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| 1 | 果糖基转移酶AoFT在毕赤酵母中的表达与纯化及其酶学性质研究显示文摘利用基因工程技术方法,将构建的重组质粒pPICZαA-AoFT线性化后,经电转化导入毕赤酵母X33(Pichia pastoris X33)中,构建重组毕赤酵母工程菌pPICZαA-AoFT/X33,实现果糖基转移酶AoFT在毕赤酵母中的表达,进而研究纯化后的果糖基转移酶AoFT的酶学性质.结果表明:pPICZαA-AoFT/X33随发酵时间的增加而快速繁殖,菌体OD600值于发酵时长120 h时达到峰值,此时发酵液胞外总蛋白质量浓度为1.64 mg/mL;纯化后的果糖基转移酶AoFT的比活力为71.4 U/mg,产率达70.6%;PNGase F酶切反应证实纯化后的果糖基转移酶AoFT发生了N-糖基化反应;果糖基转移酶AoFT的最适反应温度为45℃,最适缓冲体系为醋酸钠缓冲液(pH值为4.5~6.0);金属离子Mn2+,Ca2+对果糖基转移酶AoFT具有激活作用,而Al3+,Fe2+,Ni2+,Zn2+和EDTA对果糖基转移酶AoFT具有抑制作用;表面活性剂SDS,吐温20和Triton X-100对果糖基转移酶AoFT的酶活性影响较小,还原剂DTT对果糖基转移酶AoFT的酶活性具有明显的抑制作用,酶抑制剂PMSF低浓度时对果糖基转移酶AoFT的酶活性无显著影响,高浓度时可使酶活性降低;果糖基转移酶AoFT对有机溶剂乙醇、二甲基亚砜、二甲基甲酰胺、正丁醇、正己烷和甲苯具有较强的抗性. | 魏涛 赵彩梦 郏未未 黄申 毛多斌 | 2020 | 轻工学报2020，35，3： | 1 |
| 2 | 离子液体介质中脂肪酶催化合成蔗糖-6-乙酯工艺优化显示文摘分别以脂肪酶为催化剂、蔗糖和乙酸乙烯酯为原料、离子液体[Emim]PF6为反应介质,应用单因素实验和正交实验优化了蔗糖-6-乙酯合成的工艺条件。结果表明,蔗糖-6-乙酯最佳合成条件为:脂肪酶浓度60mg/m L、乙酸乙烯酯和蔗糖摩尔比6∶1、反应体系含水量2%(v/v)、反应温度45℃和反应时间15h,在此条件下,蔗糖-6-乙酯最终产率为89.86%。在最优条件下,脂肪酶重复利用5次,蔗糖-6-乙酯产率仍维持在初始产率50%以上,表现出了良好的稳定性。 | 李明华 孟秀梅 吴金山 朱国廷 | 2016 | 中国食品添加剂2016，0，11： | 1 |
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