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| 1 | 黑曲霉YF1菌株对烟嘧磺隆的降解条件研究显示文摘黑曲霉(Aspergillus niger)YF1菌株是本实验室筛选得到的对烟嘧磺隆具有较强降解能力的菌株。为优化YF1菌株的降解条件,本试验分别对葡萄糖浓度、培养温度、初始pH和转速进行单因素试验,结果表明,YF1菌株降解烟嘧磺隆的最适条件为:葡萄糖浓度5g/L、培养温度30℃、初始pH值6.50和转速50r/min。本试验在研究其降解条件的同时,发现溶液的pH均出现下降,随后采用高效液相色谱检测草酸、L-苹果酸、α-酮戊二酸、乙酸、柠檬酸、D-苹果酸、琥珀酸的标准品,通过保留时间确定样品中的有机酸为草酸,但未检测出其它6种有机酸,因此,可以确定YF1菌株可以代谢葡萄糖产生草酸。本试验初步明确了黑曲霉YF1菌株对烟嘧磺隆的降解特性,为该菌株的应用奠定了基础。 | 贾志宁 张哲 张越 张红芹 张金林 | 2017 | 河北农业大学学报2017，40，3： | 6 |
| 2 | 粪产碱杆菌ZWS11菌株对烟嘧磺隆的酶促降解特性显示文摘为明确粪产碱杆菌Alcaligenes faecalis ZWS11菌株对烟嘧磺隆的酶促降解特性,采用丙酮沉淀、超声波破碎和高速离心等方法,提取制备了ZWS11菌株的胞外和胞内粗酶液以及菌体碎片悬浮液,并分别测定了其酶活力。结果表明:当V(菌体发酵液):V(丙酮)=1:3时提取到的胞外粗酶液具有较高的酶活力;胞外粗酶液、胞内粗酶液和菌体碎片悬浮液对24.9μmol/L烟嘧磺隆的平均降解率分别为87.4%、16.9%和17.4%,胞外粗酶液的降解能力与胞内粗酶液或菌体碎片悬浮液相比差异显著(P〈0.05),由此确定对烟嘧磺隆起降解作用的酶属于胞外酶。最适降解条件研究表明:该降解酶的酶促反应适宜温度为35℃,较适p H值为6.0,反应时间为30 min,在此条件下其对烟嘧磺隆的降解率在80%以上。此外,该降解酶在35~70℃、p H值4.0~9.0范围内均能够保持较高的酶活力,对烟嘧磺隆的降解率均在60%以上,表明该降解酶具有较好的热稳定性和酸碱稳定性。加入不同浓度十二烷基硫酸钠(SDS)和苯甲基磺酰氟(PMSF),对该降解酶的活力表现出了不同程度的抑制作用。研究结果可为烟嘧磺隆降解酶制剂的规模化生产及被烟嘧磺隆污染土壤的生物修复提供科学依据。 | 赵卫松 邱立红 郭庆港 鹿秀云 李社增 王培培 张晓云 马平 | 2016 | 农药学学报2016，18，4： | 5 |
| 3 | 烟嘧磺隆降解菌Chryseobacterium sp.LAM-M5的分离、鉴定及其降解机理研究显示文摘为获得更丰富的烟嘧磺隆降解菌资源,以合肥某烟嘧磺隆生产厂活性污泥为研究对象,从中分离并筛选得到一株能以葡萄糖为唯一碳源、烟嘧磺隆为唯一氮源生长的菌株,根据其表型特征、16S rRNA序列相似性、DNA-DNA杂交值(DDH)和平均核苷酸一致性(ANI)的分析结果,将其鉴定为Chryseobacterium lacus LAM-M5。该菌株可在7 d内将初始浓度为50 mg/L的烟嘧磺隆降解92.39%。利用液相色谱-质谱联用(LC-MS)对菌株LAM-M5与烟嘧磺隆混合培养后的代谢产物进行检测与鉴定,共有5种主要物质被检测到,根据烟嘧磺隆的化学结构式和中间代谢产物特征,初步推测出菌株Chryseobacterium sp.LAM-M5降解烟嘧磺隆的可能降解途径。利用高效液相色谱(HPLC)对接菌后降解体系内代谢产生的酸类物质进行分离与鉴定,结果表明产物主要为L-苹果酸。推测菌株LAM-M5受高浓度烟嘧磺隆胁迫,利用葡萄糖产生L-苹果酸,通过降低环境 pH使烟嘧磺隆发生水解,从而解除其胁迫。通过对菌株全基因组信息进行分析,预测了7种可能与烟嘧磺隆降解相关的基因。结果表明,菌株LAM-M5 具有较强的烟嘧磺隆降解能力,在烟嘧磺隆污染环境的生物修复上具有较好的应用潜力。 | 马青云 江旭 李情情 宋金龙 周义清 阮志勇 | 2022 | 生物技术通报2022，38，2： | 4 |
