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| 1 | 肾细胞癌中WNK2基因甲基化状态与mRNA表达的研究显示文摘目的探讨WNK2基因在肾细胞癌(RCC)发生及发展中的作用。方法选取2016年5月至2017年6月本院的肾肿瘤患者58例,分别应用甲基化特异性PCR(MSP)、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测其RCC及相应癌旁组织、正常组织标本中WNK2基因甲基化状态和mRNA表达情况。结果在58例RCC组织、癌旁组织及正常组织中的WHK2甲基化阳性率分别为65.52%(38/58),34.48%(20/58),10.34%(6/58)。RCC组织中WNK2基因甲基化阳性率明显高于癌旁组织及正常组织。而癌旁组织及正常组织中WNK2基因甲基化发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。在RCC组织中WNK2基因启动子区甲基化的发生率在患者的不同年龄、性别、肿瘤大小、临床分期、组织学分级等临床资料间比较,差异均无统计学意义(P>0.05);WNK2 mRNA在RCC和癌旁组织、正常组织中的相对表达量分别为(0.54±0.03)、(0.66±0.02)、(0.68±0.02),RCC组织中WNK2 mRNA相对表达量明显低于癌旁组织和正常组织,差异有统计学意义(P<0.05),但癌旁组织及正常组织中WNK2 mRNA相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。在RCC组织中WNK2基因mRNA相对表达量在患者的不同年龄、性别、肿瘤大小、临床分期、组织学分级等临床资料间比较,差异均无统计学意义(P>0.05);甲基化阳性组中WNK2基因的mRNA相对表达量显著低于甲基化阴性组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论WNK2基因启动子区甲基化及其mRNA相对表达量降低可能参与了RCC的发生,但与RCC的临床进展无关。WNK2基因启动子区发生甲基化可能是引起其mRNA相对表达降低的原因之一。 | 张晓宇 杨建琪 齐盼 苏建志 卫书飞 张爱莉 | 2021 | 国际泌尿系统杂志2021，41，5： | 0 |
| 2 | miR-222-5p靶向WNK2基因促进肝细胞癌生长显示文摘目的 探讨miR-222-5p对肝细胞癌(HCC)生长的影响及其分子机制。方法 实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-222-5p和WNK2 mRNA在HCC组织、癌旁组织及正常肝细胞系L02、不同HCC细胞系Hep3B、HepG2、HuH-7中表达;生物信息学预测和双荧光素酶验证miR-222-5p和WNK2靶向关系;取生长密度达50%~60%的HepG2癌细胞,分为miR-222-5p NC组、miR-222-5p mimics组、miR-222-5p inhibitor组、miR-222-5p NC+pSUPER-si NC组、miR-222-5p NC+pSUPER-si WNK2组、miR-222-5p inhibitor+pSUPER-si NC组、miR-222-5p inhibitor+pSUPER-si WNK2组、miR-222-5p NC+pcDNA组、miR-222-5p NC+pcDNA-WNK2组、miR-222-5p mimics+pcDNA组、miR-222-5p mimics+pcDNA-WNK2组,另取未转染L02正常肝细胞和HepG2癌细胞。24 h后,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖率;平板克隆法检测克隆形成能力;裸鼠成瘤实验检测细胞在动物体内成瘤能力;Western印迹法检测WNK2蛋白表达水平。结果 与癌旁组织及正常肝细胞相比,HCC组织及各细胞系中miR-222-5p表达水平明显升高,WNK2 mRNA和蛋白水平明显降低(P<0.05)。与miR-222-5p NC组相比,miR-222-5p mimics组miR-222-5p表达水平、增殖活性、克隆形成数和成瘤能力明显升高(P<0.05),miR-222-5p inhibitor组miR-222-5p表达水平、增殖活性、克隆形成数和成瘤能力明显降低,WNK2蛋白表达水平升高(P<0.05)。miR-222-5p和WNK2存在靶向关系。与miR-222-5p NC+pcDNA组相比,miR-222-5p NC+pcDNA WNK2组细胞增殖活性、克隆形成数和成瘤能力明显降低(P<0.05);miR-222-5p mimics+pcDNA组增殖活性、克隆形成数和成瘤能力明显升高(P<0.05)。与miR-222-5p NC+pcDNA WNK2组相比,miR-222-5p mimics+pcDNA WNK2组细胞增殖活性、克隆形成数和成瘤能力明显升高(P<0.05)。与miR-222-5p mimics+pcDNA组相比,miR-222-5p mimics+pcDNA WNK2组细胞增殖活性、克隆形成数和成瘤能力明显降低(P<0.05)。结论 过表达miR-222-5p可能通过靶向抑制WNK2表达促进肝癌HepG2细胞的增殖、克隆形成和成瘤能力,促进HCC生长。 | 石鑫 陈虎 王威 张敬坡 | 2024 | 中国老年学杂志2024，44，3： | 0 |
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