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| 1 | miR-582-5p靶向抑制Rab27a对肺癌细胞生物学行为的影响显示文摘目的探讨microRNA-582-5p(miR-582-5p)在非小细胞肺癌(NSCLC)中表达及其对A549细胞增殖、侵袭的影响,以及对Rab27a基因的靶向调控作用。方法采用实时荧光定量PCR(QPCR)检测33例行手术治疗的NSCLC患者的癌组织、对应癌旁组织以及A549细胞株、人正常支气管肺上皮细胞株BEAS-2B中miR-582-5p的表达水平。采用miR-582-5p inhibitor(anti-miR-582-5p)和miR-582-5p mimics(mim-miR-582-5p)转染A549细胞,另分别转染miRNA inhibitor无关系列(antiNC)和miRNA mimics无关系列(mim-NC)作阴性对照。采用双荧光素酶报告实验验证Rab27a与miR-582-5p的关系。采用MTT法和Transwell小室法检测各组细胞增殖、侵袭能力;采用QPCR和Western blotting检测各组A549细胞中Rab27a mRNA和蛋白水平。结果 NSCLC组织和癌旁组织中miR-582-5p表达水平分别为0. 26±0. 09和0. 83±0. 10; A549细胞株和BEAS-2B细胞株中miR-582-5p表达水平分别为0. 63±0. 08和1. 17±0. 09,差异均有统计学意义(P<0. 05)。anti-miR-582-5p组A549细胞24、48、72、96 h后的增殖率分别为(115. 68±4. 34)%、(130. 48±5. 48)%、(138. 95±5. 55)%、(147. 03±5. 69)%,明显高于anti-NC组; mim-miR-582-5p组A549细胞24、48、72、96 h后的增殖率分别为(91. 31±4. 18)%、(86. 74±3. 23)%、(79. 45±3. 20)%、(75. 22±4. 09)%,明显低于mim-NC组,差异均有统计学意义(P<0. 05)。Transwell小室结果显示,anti-miR-582-5p组A549细胞侵袭数为189±19,明显高于anti-NC组; mim-miR-582-5p组A549细胞侵袭数为55±8,明显低于mim-NC组,差异均有统计学意义(P<0. 05)。miR-582-5p可抑制野生型Rab27a 3’-UTR报告基因载体的荧光素酶活性,而对突变型Rab27a 3’-UTR的荧光素酶活性无影响。anti-miR-582-5p组A549细胞Rab27a mRNA和蛋白表达水平分别为2. 01±0. 29和0. 85±0. 12,高于anti-NC组; mimi-miR-582-5p组A549细胞Rab27a mRNA和蛋白表达水平分别为0. 35±0. 08和0. 21±0. 05,明显低于mim-NC组,差异均有统计学意义(P<0. 05)。结论上调miR-582-5p表达可抑制Rab27a表达,从而抑制肺癌A549细胞增殖、侵袭活性,miR-582-5p有望成为肺癌新的治疗靶点。 | 叶璐 母丹 杨莉 付波 王敏 | 2019 | 临床肿瘤学杂志2019，24，2： | 6 |
| 2 | HOXA13在非小细胞肺癌组织中的表达及其对A549细胞和移植瘤生长的影响显示文摘目的:探讨HOXA13在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中的表达及沉默HOXA13基因表达对A549细胞和移植瘤生长的影响。方法:收集2014年3月至2016年4月在焦作煤业集团有限责任公司中央医院胸外科接受手术切除治疗的112例NSCLC癌组织和相对应的癌旁组织。q PCR实验检测NSCLC癌和癌旁组织中HOXA13表达。培养A549细胞并分为siRNA-HOXA13组、阴性对照组和对照组,q PCR实验检测A549细胞中HOXA13表达,CCK-8法检测细胞增殖能力,Transwell法检测细胞侵袭能力。建立裸鼠移植瘤模型,观察裸鼠生长情况,5周后处死,称瘤体质量并计算抑瘤率;qPCR实验检测瘤体组织中HOXA13表达水平。结果:NSCLC癌组织中HOXA13 mRNA相对表达量明显高于癌旁组织(1.83±0.13 vs 1.12±0.10,t=47.008,P=0.000),其相对表达量与TNM分期、分化程度和淋巴结转移相关(P<0.05)。siRNA-HOXA13组细胞中HOXA13 mRNA相对表达量低于阴性对照组和对照组(均P<0.05);siRNA-HOXA13组24、48、72、96 h时细胞增殖水平(D值)明显低于阴性对照组和对照组(F=30.727、5.427、13.816和24.454,均P<0.05或P<0.01);siRNA-HOXA13组侵袭细胞数低于阴性对照组和对照组(均P<0.05);siRNA-HOXA13组裸鼠移植瘤5周时瘤体质量小于阴性对照组和对照组,而抑瘤率高于阴性对照组(均P<0.05);siRNA-HOXA13组裸鼠移植瘤组织中HOXA13 m RNA相对表达量低于阴性对照组和对照组(均P<0.01)。结论:NSCLC癌组织中HOXA13呈高表达,且与肿瘤发生、进展及转移有关;特异性沉默HOXA13基因表达可抑制细胞增殖和侵袭力,并抑制裸鼠移植瘤生长。 | 刘玉玲 黄宝和 | 2019 | 中国肿瘤生物治疗杂志2019，26，6： | 1 |
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