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| 1 | 谷氨酸棒杆菌基因缺失菌株的定点构建显示文摘通过目标基因内部缺失片段的获得以及DNA重组交换等技术的有效运用 ,在氨基酸工业重要生产菌谷氨酸棒杆菌中 ,成功地定点构建了两个目标研究基因的单基因缺失菌株和双基因缺失菌株 ,并通过了PCR和测序等方法的分析验证。 | 阮红 Bernhard Eikmanns | 2002 | 微生物学报2002，42，4： | 8 |
| 2 | 插入突变在功能基因组学研究中的应用显示文摘插入突变库的构建是功能基因组学研究的一个重要内容,可为确定基因的功能提供最直接的证据。构建插入突变库的方法有T-DNA插入突变、转座子插入突变和质粒介导的插入突变。本文分别介绍三种方法的原理及其在功能基因组学研究中的应用和研究进展。 | 孟凡立 张卫国 陈庆山 | 2006 | 生物信息学2006，4，1： | 5 |
| 3 | amrG1基因在谷氨酸棒杆菌乙酸活化中的作用显示文摘谷氨酸棒杆菌Corynebacteriumglutamicum可以利用乙酸为碳源和能源进行生长.乙酸代谢中涉及乙酸活化的两个酶为磷酸转乙酰酶PTA和乙酸激酶AK,它们是由pta-ack操纵子经诱导表达产生的.采用转座子挽救法,我们从调控突变株C.glutamicumG25中获得了amrG1和amrG2两个目标基因.经分析鉴定,amrG1基因(NCBIGenBank接受号为AF532964)可能参与乙酸代谢调控,编码作用于pta-ack操纵子的一个调控因子.该调控因子基因序列全长732bp,开放阅读框含有243个氨基酸,分子量约为27kD.通过基因定点缺失和过量表达技术,在谷氨酸棒杆菌野生型菌株中分别构建了amrG1基因缺失菌株和表达菌株,并研究了它们在含有葡萄糖和/或乙酸不同碳源的基本培养基上生长时产生的PTA和AK酶活性特征.酶活性测定结果发现其中的amrG1基因缺失菌株和表达菌株存在着与野生型菌株不同的一系列酶学特征,分析显示:以野生型菌株为对照,amrG1基因缺失菌株在含有葡萄糖碳源的培养基上生长时表现出较高的PTA和AK酶活性,并且在葡萄糖和乙酸两种碳源上生长时表现出与乙酸碳源上生长时几乎同样的PTA和AK酶活性;amrG1基因过量表达对葡萄糖碳源上生长产生的PTA和AK酶活性有一定程度的抑制,即表现出与基因缺失情况相反的调控效应.根据以上结果分析。 | 阮红 R.Gerstmeir S. Schinke B.J. Eikmanns | 2004 | 中国科学(C辑)2004，34，3： | 1 |
| 4 | PNP降解相关基因温敏突变株的分离及其特性研究显示文摘通过接合转移将质粒pSC123上的转座子Tn5随机插入到DLL-E4基因组DNA中,从大约8,000个突变株中得到1株温度敏感型突变株MT54。根据转座子上的已知序列设计引物以MT54基因组DNA为模板进行PCR扩增,证实MT54的染色体中有转座子插入。MT54在30℃条件下能够以对硝基苯酚(p-nitrophenol,PNP)为唯一碳源生长,但在37℃不能生长。格里斯试色剂法检测NO_2^-的生成情况进一步证明了MT54的这种特性。通过30℃和37℃两种温度条件下MT54和原始出发菌株DLL-E4对PNP和对苯二酚降解情况的比较,推测温敏突变位点可能发生在与PNP降解相关的基因中。 | 邓海华 李晓丹 曹慧 王世明 黄婷婷 崔中利 | 2007 | 微生物学通报2007，34，1： | 0 |
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