒基因组中预测到原噬菌体和插入序列。【结论】污水源大肠杆菌WEC是一株多重耐药菌株,其基因组中携带耐药基因和多种可移动遗传元件,具有发生耐药性转移的潜力。 | 崔红 王继华 车琦 黄涵 朱剑琴 | 2023 | 微生物学通报2023，50，9： | 0 |
| 7 | RaeR对鸭疫里默氏杆菌外排泵RaeC-RaeA-RaeB的调控作用研究显示文摘旨在阐明鸭疫里默氏杆菌RA-LZ01株GE 296_RS05175基因编码的RaeR对外排泵RaeC-RaeA-RaeB的调控作用。构建RA-LZ01株的GE296_RS05160基因(编码内膜蛋白RaeB)缺失株ΔRaeB和回复株cΔRaeB,以及GE296_RS05175基因缺失株ΔRaeR和回复株cΔRaeR。测定菌株的生长曲线、菌株对抗菌素的敏感性以及GE296_RS05160和GE296_RS05175基因在特异性底物刺激下的转录水平。结果显示,与亲本株相比,缺失株的生长能力无明显变化;与亲本株和回复株相比,缺失株ΔRaeB对卡那霉素、链霉素和十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate,SDS)的敏感性上升,而缺失株ΔRaeR对卡那霉素、链霉素和SDS的敏感性降低;加入SDS刺激后,RA-LZ01和ΔRaeR株的GE296_RS05160基因的相对转录水平分别上升了2.26倍和4.64倍,ΔRaeR株中该基因的上调倍数明显超过了RA-LZ01株;在SDS刺激下,RA-LZ01和ΔRaeB株的GE296_RS05175基因的相对转录水平均明显下调。上述结果表明,外排泵RaeC-RaeA-RaeB与菌株的生长无明显相关性,可介导菌株对卡那霉素、链霉素和SDS产生耐受;底物SDS可刺激GE296_RS05175基因的转录水平降低,该基因编码的RaeR对RaeB的表达发挥负向调控作用。 | 李倩倩 林馨 韦依琳 崔昊宇 邹荣华 吴晓妮 葛家振 黄国梁 张丽娟 郑福英 蔺国珍 | 2023 | 畜牧兽医学报2023，54，9： | 0 |
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