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1眼针干预脑缺血再灌注模型大鼠神经功能及相关神经营养因子的表达显示文摘背景:眼针疗法主要是针刺眼球周围、眼眶边缘的穴位,调整气血运行、疏经通络和调和阴阳,现已在临床广泛运用,对缺血性脑血管病等多种疾病疗效显著,但是具体作用机制尚不明确。神经营养因子是一类调控神经元存活、发展和发挥作用的蛋白家族,包括神经营养因子和脑源性神经营养因子等。目的:观察眼针对脑缺血再灌注模型大鼠脑组织神经生长因子、脑源性神经营养因子表达的影响。方法:将54只雄性SD大鼠随机分为3组:假手术组、模型组和眼针组,每组18只。后2组采用线栓法制备大脑中动脉闭塞模型,眼针组于缺血2 h后进行眼针干预,于大鼠眶周2 mm处取穴肝区、上焦区、下焦区和肾区。治疗第3,7,14天进行神经功能评分。治疗第1,2周,免疫组织化学染色检测神经生长因子、脑源性神经营养因子阳性表达,治疗第2周采用TTC染色法检测脑梗死体积。结果与结论:1眼针组治疗后第1,2周神经生长因子、脑源性神经营养因子阳性表达细胞明显高于模型组(P<0.05),与治疗后第1周相比,第2周数量下降。2治疗后第7,14天眼针组神经功能评分明显降低,与模型组比较差异有显著性意义(P<0.05),但仍高于假手术组(P<0.05);3治疗后第2周,眼针组和模型组大鼠脑梗死体积均明显大于假手术组(P<0.01),但眼针组脑梗死体积明显小于模型组(P<0.05);4结果证实,眼针干预可能是通过增强脑缺血后神经生长因子和脑源性神经营养因子的表达,从而改善神经功能,缩小脑梗死体积,对缺血性脑损伤具有一定的保护作用。刘慧影 王鹏琴 边颖 王金春 魏颖鸿 2016中国组织工程研究2016,20,18:13
2Acellular allogeneic nerve grafting combined with bone marrow mesenchymal stem cell transplantation for the repair of long-segment sciatic nerve defects:biomechanics and validation of mathematical models显示文摘We hypothesized that a chemically extracted acellular allogeneic nerve graft used in combination with bone marrow mesenchymal stem cell transplantation would be an effective treatment for long-segment sciatic nerve defects.To test this,we established rabbit models of 30 mm sciatic nerve defects,and treated them using either an autograft or a chemically decellularized allogeneic nerve graft with or without simultaneous transplantation of bone marrow mesenchymal stem cells.We compared the tensile properties,electrophysiological function and morphology of the damaged nerve in each group.Sciatic nerves repaired by the allogeneic nerve graft combined with stem cell transplantation showed better recovery than those repaired by the acellular allogeneic nerve graft alone,and produced similar results to those observed with the autograft.These findings confirm that a chemically extracted acellular allogeneic nerve graft combined with transplantation of bone marrow mesenchymal stem cells is an effective method of repairing long-segment sciatic nerve defects.Ya-jun Li Bao-lin Zhao Hao-ze Lv Zhi-gang Qin Min Luo 2016Neural Regeneration Research2016,11,8:8
