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| 1 | 一株产低温碱性蛋白酶嗜冷海洋细菌YS-9412-130的分离和培养条件研究显示文摘自海水贝类中取样 ,经分离培养基和酪蛋白培养基复合培养 ,用检测蛋白酶产生水解圈和Folin-酚碱性蛋白酶活性测定相结合的方法从 10 0 0多份样品中初步筛到了产碱性蛋白酶活力高、性能优良的菌株 YS- 94 12 - 130。对其初步研究结果表明 ,该菌只能利用有机氮源生长 ;在接近自然海水盐度、温度 2 0℃、p H在 7.0~ 9.0条件下 。 | 孙谧 王跃军 张云波 洪义国 阎晓玲 陈毓桢 王春波 刘晓萍 | 2000 | 海洋水产研究2000，21，4： | 28 |
| 2 | 黄海黄杆菌YS-9412-130低温碱性蛋白酶性质鉴定显示文摘对黄海黄杆菌 YS- 94 12 - 130菌株产低温碱性蛋白酶的理化性质研究表明 ,该酶由 2 56个氨基酸组成 ,分子量为 330 0 0 Dar,等电点 p I为 9.4 5,米氏常数 Km为 5× 10 -3 m mol/ L;酶的最适作用p H范围为 9.5~ 10 .5,最适作用温度 30℃ ,具有一定的抗氧化稳定性。Ca2 +、Mn2 对酶有激活作用 ,而 Hg2 +、Ag+对酶有抑制作用。 DFP、NBS严重抑制酶的活性 ,而同时该酶也能被 EDTA抑制。结果表明该低温碱性蛋白酶为一新型的丝氨酸蛋白酶。 | 孙谧 修朝阳 王跃军 陈丽芳 张云波 洪义国 阎晓玲 韩艳波 李晶 陈良 | 2001 | 海洋水产研究2001，22，2： | 21 |
| 3 | 海洋微生物低温酶特性及其在工业中的潜在用途显示文摘依据近年来关于低温酶的研究资料 ,讨论了低温酶的研究现状 ,对产低温酶海洋细菌的种类、嗜冷特性、适应低温的机制以及对其在工业上的应用作一评述。 | 孙谧 洪义国 李勃生 修朝阳 | 2002 | 海洋水产研究2002，23，3： | 21 |
| 4 | 极区低温海洋细菌及其产酶情况的初步研究显示文摘通过对大量极区低温海洋菌株的分离、筛选及进一步的生理生化特性研究 ,获得 1株最适生长温度为 15℃、生长温度上限为 35℃、产蛋白酶及多种多糖水解酶的耐冷细菌。该菌过氧化氢酶为阳性 ,具有弱嗜盐性 ;蔗糖、可溶性淀粉是有利于菌株生长的碳源物质 ,而酵母膏则是效果最佳的氮源物质。该菌株所产蛋白酶的最适作用温度为 5 5℃ ,而淀粉酶、琼脂酶及纤维素酶的最适作用温度皆为 35℃。 | 曾胤新 陈波 | 2002 | 生物技术2002，12，1： | 19 |
| 5 | 斑节对虾病原菌胞外产物的致病性研究显示文摘由养殖濒死虾体内分离的副深血弧菌(2019^#)、溶藻弧菌(4302^#)和嗜水气单力(1003^#)培养液中分别撮了上产物,测定了酶成分,定量分析了蛋白酶及磷酸酯酶的活性,用细菌胞外产物粗提液对斑节对虾进行致死试验,戊二醛固定致死对虾的肚组织,电镜观察了斑节对虾肝组织的超微病变,初步探讨了三株细菌胞外产物诱发虾病的病理。 | 张朝霞 王军 苏永全 幺久刚 周胜利 鄢庆枇 | 2000 | 海洋学报2000，22，5： | 17 |
| 6 | 产低温碱性蛋白酶海洋适冷菌SY的筛选显示文摘从连云港海域、港口、远洋捕捞船及鱼市等地采集的海水和各类海鱼、贝类等样品中分离到217株产蛋白酶的细菌,并从中得到1株产低温碱性蛋白酶的海洋适冷细菌—SY。研究表明,该菌株最适生长温度和最适产酶温度均在15℃左右,0℃下仍可生长;具有一定的耐盐性和嗜盐性,无盐条件不能生长,在3%的NaCl盐浓度时,生长达到最高峰;最适生长和最适产酶pH均为8.0;SY菌所产的蛋白酶可能为一种丝氨酸蛋白酶,酶最适作用温度为50℃,最适作用pH为9.0;酶的热稳定性差,50℃保温20min,酶活下降40%。 | 陈静 王淑军 黄炜 牛天贵 陆兆新 | 2005 | 微生物学杂志2005，25，4： | 14 |
