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| 1 | 小麦印度腥黑穗病菌的分子检测显示文摘根据GenBank中登录Tilletia属的20个种的核糖体转录间隔区(ITS)序列差异设计1对引物T1/T2,可以特异地从T.indica和T.wallceri菌株中扩增到一条450bp左右的条带,而从其他供试菌株中不能扩增出条带,表明该对引物可以将这二个种与Tilletia其他种区分开。进一步根据T.indica和T.walked的线粒体DNA序列的差异设计一对引物M1/M2,只能特异地从T.indica DNA中扩增到一条250bp左右的条带,表明该对引物可以将T.indica与T.walked区分开。利用上述2对引物分别与ITS区通用引物ITS1/ITS4.和线粒体引物Ti-1/Ti4组合建立套式PCR检测体系,能够直接将T.indica与其他相似或相关种区分开,且灵敏度可达1个冬孢子。此外,还观察到在反应体系中加入适量的(NH4)2SO4对PCR反应具有增效作用,可以提高检测灵敏度。上述结果提示建立的套式PCR反应体系可望能应用于口岸对T.indica的检疫。 | 张竞宇 张正光 王源超 郑小波 | 2004 | 高技术通讯2004，14，1： | 10 |
| 2 | 多年生黑麦草中小麦矮腥黑穗病菌PCR检测方法的建立显示文摘寄生于多年生黑麦草的Tilletia属腥黑粉菌共有4种,即小麦矮腥黑穗病菌Tilletia controversa(TCK)、黑麦草腥黑粉病菌T.lolii、T.vankyi、黑麦草粒腥黑穗病菌T.walkeri。本研究分析了黑麦草上冬孢子形态非常相似的3种腥黑粉菌的DNA序列差异,设计了TCK的特异引物,成功建立了TCK菌丝基因组DNA的特异PCR检测方法和冬孢子的套式特异PCR检测方法。 | 黄国明 罗加凤 廖芳 刘跃庭 | 2008 | 植物检疫2008，22，3： | 6 |
| 3 | 黑麦草腥黑穗病菌的快速鉴定显示文摘从进境美国黑麦草种子中发现一种类似小麦印度腥黑穗病菌 (Tilletiaindica )的冬孢子。选取小麦印度腥黑穗病菌的特异性引物Tin3/Tin4和黑麦草腥黑穗病菌 (T .walkeri)的特异性引物Tin11/Tin4以及两者的通用引物H4 /H7、H11/H12对样品中的冬孢子进行套式PCR扩增 ,检出该批样品中含有黑麦草腥黑穗病菌 (T .walkeri)。检测灵敏度为 3个冬孢子 ,检测时间约为 6h。与常规检测方法相比 ,工作效率至少提高了 6倍。 | 吴翠萍 吴新华 王良华 徐金祥 粟寒 丁国云 安榆林 | 2004 | 检验检疫科学2004，14，1： | 2 |
| 4 | 进境美国小麦中黑麦草腥黑穗病菌的检测和鉴定显示文摘从进境美国小麦洗涤液中发现一种类似小麦印度腥黑穗病菌的冬孢子,冬孢子大小为25.0~33.8(29.5±2.3)μm,球形至近球形,淡黄褐色至暗红褐色,半透明至不透明,外胞壁具深褐色疣状突起,突起表面观为锥形至平截状,有时呈不完全脑纹状,外被淡色透明胶质鞘。冬孢子处理后经通用引物Til1/Til4和U2/U10扩增,其扩增产物用黑麦草腥黑穗病菌Tilletiawalkeri的特异性引物W1/W4再次扩增可以得到760bp的产物,产物测序得到的序列和GenBank中黑麦草腥黑穗病菌菌株YRG-001(AF218063)的序列相似性为99%(717/719),和GenBank中小麦印度腥黑穗病菌菌株Bpop(AF218060)的序列相似性为96%(694/719)。实时荧光检测的结果表明黑麦草腥黑穗病菌的探针TWAL能得到阳性扩增曲线。根据冬孢子形态特征、PCR分析、实时荧光检测和序列分析的结果,将这种腥黑穗病菌冬孢子鉴定为黑麦草腥黑穗病菌(T.walkeri)。 | 田利华 易建平 周国梁 周业琴 印丽萍 周而勋 | 2006 | 植物检疫2006，20，S1： | 1 |
| 5 | 进境小麦中沙地牧草腥黑粉菌的鉴定显示文摘从上海口岸进境的澳大利亚小麦中发现一种类似小麦印度腥黑粉病菌的腥黑粉菌冬孢子,对该菌冬孢子进行了形态学特征和PCR检测,根据结果,将这种冬孢子鉴定为沙地牧草腥黑粉菌Tilletiaehrhartae;本研究设计了T.ehrhartaea的特异引物Eh2/Eh4,结合引物Till/Til4建立了T.ehrhartae的套式PCR检测方法。 | 刘素萍 易建平 周国梁 叶军 印丽萍 | 2006 | 植物检疫2006，20，1： | 1 |
| 6 | 面粉中小麦印度腥黑穗病菌的检疫鉴定显示文摘面粉中小麦印度腥黑穗病菌检疫的关键要点是分离孢子。为此 ,本文就如何从面粉样品中简便、快捷地分离与获得干净冬孢子进行了研究 ,并根据获得孢子多少与难易情况 ,采用 3 0个孢子直径统计法和套式PCR检测法。与常规方法相比 ,这 2种方法可以使检测时间缩短 4~ 10倍。在样品中孢子极少的情况下 ,采用套式PCR检测方法 ,仅 2个孢子就能作出定性判断 ,可以有效地避免小麦印度腥黑穗病菌漏检 ,进而提高口岸疫情检出率。 | 吴翠萍 王良华 粟寒 吴新华 徐金祥 王达龙 丁国云 安榆林 | 2004 | 植物检疫2004，18，2： | 0 |
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