3Repair of peripheral nerve defects with chemically extracted acellular nerve allografts loaded with neurotrophic factors-transfected bone marrow mesenchymal stem cells显示文摘Chemically extracted acellular nerve allografts loaded with brain-derived neurotrophic factor-transfected or ciliary neurotrophic factor-transfected bone marrow mesenchymal stem cells have been shown to repair sciatic nerve injury better than chemically extracted acellular nerve allografts alone, or chemically extracted acellular nerve allografts loaded with bone marrow mesenchymal stem cells. We hypothesized that these allografts compounded with both brain-derived neurotrophic factor- and ciliary neurotrophic factor-transfected bone marrow mesenchymal stem cells may demonstrate even better effects in the repair of peripheral nerve injury. We cultured bone marrow mesenchymal stem cells expressing brain-derived neurotrophic factor and/or ciliary neurotrophic factor and used them to treat sciatic nerve injury in rats. We observed an increase in sciatic functional index, triceps wet weight recovery rate, myelin thickness, number of myelinated nerve fibers, amplitude of motor-evoked potentials and nerve conduction velocity, and a shortened latency of motor-evoked potentials when allografts loaded with both neurotrophic factors were used, compared with allografts loaded with just one factor. Thus, the combination of both brain-derived neurotrophic factor and ciliary neurotrophic factor-transfected bone marrow mesenchymal stem cells can greatly improve nerve injury.Yan-ru Zhang Ka Ka Ge-chen Zhang Hui Zhang Yan Shang Guo-qiang Zhao Wen-hua Huang 2015Neural Regeneration Research2015,10,9:6
4骨髓间充质干细胞在节段性神经损伤局部微环境中的迁移和转归显示文摘背景:面对周围神经损伤修复这一难题,大量研究已证实组织工程干细胞修复方法的可行性,但干细胞的修复作用机制尚不明确。目的:探索骨髓间充质干细胞在损伤神经局部的迁移过程及对损伤神经的修复效果,并着重观察骨髓间充质干细胞在神经局部微环境中的分化及转归。方法:选取8周龄雄性SD大鼠,使用液氮冰冻坐骨神经,制造节段性神经损伤模型。将36只成功造模的大鼠随机分成3组(n=12),每组按添加细胞的方式不同具体分组如下:单纯冰冻损伤神经组,损伤神经内部注射细胞组,损伤神经周围添加细胞组。造模前及植入细胞后4,8,12周测量坐骨神经功能指数;植入细胞后12周,分别对小腿三头肌进行电生理学、湿重恢复率、收缩力恢复率检测以及Masson染色,损伤段神经组织进行免疫荧光染色,损伤远端神经进行甲苯胺蓝染色。结果与结论:植入细胞后4,8,12周各组坐骨神经功能指数差异无显著性意义,但损伤神经内部注射细胞组和损伤神经周围添加细胞组均高于单纯损伤神经组,并且损伤神经内部注射细胞组略高于损伤神经周围添加细胞组;各组电生理检测结果显示,2个细胞治疗组复合肌肉动作电位的潜伏期和波幅差异无显著性意义,两组的潜伏期均值较单纯损伤神经组缩短、波幅均值较单纯损伤神经组显著升高(P<0.05);2个细胞治疗组肌纤维横截面积均高于单纯损伤神经组;免疫荧光染色结果显示,在植入细胞12周后,2个细胞治疗组均能观察到Nestin、S100、P0蛋白的表达。结果表明在节段性损伤的神经周围添加骨髓间充质干细胞不仅可以迁移到损伤神经内部参与神经修复,而且能够向许旺细胞和神经干细胞方向分化,达到与直接向神经内部注射干细胞类似的修复效果。周雪峰 任志午 陆明 王玉 孙振 彭江 2015中国组织工程研究2015,19,28:4