| 7 | 嗜冷酶及其工业应用显示文摘 | 史贤俊 林影 | 2001 | 生命的化学2001，21，3： | 12 |
| 8 | 低温微生物的研究及应用显示文摘低温微生物的分布非常广泛,研究应用较多的主要是嗜冷菌和耐冷菌。由于长期的进化,低温微生物在膜脂组成和蛋白质结构等方面形成了独有的结构特点。同时,还可合成冷休克蛋白以适应低温。低温微生物及其代谢产物特别是嗜冷酶已开始在环保、纺织和食品工业等领域得到广泛应用。 | 贾贞 王廷璞 安建平 顾克东 | 2003 | 天水师范学院学报2003，23，5： | 12 |
| 9 | 斑节对虾病原菌河流弧菌(Ⅰ型)的研究显示文摘从患“红体综合症”的斑节对虾 (Penaeusmonodon)体内分离到一株细菌 6 10 1号 ,回归感染证实了其致病性 ,经形态观察以及生理生化特性检测 ,鉴定为河流弧菌 (Ⅰ型 ) .提取河流弧菌 6 10 1号胞外产物 ,分析其酶成分 ,定量检测了胞外产物中蛋白酶、酸性磷酸酯酶和碱性磷酸酯酶的活性 ,将提取的河流弧菌 6 10 1号胞外产物对健康斑节对虾进行致死试验 ,证实其胞外产物所具有的毒性甚于该菌的菌悬液 .电镜观察致死对虾肝组织细胞严重受损 ,从细胞病理方面进一步证实了病原菌胞外产物的致病性 . | 张朝霞 苏永全 王军 鄢庆枇 马梁 | 2000 | 中山大学学报(自然科学版)2000，39，z1： | 11 |
| 10 | 一株北极海洋细菌及其蛋白酶的生理生化特征研究显示文摘从北极海洋环境中筛选分离出一株产胞外碱性蛋白酶的革兰氏阴性杆菌 Ar/ W/ b/ 75°2 5′ N/ 1。该菌能在 7~ 30℃范围内生长 ,并且在 30℃条件下生长良好 ,但不能在 40℃条件下生长。该菌在 0 .5%~ 1 0 % Na Cl的盐浓度范围内能良好生长 ,表现出一定的嗜盐性。葡萄糖、蔗糖及可溶性淀粉等碳源物质可被该菌株利用以供生长之需 ,其中以葡萄糖最佳。氮源物质中 ,蛋白胨是最有利于菌株生长、产酶的有机氮源 ,而 NH4 NO3则是效果最好的无机氮源。对该菌蛋白酶的酶学特性研究表明 :所产胞外蛋白酶占其蛋白酶总量的 75.7%左右 ;蛋白酶反应的最适温度为40℃ ,酶活力在温度不高于 40℃条件下保持稳定 ;该菌蛋白酶具有较宽的 p H活性范围 ,在 p H7~ 1 1均表现出较高酶活力 ,其最适 p H在 | 曾胤新 蔡明红 陈波 何剑锋 | 2000 | 极地研究2000，12，4： | 11 |
| 11 | 海洋微生物酶的研究概况显示文摘 | 郭琪 王静雪 | 2005 | 水产科学2005，24，12： | 11 |
| 12 | 黄海黄杆菌YS-9412-130低温碱性蛋白酶的制备工艺研究显示文摘对黄海黄杆菌所产低温碱性蛋白酶的工业生产技术和电泳纯级试剂酶的分离纯化工艺进行了实验。按照设计的中试生产技术 ,每吨发酵液可得酶粉 2 0 kg,粗酶比活大于 2 0× 10 4 U/ g;同时运用一系列纯化手段和条件 ,制备出电泳纯级试剂酶 ,纯化过程蛋白回收率在 7%左右 ,活性回收率在60 %以上 ,比活性也稳定在 1.9× 10 3U/ mg以上 ,激光灰度扫描结果试剂酶纯度大于 99% ,可以作为试剂酶满足进一步生物学研究和实际应用。其产品质量和制造工艺均达到了中试放大规模的要求。 | 王跃军 孙谧 洪义国 张云波 沙珍霞 阎晓玲 苗小庆 姜展军 | 2001 | 海洋水产研究2001，22，2： | 11 |
