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| 1 | 飞蝗细胞色素P450基因LmCYP6FD3的表达及其在杀虫剂解毒中的作用显示文摘【目的】研究飞蝗Locusta migratoria细胞色素P450基因的分子特性和生物学功能。【方法】搜索飞蝗转录组数据库,获得细胞色素P450基因cDNA序列,采用RT-PCR技术克隆目的基因cDNA全长序列。采用实时定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)技术测定其在飞蝗5龄若虫不同组织(胃盲囊、前肠、中肠、后肠、体壁、精巢、卵巢、肌肉、血淋巴、脂肪体和马氏管)中及不同发育阶段(卵、1-5龄若虫及成虫)的表达水平。采用RNA干扰(RNAi)技术沉默飞蝗2龄若虫细胞色素P450基因,检测基因的沉默效率,并研究该基因干扰后,2龄若虫对杀虫剂马拉硫磷、西维因和溴氰菊酯3种杀虫剂的敏感性。【结果】克隆获得飞蝗细胞色素P450基因的cDNA全长序列(Gen Bank登录号:KT316378),将其命名为LmCYP6FD3,其核苷酸序列全长为1 563 bp,编码521个氨基酸。研究发现该基因在飞蝗5龄若虫马氏管中高表达,其次是后肠和脂肪体中,在其他组织中的表达量相对较低;对LmCYP6FD3在飞蝗不同发育阶段的表达进行检测,发现该基因在飞蝗整个发育阶段均有表达,在若虫期表达量较高。RNA干扰结合杀虫剂生物测定结果表明,LmCYP6FD3在RNA干扰24 h时的沉默效率最高;2龄若虫点滴接触西维因,RNAi处理组(dsLmCYP6FD3注射组)与对照组(ds GFP注射组)相比,死亡率提高了32%。【结论】克隆获得飞蝗LmCYP6FD3的cDNA全长序列,该基因在飞蝗马氏管中高表达,并可能参与西维因在飞蝗体内的解毒代谢。 | 朱文雅 吴海花 张学尧 刘娇 张建珍 马恩波 | 2017 | 昆虫学报2017，60，7： | 5 |
| 2 | 马尾松PmCYP77A1基因的克隆及表达分析显示文摘在进行马尾松抗虫材料转录组测序分析时发现一个编码CYP77A1的cDNA,命名为PmCYP77A1。序列分析结果显示,该基因全长1 620 bp,编码539个氨基酸。氨基酸序列分析表明其具有CYP450家族基因的保守结构域,但CYP77A1基因中的FXXGXXXCXG保守特征序列最后一个碱基被A碱基所代替。与其他植物核酸序列进行比对覆盖率和同源性均较差,而氨基酸序列比对覆盖率达到88%~96%,但同源性不高,基本都在50%~55%之间,PmCYP77A1与白云杉遗传聚类最近,与其他被子植物遗传聚类较远。利用荧光定量PCR技术分析得知,PmCYP77A1在马尾松的不同组织中均有表达,其中在嫩茎、雌雄花和嫩叶中的表达量较高,而在球果、成熟组织和根系中的表达量最低。在不同抗虫材料日变化中PmCYP77A1表达量出现先升高后降低的表达趋势,该基因在抗虫材料中表达启动早。研究结果将为进一步研究PmCYP77A1的生物学功能及在马尾松抗虫防御中的作用机理奠定基础。 | 陈虎 谭健晖 徐慧兰 唐生森 冯源恒 杨章旗 | 2017 | 基因组学与应用生物学2017，36，3： | 1 |
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