5脱细胞神经支架联合干细胞构建组织工程神经修复坐骨神经缺损的meta分析显示文摘背景:研究表明,脱细胞神经支架不仅具有天然神经的空间三维结构,而且具有低免疫原性,但对于长段神经缺损的修复效果仍不理想。为此,有学者将脱细胞神经支架复合种子细胞构建组织工程神经,以提高其治疗效果。目的:系统评价脱细胞神经支架联合间充质干细胞或许旺细胞移植修复大鼠坐骨神经缺损的疗效。方法:检索PubM ed、The Cochrane Library、EMbase、CNKI、WanF ang和VIP数据库,查阅关于脱细胞神经支架联合间充质干细胞或许旺细胞修复大鼠坐骨神经缺损的随机对照实验,检索时限均为建库至2016年7月。由3名研究员按纳入和排除标准独立筛选文献、提取数据和评价文献的方法学质量,采用Review Manger5.3软件进行meta分析。结果与结论:最终10篇文献纳入研究,共计252只大鼠。Meta分析结果显示:(1)脱细胞神经支架联合间充质干细胞或许旺细胞组的坐骨神经功能指数均优于单纯脱细胞神经支架组:2周[SMD=2.73,95%CI(1.92,3.54),P<0.000 01],4周[SMD=4.57,95%CI(3.43,5.70),P<0.000 01],6周[SMD=1.62,95%CI(0.18,3.06),P=0.03],8周[SMD=4.90,95%CI(2.96,6.84),P<0.000 01];(2)术后12周脱细胞神经支架联合间充质干细胞或许旺细胞组神经传导速度、潜伏期、振幅优于脱细胞神经支架组:神经传导速度[SMD=1.39,95%CI(0.99,1.78),P<0.000 01],潜伏期[MD=-0.98,95%CI(-1.19,-0.76),P<0.000 01],振幅[SMD=1.23,95%CI(0.62,1.85),P<0.000 1];(3)脱细胞神经支架联合间充质干细胞或许旺细胞组髓鞘厚度均优于单纯脱细胞神经支架组:术后8周髓鞘厚度[MD=0.14,95%CI(0.07,0.21),P<0.000 1],术后12周髓鞘厚度[SMD=1.85,95%CI(1.63,2.08),P<0.000 01],术后12周有髓神经纤维数[SMD=3.59,95%CI(2.63,4.55),P<0.000 01];(4)术后8周脱细胞神经支架联合间充质干细胞或许旺细胞组腓肠肌湿重优于单纯脱细胞神经支架组[SMD=4.22,95%CI(2.40,6.03),P<0.000 01];(5)当前证据表明,脱细胞神经支架联合间充质干细胞或许旺细胞治疗大鼠坐骨神经缺损较单纯脱细胞神经支架更有助于神经再生和功能恢复。受纳入文献质量的限制,以上结论需更高质量、更大样本的随机对照实验加以验证。向飞帆 阳运康 谭小琦 魏代清 杨琨 孙远林 周举 2017中国组织工程研究2017,21,22:3
6组织工程神经联合川芎嗪移植修复大鼠坐骨神经缺损显示文摘目的观察组织工程神经联合川芎嗪移植修复大鼠坐骨神经缺损的效果。方法55只成年SD大鼠按随机数字表法分为4组,A、B、C组各15只,D组10只,实验侧均为右后肢坐骨神经。10g/L戊巴比妥钠腹腔注射麻醉后,显露坐骨神经,从梨状肌下缘0.5cm处切除神经1.5cm,分别用4种移植物桥接神经缺损:去细胞异体神经种植神经干细胞(NSCs)在含川芎嗪培养液中培养1周构成组织工程神经(A组)、去细胞异体神经种植NSCs在普通培养液中培养1周构成组织工程神经(B组)、去细胞异体神经(C组)、自体神经(D组)。术后每天A组术侧注射川芎嗪液,B、C、D组注射等体积9g/L等渗盐水,连续注射12周至实验结束。通过术后2周行坐骨神经功能指数(SFI)测定、神经电生理检测、免疫荧光、免疫组化检测;术后12周行SFI测定、神经电生理检测、免疫荧光、免疫组化、辣根过氧化物酶(HRP)逆行示踪、再生神经纤维检测、透射电镜、腓肠肌湿重等指标观察神经修复情况。结果术后2周各组SFI测定和电生理检测结果差异无统计学意义;免疫荧光A、B组均可见大量强荧光,C组未见荧光细胞;免疫组化A、B组以巢蛋白阳性细胞为主。术后12周,A组SFI为-17.52±2.41,B组为-25.74±2.85,C组为-36.12±3.41,D组为-15.87±2.26;A组较B、C组差异有统计学意义(P〈0.05),与D组差异无统计学意义(P〉0.05)。A组神经传导速度为(9.43±0.40)m/s,B组为(7.76±0.31)m/s,C组为(5.87±0.67)m/s,D组为(10.16±0.39)m/s;A组较B、C组差异有统计学意义(P〈0.05),与D组差异无统计学意义(P〉0.05)。NSCs能在体内存活、迁移并分化为神经元和胶质细胞。HRP标记的细胞数A组为(885.40±19.91)个,B组为(684.57±38.37)个,C组为(390.33±43.41)个,D组为(941.67±32.54)个;A、D组较B、C组差异有统计学意义(P〈0.05)。甲苯胺蓝染色示A组移植段再生神经纤维较多,以有髓神经纤维为主。结论去细胞异体神经种植NSCs在含川芎嗪培养液中培养构成组织工程神经,能有效修复大鼠坐骨神经缺损,促进周围神经再生及下肢运动功能的恢复。向飞帆 阳运康 2016中华创伤杂志2016,32,3:0
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