| 13 | 黄海黄杆菌YS-9412-130产酶发酵条件的优化显示文摘以产低温碱性蛋白酶的黄海黄杆菌 YS- 94 12 - 130突变株 SW2 - 10 4为培养菌株 ,进行碳源、氮源、无机盐、起始 p H值、培养时间、接种量和接种龄等发酵条件的优化实验。实验结果证明 ,在以1%葡萄糖为碳源 ,以 3.5%豆饼粉为氮源 ,无机盐 :0 .4 % Na2 HPO4 、0 .0 3% KH2 P0 4 、0 .0 2 % Mg SO4 、0 .1% Na2 CO3、0 .2 % Ca Cl2 ,起始 p H值 7.0 ,接种 12 h种龄的种子 4 % ,2 0℃、2 50 r/ min的条件下在旋转摇床中培养 36h,菌株产酶活性最高。 | 张云波 孙谧 王跃军 洪义国 阎晓玲 田杰 谢峰 姜展军 | 2000 | 海洋水产研究2000，21，4： | 10 |
| 14 | 海洋细菌产低温碱性蛋白酶菌株的筛选研究显示文摘采集连云港黄海海域的各类海鱼和贝类及海水等样品,采用富集培养、干酪素培养基及水解酪蛋白试验分离产蛋白酶的菌株。结果表明从海鱼、海贝等样品中能得到产低温碱性蛋白酶的菌株;干酪素分离培养基是较好的筛选培养基,产酶菌株都能在干酪素培养基上产生透明圈;水解酪蛋白试验可对菌株的产酶情况进行定性研究,酶活较高的菌株都能产生较大的水解圈。干酪素分离培养基配合水解酪蛋白试验进行产低温碱性蛋白酶菌株的筛选,可以提高筛选效率。 | 吕明生 陈静 王淑军 陆兆新 | 2004 | 江苏食品与发酵2004，，1： | 9 |
| 15 | YS-80-122海洋低温碱性蛋白酶的性质显示文摘碱性蛋白酶是一种最重要的工业用酶 ,广泛应用于洗涤、食品、皮革和丝绸行业。海洋低温碱性蛋白酶是一种应用我国海洋嗜极微生物黄海黄杆菌 (YS - 80 - 12 2 )代谢产物并通过现代生物工程手段开发出的一类新型酶。通过 6 0 0 0转 /分离心 (4℃ ) ,收集 (30 % - 6 5 % )硫酸铵沉淀 ,透析后等电聚焦制备分离 (12W) ,并经凝胶S - 2 0 0过滤 ,获得纯品经SDS -PAGE聚丙烯酰胺凝胶和C8HPLC图谱已达到电泳纯。其分子量为 4 9,32 0Dal,等电点为 8.5。建立酶活—温度—pH方程与模型 (r2 >0 .9) ,可求出其最适温度为 30℃ ,最适 pH为 9.5 ,低温 (T≤30℃ )和低 pH(pH≤ 8)对保持其稳定性有利。经试验该酶与大多数金属离子和增稠剂及表面活性剂适应性良好。Pb2 +、Ag+、Cu2 +对其有抑制作用 ,EDTA对其有强烈抑制作用。该酶性质与以往发现碱性蛋白酶性质不同 ,属于一种新型海洋酶。 | 王宇婧 张曼平 孙谧 王跃军 谢红国 陈春光 | 2004 | 海洋湖沼通报2004，，1： | 9 |
| 16 | 一株产蛋白酶南极耐冷细菌的筛选及研究显示文摘从南极中山站地区分离到 1株产胞外酸性蛋白酶的革兰氏阴性杆菌。该菌能在 7℃、2 0℃及30℃生长并产酶 ;其最适生长温度在 2 0℃左右 ,不耐盐。碳源物质中 ,葡萄糖对菌株的生长有利 ,但对蛋白酶的生成影响不大 ;氮源物质中 ,蛋白胨对菌株的生长及蛋白酶的生成效果最好 ,而 (NH4 ) 2 SO4 则是效果最好的无机氮源。该菌所产胞外蛋白酶占其蛋白酶总量的 83 2 % ,蛋白酶反应的最适温度为 4 0℃ ,最适pH为 5;酶活力在 35℃以下保持稳定。直接以酪蛋白液为培养基、在 2 0℃条件下对该菌进行摇瓶培养 ,6d后菌液浓度及产酶量皆到达高值并基本保持稳定 ;而以LB培养基 (Luria -Bertani培养基 )在相同条件下培养该菌 ,3d后菌液浓度即到达高值并基本保持稳定 ,酶活力则在 2d后到达高值。 | 曾胤新 蔡明宏 陈波 何剑锋 | 2001 | 生物技术2001，11，2： | 7 |
