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| 1 | 芦笋茎尖遗传转化体系的建立与优化显示文摘通过优化根癌农杆菌EHA105(含有pBI121表达载体)介导的茎尖遗传转化条件,包括抑菌抗生素类型及浓度、农杆菌浓度、侵染时间、共培养时间、卡那霉素浓度等影响因素,建立芦笋品种‘达宝利’遗传转化体系。以0.1~0.3 cm长的芦笋茎尖为转化受体,用MS液体培养基(MS+蔗糖3%+乙酰丁香酮150μmol·L-1)悬浮菌体至OD 600为0.6,侵染茎尖15 min,20℃避光共培养4 d;抗性茎尖在筛选培养基(1/2 MS+IBA 0.5 mg·L^-1+KT 0.1 mg·L^-1+嘧啶醇0.5 mg·L^-1+羧苄青霉素200 mg·L^-1+卡那霉素50 mg·L^-1)上诱导长芽与生根,可获得抗性植株,经PCR、GUS组织化学染色和qRT-PCR检测,获得阳性植株。 | 张园 刘正杰 林春 闫亚泽 袁加红 王入 毛自朝 杨焕文 | 2020 | 西北农业学报2020，29，1： | 4 |
| 2 | 浮萍原生质体瞬时表达体系的建立及其应用研究显示文摘【目的】建立浮萍原生质体瞬时表达体系,以加快浮萍生物反应器工程的开发进程。【方法】采用酶解法制备浮萍原生质体,通过对愈伤组织类型、渗透压、预处理方法等一系列参数的优化调整,建立了浮萍原生质体制备方法。利用农杆菌介导外源基因进入浮萍愈伤组织,并制备原生质体观察瞬时表达情况,通过对农杆菌种类、菌浓度、乙酰丁香酮浓度及共培养时间等参数进行调整,筛选最佳的浸染条件。最后利用该瞬时表达体系进行亚细胞定位研究和启动子功能验证。【结果】原生质体制备的最佳条件为:以4℃过夜培养的浮萍悬浮培养愈伤组织为制备材料,用酶液(2%纤维素酶、0.5%离析酶、0.5%果胶酶、0.1 mol/L CaCl2、0.2 mol/L KCl、1%BSA、20 mmol/L MES pH 5.8、0.5 mol/L甘露醇)于25℃避光消化16 h(40 r/min);农杆菌浸染最佳条件为:农杆菌GV301在菌浓度(OD600)为1、乙酰丁香酮浓度为100μmol/L时,浸染悬浮培养愈伤有最大转化率。【结论】成功建立了浮萍原生质体瞬时表达体系,并证明其可用于亚细胞定位和启动子功能验证等方面的研究。 | 宋乐元 方扬 田润 杜安平 王海燕 | 2020 | 西南农业学报2020，33，8： | 1 |
| 3 | 转OsALS基因浮萍的抗除草剂活性分析显示文摘以乙酰乳酸合成酶为靶标的除草剂具有用量少、选择性强、杀草谱广等特点,在田间被广泛应用。本研究前期筛选到一株抗咪唑啉酮类除草剂'普施特'的水稻植株,并通过克隆获得了目的基因OsALS,序列分析发现OsALS基因的第627位点发生了突变。本研究为进一步研究突变的OsALS基因与水稻抗除草剂活性之间的关系,将OsALS构建到了p CAMBIA1301载体上,获得了转OsALS基因的浮萍并进行了转基因浮萍对除草剂的活性分析。研究结果表明,OsALS基因中627位点的突变很可能是导致转基因浮萍对除草剂'普施特'产生抗性的重要原因,研究结果为水稻种质资源和除草剂的开发提供了重要支持。 | 冯国栋 刘菲 胡建立 张融雪 孙玥 朱晔荣 王勇 苏京平 刘学军 | 2020 | 天津农业科学2020，26，1： | 0 |
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