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| 1 | 我国蚊媒研究概况显示文摘蚊类不仅吸血骚扰,而且传播多种严重疾病。本文就我国疟疾媒介鉴定及基因特征,登革热媒介白纹伊蚊基因特征与易感性做了综述,并就淋巴丝虫病媒介与乙脑媒介做了概要。 | 郑学礼 | 2014 | 中国病原生物学杂志2014，9，2： | 41 |
| 2 | 致倦库蚊主要组织结构的石蜡切片观察显示文摘【目的】蚊虫是传播人类多种疾病的重要媒介害虫,对其组织形态学的认识是开展众多领域研究的基础。本文通过研究致倦库蚊Culex pipiensquin quefasciatus成虫组织结构及形态,为媒介蚊虫的抗药性研究及有效防治提供基础材料。【方法】采用改进的石蜡切片法和HE染色,结合活体内脏器官解剖及光学显微镜观察,从形态学和组织学水平对致倦库蚊组织结构做详尽展示。【结果】获得结构完整、染色清晰、定位准确的消化排泄系统、生殖系统、神经系统、呼吸系统等HE染色石蜡切片。【结论】探讨了改进制片和染色过程中一些步骤及注意事项。研究结果为利用原位杂交、免疫组化等方法研究蚊虫体内抗药性基因的准确定位及基因功能分析提供了可靠的基础。 | 闫亮珍 乔传令 张建珍 马恩波 崔峰 | 2011 | 昆虫学报2011，54，3： | 9 |
| 3 | Screening for metronidazole-resistance associated gene fragments of H pylori by suppression subtractive hybridization显示文摘AIM: To screen for metronidazole (MTZ)-resistance associated gene fragments of H pylori by suppression subtractive hybridization (SSH). METHODS: Five MTZ-resistant (tester, T) and 1 MTZ-susceptible (driver, D) clinical H pylori isolates were selected. Genomic DNAs were prepared and submitted to RsaⅠdigestion. Then two different adaptors were ligated respectively to the 5'-end of two aliquots of the tester DNA fragments and SSH was made between the tester and driver DNAs. The specific inserts of tester strains were screened and MTZ-resistance related gene fragments were identified by dot blotting. RESULTS: Among the randomly selected 120 subtractive colonies, 37 DNA fragments had a different number of DNA copies (≥ 2 times) in resistant and susceptible strains and 17 of them had a significantly different number of DNA copies (≥ 3 times). Among the sequences obtained from the 17 DNA fragments, new sequences were found in 10 DNA fragments and duplicated sequences in 7 DNA fragments, representing respectively the sequences of depeptide ABC transporter periplasmic dipeptide-binding protein (dppA), permease protein (dppB), ribosomal protein S4 (rps4), ribonuclease Ⅲ (rnc), protease (pqqE), diaminopimelate epimerase (dapF), acetatekinase (ackA), H pylori plasmid pHP51 and H pylori gene 1334. CONCLUSION: Gene fragments specific to MTZ-resistant H pylori strains can be screened by SSH and may be associated with MTZ-resistant H pylori. | Ai-Qing Li Ning Dai Jie Yan Yong-Liang Zhu | 2007 | World Journal of Gastroenterology2007，13，12： | 3 |
| 4 | 松墨天牛核糖体蛋白(RPS15A)cDNA的克隆及农药胁迫对其表达的影响显示文摘【目的】研究不同类型农药胁迫下松墨天牛核糖体蛋白基因表达的变化,为靶标防治松树重要害虫松墨天牛提供理论依据和参考。【方法】从构建的松墨天牛cDNA文库中获得表达序列标签(EST),用Blast程序从GenBank数据库中查找同源序列,克隆得到松墨天牛的一个核糖体蛋白基因;用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测11种农药胁迫下该基因的表达。【结果】从松墨天牛cDNA文库中获得1条EST序列与昆虫核糖体蛋白S15A(RPS15A)同源的基因,命名为MaRPS15A。MaRPS15AcDNA长504bp,含有5′、3′非编码区和长393bp的开放阅读框,编码130个氨基酸,预测的蛋白质分子质量为14.75ku,理论等电点为9.95。MaRPS15A与赤拟谷盗(Tribolium castaneum)核糖体蛋白RPS15A的相似性为98%,与其他昆虫核糖体蛋白RPS15A的相似性大于88%。除溴氰菊酯外,其他农药胁迫导致MaRPS15A相对表达量下降。【结论】成功克隆了松墨天牛核糖体蛋白基因MaRPS15A(GenBank登录号:KJ930032)。大多数农药抑制了MaRPS15A的表达,表明松墨天牛受到了不利影响。 | 罗淋淋 蔡紫玲 林同 | 2016 | 西北农林科技大学学报(自然科学版)2016，44，2： | 3 |
| 5 | 生物芯片在病原体检测中的研究进展显示文摘生物芯片作为一种高通量的基因检测技术,在多个研究领域已广泛应用,本文介绍了生物芯片技术的基本原理,综述了其在病原体检测中的研究进展。 | 林琳 马雅军 | 2011 | 中国病原生物学杂志2011，6，3： | 2 |
| 6 | 淡色库蚊抗药性相关基因NYD-Ch和NYD-Tr的表达与初步鉴定显示文摘目的 淡色库蚊抗药性相关基因NYD Ch(糜蛋白酶 )和NYD Tr(胰蛋白酶 )表达与鉴定。 方法 以淡色库蚊抗性品系全长cDNA文库为模板 ,采用PCR方法扩增出抗性品系中高表达的NYD Ch和NYD Tr基因 ,经T/A克隆测序鉴定 ,将扩增产物用NotI、EcoRI双酶切后作为插入片段 ,与具有相同粘性末端的融合表达质粒 pET 2 8a(+ )连接 ,转化入表达菌株E .coliBL2 1中 ,取含重组表达质粒的重组菌株以IPTG进行诱导表达 ,表达产物以SDS PAGE电泳和小鼠抗NYD Ch和NYD Tr抗血清进行Westernblot分析鉴定。 结果 NYD Ch和NYD Tr基因开读框大小分别为816bp和 786bp ,预计可分别编码 2 72个和 2 62个氨基酸。对应分子质量大小分别为 2 9.4ku和 2 8ku ,加上pET 2 8a(+ )载体融合部分氨基酸 ,表达产物条带应在 3 3ku附近 ,与SDS PAGE蛋白电泳胶上蛋白条带一致。Westernblot分析确认诱导后的 pET 2 8a(+ ) /NYD Ch和 pET 2 8a(+ ) /NYD Tr在分子质量约 3 3ku处出现 1条与小鼠抗NYD Ch和NYD Tr抗血清特异反应的条带。 结论 NYD Ch和NYD Tr基因在大肠杆菌中获得表达 ,Westernblot分析表明该蛋白为目的蛋白。 | 李秀兰 杨明夏 胡莺 沈波 马磊 公茂庆 朱昌亮 | 2003 | 中国寄生虫病防治杂志2003，16，6： | 1 |