| 17 | 产碱性蛋白酶的海洋适冷细菌CHS的初步研究显示文摘从连云港海域、港口、远洋捕捞船及鱼市等地采集的海水和各类海鱼、贝类等样品中分离得到一株产碱性蛋白酶的海洋适冷细菌CHS。研究表明,CHS最适生长温度和产酶温度均在15℃左右,0℃下仍可生长;具有一定的耐盐性和嗜盐性,无盐条件下不能生长,在质量分数为5%的NaCl中生长最好;最适生长pH为8.0,最适产酶pH为9.0。 | 陈静 王淑军 潘建梅 许冰 牛天贵 | 2004 | 淮海工学院学报(自然科学版)2004，13，4： | 5 |
| 18 | 产3-脱氧葡糖醛酮代谢酶微生物的研究显示文摘从海洋细菌中筛选到一株产3-脱氧葡糖醛酮代谢酶活力较高的菌株Fs-4—C-3,并对其进行了最适产酶条件的研究。实验证明:以鱼肉蛋白胨为氮源、蔗糖为碳源,在培养基起始pH值为7.8~8.0,温度为28℃,盐度为5%的情况下,培养96h,产酶最高。3-DG可以诱导产酶。 | 梁智群 罗虹 李湘萍 庞宗文 黄时海 | 2000 | 微生物学通报2000，27，5： | 5 |
| 19 | 黄杆菌属中的一个新种显示文摘由海产贝类中分离到一菌株 YS- 94 12 - 130 ,为革兰氏阴性短杆菌、末端圆、有鞭毛、不能滑行运动、大小为 0 .4~ 0 .7μm× 1.0~ 1.5μm,裂殖生殖 ,不生成芽孢 ,胞内无多 -β-羟基丁酸颗粒。菌落光滑 ,黄色、半透明 ,边缘完整。其色素无荧光 ,含类胡萝卜素 ,其正己烷提取液经光谱测定最大吸收峰为4 50 nm。该菌生长的温度范围为 0~ 2 5℃ ,最适为 18~ 2 2℃ ,最高 2 5℃ (在 2 5℃生长极弱或几乎不生长 )。此菌株于 p H7.0~ 9.0能生长 ,最适 p H为 7.5,耐 6% Na Cl,80μg/ m1的链霉素或 80μg/ ml的氨卞青霉素。 YS- 94 12 - 130菌株为好气菌 ,严格的有氧呼吸代谢 ,过氧化氢酶、氧化酶阳性和磷酸酶阳性 ,利用多种糖、水解淀粉但不分解纤维素、琼脂和几丁质。水解干酪素、胨化石蕊牛奶最后变碱。液化明胶试验阴性 ,还原硝酸盐 ;不产 H2 S和吲哚 ;MR和 V.P.试验阴性 ;YS- 94 12 - 130菌株 DNA中 G+C含量为 32 .2 mol%。该菌株的特征符合黄杆菌属的特征 ,但与此属中的其他种比较又有显著的差别 ,因此将其定为黄杆菌属一新种 ,命名为黄海黄杆菌 ( Flavobacterium yellowsea sp.nov)。 | 孙谧 张云波 洪义国 王跃军 邱秀宝 董美娜 桑玉泉 王春波 | 2000 | 海洋水产研究2000，21，4： | 4 |
| 20 | 北极耐冷假交替单胞菌的培养温度对其胞外蛋白酶合成的影响显示文摘从北极楚科奇海水中分离筛选到2株产蛋白酶耐冷细菌BSw20308及BSw20353,经分子鉴定为假交替单胞菌属。这2株菌虽存在较近亲缘关系,16SrDNA序列相似性为98%,但属于不同种,表型方面也存在差异。酶谱分析显示,此2株菌的胞外产物中存在至少3种蛋白水解活性组分。培养温度的变化对这2株菌胞外蛋白水解活性组分的生成具有不同的影响效果,表明极地海洋细菌可能在酶学水平上通过酶的种类与活力的调整和采取不同的策略来适应环境温度的变化。 | 曾胤新 李会荣 俞勇 陈波 | 2007 | 高技术通讯2007，17，5： | 3 |
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