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1SDS与Triton X-100对细胞膜通透作用研究显示文摘十二烷基硫酸钠(Sodium Dodecyl Sulfate,SDS)和聚乙二醇辛基苯基醚(Triton X-100)是实验室中常用的表面活性剂,能溶解细胞膜中的脂类物质,增加细胞膜的通透性,辅助染色试剂快速渗透,在免疫染色或组织透明化中发挥着重要的作用。本工作研究了SDS和Triton X-100对细胞膜通透程度的差异,优化了最佳的透膜条件;考察了SDS和Triton X-100的选择对具体实验结果的影响,并应用合肥光源软X射线纳米显微线站的全场透射成像技术研究了透膜前后细胞形态的变化。结果表明:0.25%Triton X-100的透膜效果优于4%SDS。0.25%Triton X-100的最优处理时间为10 min;在过氧化物酶催化3,3’-二氨基联苯胺(3,3’-Diaminobenzidine,DAB)聚合的实验中,SDS会影响酶的催化活性进而影响染色效果,而Triton X-100不会影响染色结果;同步辐射高分辨成像结果显示,采用Triton X-100进行透膜,还不会显著影响细胞的形态。刘霞 孔华庭 张继超 诸颖 2022核技术2022,45,8:1
2罗非鱼肠系脂滴及相关蛋白提取过程分析显示文摘动植物中的脂质以脂滴(Lipid droplet,LD)的形式存在。掌握脂滴及脂滴相关蛋白(Lipid droplet related protein,LDRP)的提纯方法,对解析鱼类脂质变化及影响机制,寻求适宜的调控途径至关重要。以罗非鱼(Oreochromis niloticus)的肠系脂肪组织为原料,利用离心、重悬及增溶等处理手段分离纯化脂滴及LDRP,并结合SDS-PAGE和质量浓度变化分析提纯效果。结果表明,肠系脂肪组织经3次离心和3次重悬可有效去除杂质,获得较为纯净的脂滴。虽然溶解剂增溶提取的LDRP蛋白浓度较高,但电泳条带存在明显拖尾现象,说明脂质脱除效果不佳,影响了LDRP提取纯度。脱脂增溶需经4组有机溶剂联合处理才可获得纯度高、复溶效果好的LDRP提取样品。离心、干燥方式及脂滴冷冻对LDRP增溶影响差异不显著。李劼 黄卉 相欢 岑剑伟 魏涯 赵永强 郝淑贤 李来好 2023南方水产科学2023,19,3:0
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