| 4 | 大曲中氯氟氰菊酯降解菌的分离筛选及特性研究显示文摘从大曲中筛选降解氯氟氰菊酯的安全菌株,通过测定各菌株对不同低质量浓度氯氟氰菊酯的降解情况选取最佳降解菌,采用分子生物学技术对其进行鉴定,同时对其生长与氯氟氰菊酯降解动态的相关性进行分析,并采用模拟混合农残体系验证其农残降解能力。结果表明,从大曲中共筛选得到2株氯氟氰菊酯耐受性较好的菌株,编号为L1和L5,经鉴定分别为驹形白色杆菌(Leucobacter komagatae)、玫瑰红红球菌(Rhodococcus rhodochrous),其中菌株L5对氯氟氰菊酯降解效果较好,且对质量浓度为5 mg/L的氯氟氰菊酯降解率最高,达71.44%,其降解效果与其生长密度有关,并且可以有效降解模拟混合农残,是一株具有良好开发前景的农药降解菌。 | 王若瑜 曹明 陈晶瑜 | 2020 | 中国酿造2020，39，3： | 2 |
| 5 | 一株五溴联苯醚(BDE-99)降解菌的分离、鉴定及降解特性显示文摘采用梯度压力驯化法从高海拔地区土壤样品中分离到1株能以BDE-99作为碳源生长的细菌菌株,命名为BHS-4,通过生理生化及对16S r DNA扩增,T/A克隆后测序鉴定,并进一步分析初始pH、温度、碳源、细胞表胞疏水性(MATH法)及共存重金属离子对菌株降解效果的影响。结果表明:菌株BHS-4与产碱杆菌属Alcaligenes cupidus同源性为99%。菌株降解BDE-99最适pH和温度分别为8.0、20℃,经11 d培养后,对浓度0.4 mg·L^(-1)的BDE-99,降解率达86.1%,在15~20℃范围具有较高降解率。降解特性研究结果显示,乳糖、麦芽糖和葡萄糖的添加促进了BHS-4对BDE-99的降解,而淀粉和乙酸钠添加对降解率产生了显著抑制作用(P<0.05)。NH_4NO_3的添加,使细胞表面疏水率(CSH)增加了49.5%,CSH与降解率呈极显著正相关(r=0.99,P<0.01)。Cu^(2+)、Zn^(2+)在0.1~0.3 mg·L^(-1)浓度下促进BDE-99降解;Cr^(6+)在0.1~0.6 mg·L^(-1)范围内对降解作用影响表现为先抑制、再促进、最后抑制。菌株BHS-4能在较低温度下对BDE-99进行高效降解且对Cu^(2+)、Zn^(2+)、Cr^(6+)具有一定的耐性,可应用于低温地区BDE-99的生物处理,同时可为进一步研究低温条件下BDE-99生物降解的代谢途径和机理提供一定的基础资料。 | 张可 关允 罗鸿兵 陈伟 陈佳 格桑 | 2017 | 环境工程学报2017，11，5： | 1 |
| 6 | 蜡状芽孢杆菌对烟嘧磺隆的降解及降解产物2-氨基-4,6-二甲氧基嘧啶的环境生物毒性显示文摘为明确蜡状芽孢杆菌对烟嘧磺隆的降解及母体和降解产物对环境生物的毒性,采用超高效液相色谱-质谱(UPLC-TQD)联用法分析了蜡状芽孢杆菌对烟嘧磺隆的降解产物,同时参照"化学农药环境安全评价试验准则"方法,分别测定了烟嘧磺隆和主要降解产物2-氨基-4,6-二甲氧基嘧啶对斑马鱼、大型溞和斜生栅列藻3种水生生物的急性毒性。结果表明:经蜡状芽孢杆菌降解后,共检测到4种烟嘧磺隆的降解产物,分别为2-氨基-4,6-二甲氧基嘧啶(Ⅰ)、2-[N-(氨基甲基)氨磺酰基]-N,N-二甲基烟酰胺(Ⅱ)、2-[1-(4,6-二甲氧基嘧啶-2-基)脲基]-N,N-二甲基烟酰胺(Ⅲ)和N-(4,6-二甲氧基嘧啶-2-氨基甲酰基)-1-(甲基亚氨基)甲磺酰胺(Ⅳ),其中2-氨基-4,6-二甲氧基嘧啶(Ⅰ)为主要降解产物,由此推测蜡状芽孢杆菌对烟嘧磺隆的降解主要是通过使其磺酰脲桥上C—N键、C—S键以及吡啶环断裂而实现的。毒性测定结果显示:烟嘧磺隆及主要降解产物Ⅰ对斑马鱼的96 h-LC50值分别为16.95和〉100.0 mg/L,其急性毒性等级均为"低毒";两者对斜生栅列藻的72 h-ErC50值分别为8.070和142.7 mg/L,均为"低毒";对大型溞的48 h-EC50值分别为9.190和51.95 mg/L,分别为"中毒"和"低毒"。研究表明,烟嘧磺隆经蜡状芽孢杆菌降解后,其主要降解产物对3种水生生物的毒性均明显降低。 | 党晶晶 杨冬臣 张哲 王振梅 张金林 | 2018 | 农药学学报2018，20，5： | 1 |