| 7 | 糖原分支酶基因体外增强淡色库蚊抗药性的研究显示文摘目的构建淡色库蚊糖原分支酶基因(GBE)的昆虫表达载体,通过细胞转染法鉴定其与蚊虫抗药性相关的关系。方法用基因重组方法构建GBE的昆虫表达载体;通过脂质体转染法将昆虫表达载体转入伊蚊C6/36细胞,继而通过观察细胞形态及3H TdR掺入法检测稳定表达GBE基因的细胞对溴氰菊酯杀虫剂的敏感性。结果成功构建GBE基因的昆虫表达载体同时通过筛选获得稳定表达该基因的细胞株。3H TdR掺入法结果显示转染GBE基因能够提高细胞的存活率,并与对照组差异有显著性(P<0.05)。结论 GBE基因在与淡色库蚊溴氰菊酯抗性相关,且其在细胞对抗溴氰菊酯的毒性作用中有保护作用。 | 孙静 张雅娟 肖洋 黄静芳 孙中文 易丽娴 陶鸿 | 2012 | 中国现代医学杂志2012，22，13： | 0 |
| 8 | 抑制性差减杂交技术在蚊虫研究中的应用显示文摘抑制性差减杂交技术(suppression subtractive hybridization)是在差减杂交和抑制性PCR技术的基础上发展起来的鉴别差异表达基因的实验方法,用于分离2种具有相同或者相似遗传背景,但是表型上有差异的生物样品中差异表达的基因。这项技术在蚊虫许多研究领域,如抗药性、病原体感染、生理特性等得到广泛的应用。本文对抑制性差减杂交技术在蚊虫各研究领域的应用情况进行了综述。 | 刘斯璐 毛芸 乔传令 崔峰 | 2012 | 应用昆虫学报2012，49，6： | 0 |
| 9 | 抗药性基因克隆技术研究进展显示文摘综述了近几年来抗药性基因克隆技术的研究进展。对RAPD-PCR、单链构象多态性(SSCP)、差异显示PCR(DDRT-PCR)、代表性差异分析技术(representational difference analysis, RDA)、抑制消减杂交法(suppression subtractive hybridization, SSH)、获得全长基因的消减杂交法(full length geneobtainable subtractive hybridization)、基因芯片技术、基因表达系统分析(serial analysis of gene expression,SAGE)的技术和从蛋白质水平克隆抗药性基因的双向电泳技术(two-dimensional gel electrophoresis)、噬菌体表面全套抗体库技术(phage display antibody repertoire library technique)、核糖体展示抗体库技术等方法的特点、优缺点及适用性进行了评述。 | 陈长军 周明国 | 2004 | 农药2004，43，2： | 0 |
| 10 | 抑制差减杂交技术筛选幽门螺杆菌对甲硝唑耐药相关DNA片段显示文摘目的筛选幽门螺杆菌(Hp)临床分离菌株对甲硝唑耐药的相关DNA片段。方法从浙江大学医学院附属邵逸夫医院消化内科就诊患者胃粘膜活检标本中分离培养Hp。采用二倍平皿稀释法确定Hp菌株对甲硝唑的耐药性。分别选取敏感菌和耐药菌各1株,提取其基因组DNA,采用抑制差减杂交技术分别以其中1株作为被检菌,另1株作为参考菌进行基因组差异研究。结果73.8%(31/42)临床分离的Hp菌株对甲硝唑耐药。耐药株共检出10余个大小约在200~1000bp的特异性DNA片段。结论通过抑制差减杂交技术可筛选出耐药株和敏感株各自特异的DNA片段。 | 李爱清 戴宁 朱永良 严杰 | 2004 | 浙江医学2004，26，3： | 0 |
| 11 | 幽门螺杆菌对甲硝唑耐药相关基因片段的筛选及克隆分析显示文摘目的:筛选幽门螺杆菌(Hp)对甲硝唑耐药相关基因片段。方法:以5株临床分离的耐药株作为被检菌,1株敏感株作为参考菌,采用抑制差减杂交技术进行基因组差异研究,获取Hp对甲硝唑耐药相关的基因片段,并以斑点杂交方法对所获的基因片段进行了杂交鉴定。结果:在获得的差减阳性克隆中,经斑点杂交筛选后共有37个基因片段的拷贝数在耐药和敏感菌株中存在差异(2倍以上),而其中17个片段其拷贝数存在明显差异(3倍以上)。对以上17个差异片段进行单向测序,根据最高同源性比对结果,分别代表二肽ABC载体渗透酶(dppB)、二肽ABC载体结合蛋白(dppA)等10个基因的同源基因片段在耐药株中存在高拷贝数。结论:所获得的10个差异基因片段可能与幽门螺杆菌对甲硝唑耐药相关。 | 李爱清 戴宁 严杰 朱永良 | 2007 | 浙江大学学报(医学版)2007，36，5： | 0 |
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