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| 1 | 利用CRISPR/Cas9系统快速构建白念珠菌RAD23高表达菌株的研究显示文摘目的构建白念珠菌RAD23高表达菌株,探索其高表达对细胞耐受遗传毒性试剂胁迫的影响。方法采用瞬时CRISPR/Cas9系统,分别于体外扩增Cas9基因、sgRNA以及含MET3启动子的修复DNA,通过醋酸锂法转化白念珠菌野生型菌株,于SD-Ura-Met-Cys培养基筛选转化子,通过菌落PCR验证基因型,通过Western blot检测Rad23相对表达量,利用平板表型试验检测RAD23高表达对细胞耐受遗传毒性试剂的影响。结果成功构建了RAD23高表达菌株;与野生型菌株相比,高表达菌株中RAD23蛋白相对表达量约为野生型菌株的7倍(10.20 VS 1.46);在UV胁迫条件下,RAD23高表达菌株存活率显著下降(与野生型菌株相比,下降约1 000倍)。结论利用CRISPR/Cas9系统快速构建了白念珠菌RAD23高表达菌株,且RAD23高表达会抑制细胞对遗传毒性试剂UV的耐受能力。 | 冯佳 胡婧 单爱迪 曹振宇 吕睿 冯金荣 | 2019 | 中国病原生物学杂志2019，14，9： | 3 |
| 2 | 参与DNA损伤应答的长链非编码RNA显示文摘长链非编码RNA (long noncoding RNA, lncRNA)曾被看成是转录'噪声',事实上它在多种生命过程中发挥重要作用,其中就包括DNA损伤应答(DNA damage response, DDR)。DDR是细胞维持基因组稳定性的基石,它的缺陷会导致包括癌症在内的多种疾病的发生与发展。近年有关lncRNA在DDR中作用的研究发现,lncRNA不仅参与DDR,而且在DDR多个环节中发挥重要作用。DNA损伤发生后,细胞内许多lncRNA的转录发生显著变化,其中一些lncRNA的转录变化就是DDR调控的结果,如lincRNA-p21等。现有研究显示,这些由DNA损伤胁迫引起转录变化的lncRNA,可以通过调控DDR功能因子转录、参与DDR信号传导和直接参与DNA损伤修复这3种方式参与DDR,另有一些可受激转录的lncRNA则参与维护染色体整倍性和完整的基因组稳定机制,如NORAD和TERRA。 | 欧阳灿 黄慧 唐芳 周征 | 2018 | 生命科学研究2018，22，5： | 2 |
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