| 7 | 吉林克雷伯氏菌2N3对噻吩磺隆的降解特性及其土壤修复作用显示文摘【目的】研究吉林克雷伯氏菌2N3菌株对噻吩磺隆的降解特性及其对土壤的修复效果,为2N3菌株实际应用奠定基础。【方法】利用HPLC和振荡培养法,研究噻吩磺隆初始质量浓度、接菌量、温度、pH、NaCl体积分数以及土壤是否灭菌情况下,克雷伯氏菌2N3对噻吩磺隆的降解效果。【结果】在无机盐液体培养基中,2N3降解噻吩磺隆的最优条件为:噻吩磺隆初始质量浓度50 mg/L,2N3接菌量为5%(体积分数),pH 7.0,NaCl体积分数为0.3%。在此条件下于30℃、150 r/min恒温振荡培养24 h,噻吩磺隆的降解率可达90.41%。在土壤中,2N3对噻吩磺隆最高降解率可达96.03%。在未灭菌土壤中,2N3对噻吩磺隆的降解速率较灭菌土壤快,说明其能协助土壤微生物共同降解噻吩磺隆。【结论】吉林克雷伯氏菌2N3菌株能有效降解噻吩磺隆,并对噻吩磺隆污染土壤有较好的修复效果。 | 林杨 潘泽群 张金鹏 张浩 | 2021 | 西北农林科技大学学报(自然科学版)2021，49，1： | 1 |
| 8 | 贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)CF57中烟嘧磺隆降解酶的分离与鉴定显示文摘为明确贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)CF57参与降解烟嘧磺隆的关键降解酶,本试验通过降解酶定域试验确定了贝莱斯芽孢杆菌(B.velezensis)CF57中对烟嘧磺隆具有降解作用的酶主要为胞外酶。在此基础上,采用丙酮沉淀法、DEAE-FF阴离子交换层析柱和PAGE法对胞外酶进行分离纯化,并结合水解圈法和高效液相色谱(HPLC)对分离得到的活性组分进行检测,选择其中活性较高的3种降解酶(P3-4、P4-2和P4-4)进行质谱测定。经序列比对,得知这3种降解酶分别为糖磷酸异构酶(P3-4)、亮氨酸氨基肽酶(P4-2)和精氨酸酶(P4-4),其对烟嘧磺隆的酶比活分别为0.0418、0.0368和0.0382μmoL/(min·mg)。该研究结果为进一步深入研究降解酶的酶学特性及代谢机理奠定基础。 | 张晨芳 司贺龙 陈来 梁小菊 张金林 | 2020 | 河北农业大学学报2020，43，4： | 1 |
| 9 | 定向进化提高磺酰脲类除草剂脱毒酯酶SulE的活性显示文摘磺酰脲除草剂脱毒酯酶SulE对噻磺隆活性极高,但对其他磺酰脲类除草剂活性很低,这限制了在磺酰脲除草剂残留污染生物修复和抗磺酰脲除草剂作物培育中的应用价值.利用Escherichiacoli DH10B (ilvG+)对甲磺隆的敏感性为筛选标记,从sulE基因随机突变库中筛选获得了一个酶活性显著提高的突变体mSulE.与野生型相比,突变体mSulE对甲磺隆、甲嘧磺隆、苯磺隆和胺苯磺隆的比酶活分别提高了8.29、8.61、1.50和4.04倍.测序结果表明,突变体mSulE氨基酸序列发生了2处替换,分别为Y81T和S178N.三维结构模拟表明,2个突变位点都在酶活性中心附近,突变体mSulE酶活提高的原因可能是Y81突变为T增加了催化口袋的面积,以及S178突变为N增加了氨基酸残基之间的氢键作用力.综上所述,突变体mSulE对大部分磺酰脲除草剂的活性要高于野生型,在磺酰脲除草剂残留污染生物修复和抗除草剂转基因工程中具有很好的应用前景.(图6表1参30) | 刘斌 杨洲 刘军委 陈乐 彭乾 何健 | 2020 | 应用与环境生物学报2020，26，5： | 0 |
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