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| 1 | 胶原酶消化时间及质量浓度对大鼠胰岛细胞分离的影响显示文摘背景:胶原酶消化方法是胰岛细胞分离技术中关键的第1步,其成败关系到胰岛细胞移植的存活与功能。目的:针对不同质量浓度和同一质量浓度条件下不同时间点胶原酶分离纯化所获得胰岛细胞的效果进行对比,以确定理想的胶原酶分离胰岛细胞的标准化方案。设计、时间及地点:单一样本观察,细胞学体外观察,于2006-09/2007-05在解放军总医院第二附属医院全军器官移植实验室完成。材料:胰岛细胞供体为SD大鼠。将32只大鼠按随机数字表法分为4组,即胶原酶0.5g/L,1.0g/L,1.5g/L及2.0g/L组,每组8只。方法:每组前4只动物,采用0.5,1.0,1.5,2.0g/L4种质量浓度的胶原酶对胰腺进行分离,消化过程中每隔10min为1个时间点,双硫腙染色观察分离情况,分析结果并确定最适合获取胰岛量最多的时间点。随后每组另外4只动物按照确定时间点停止消化,应用间断密度梯度离心法纯化胰岛,双硫腙和丫啶橙-碘丙啶荧光染色分析移植物形态和存活率,确定分离所需胶原酶的最佳浓度。主要观察指标:调整胶原酶的质量浓度与消化时间,荧光显微镜下胰岛细胞计数,评估胶原酶最佳质量浓度及消化时间。结果:分析后确定各组胰岛细胞最佳获取时间,胶原酶0.5g/L组50min,胶原酶1.0g/L组40min,胶原酶1.5g/L及2.0g/L组均为30min。胶原酶0.5g/L组分离并纯化后胰岛细胞收获量显著低于其他3组(P<0.01),胶原酶1.0g/L,1.5g/L及2.0g/L组两两比较差异无显著性意义(P>0.05)。胶原酶2.0g/L组胰岛细胞平均存活率显著低于其他3组(P<0.01),胶原酶0.5g/L,1.0g/L及1.5g/L组两两比较差异无显著性意义(P>0.05)。结论:在胰腺灌注良好情况下,胶原酶消化条件控制在质量浓度1.5g/L,时间30min进行水浴振荡可获得很好的分离效果。 | 范宇 石炳毅 钱叶勇 杜源 | 2009 | 中国组织工程研究与临床康复2009，13，20： | 4 |
| 2 | 兔骨髓成骨细胞同种异体移植免疫反应的初步观察显示文摘以观察新生兔骨髓诱导分化为成骨细胞的能力 ,探讨同种异体成骨细胞移植的可行性 ,为进一步的研究奠定基础。取新生新西兰大白兔胫骨骨髓 ,分离后加入条件培养液体外培养。传 5代后对细胞进行形态学、碱性磷酸酶 (ALP )染色及体外矿化能力的检测。将冻存复苏的细胞以明胶海绵吸附 ,植入异体成年兔皮下、肌肉内 ,第 2、 4、 8、 12周时取材观察 ,分析其成骨能力及免疫排斥反应情况。结果显示体外诱导培养的骨髓成骨细胞是一较纯的细胞系 ,以带突起的梭形细胞为主 ,ALP染色阳性 ,连续培养 4 0d可见矿化结节形成。异体植入的成骨细胞大部分存活 ,4周后开始有类骨基质形成 ,并可见不规则的矿化骨组织 ,植入细胞周围仅见少量的淋巴细胞和嗜酸粒细胞浸润。骨髓基质细胞具有多向分化的潜力 ,异体植入的细胞仍保持基本的生物学功能 ,免疫排斥反应比较轻微 。 | 吴凯 张勇 谈万业 刘秀云 王春海 | 2003 | 上海免疫学杂志2003，23，1： | 4 |
| 3 | 胰岛移植的研究进展显示文摘 | 刘铮 | 2005 | 现代中西医结合杂志2005，14，6： | 3 |
| 4 | 糖尿病治疗进展显示文摘 | 王贵荣 | 2003 | 现代医药卫生2003，19，9： | 3 |
| 5 | 骨髓间充质干细胞在1型糖尿病治疗中的应用显示文摘骨髓间充质干细胞是一种既具有自我更新能力又有多向分化潜能的细胞,研究显示骨髓间充质干细胞将可用于许多疾病的治疗,如心肌坏死、肝功能衰竭、1型糖尿病等.本文概述了骨髓间充质干细胞研究现状,结合现阶段糖尿病治疗进展并比较其它方法的治疗效果,阐述了骨髓间充质干细胞在治疗1型糖尿病中的运用前景. | 肖承佐 章乐虹 | 2005 | 现代临床医学生物工程学杂志2005，11，6： | 2 |
| 6 | 胰岛细胞移植治疗糖尿病的现状与展望显示文摘糖尿病是多基因遗传与环境因素长期共同作用所导致的一组以慢性高血糖为特征的代谢疾病;由于体内胰岛素相对或绝对不足或靶细胞对胰岛素敏感性降低(受体或受体后缺陷)所引起的内分泌代谢性疾病。1997年WHO报告.全世界约有1.35亿患者,预测到2050年将达3亿.严重威胁着人类的健康。胰腺移植能获得生理性的血糖调节.但手术创伤大.并发症凶险, | 万国峰 张胜兰 | 2008 | 实用医药杂志2008，25，6： | 2 |
| 7 | 生长激素、肝细胞生长因子和烟酰胺对人胎胰岛细胞体外增殖的影响显示文摘目的 :探讨生长激素 (GH) ,肝细胞生长因子 (HGF)和烟酰胺 (NIC)对体外培养人胎胰岛细胞增殖的影响。方法 :胶原酶消化法制胰岛样细胞团 (ICCs) ,接种于 2 4孔培养板培养 ,在实验组中分别加入GH(1 0 0 μg/L) ,HGF(2 5 μg/L)和NIC(1 0mmol/L)及其组合 ,同时设空白组为对照 ,间日调换培养液并测定胰岛素分泌量 ,于培养 6d末测定胰岛细胞内胰岛素含量 ,收集细胞计数 ,观察细胞有丝分裂相及胰岛细胞分布情况。结果 :①在人胎胰岛细胞体外培养第 2d、第 4d、第 6d胰岛素分泌量各实验组均高于空白组 (P <0 .0 1 ) ,以GH +HGF +NIC组最高 ,GH +HGF +NIC组与GH +NIC组、GH +HGF组、HGF +NIC组相比 ,差异无统计学意义 ,但与GH组、HGF组、NIC组比较 ,差异有统计学意义 (P <0 .0 5 )。②各组胰岛细胞内胰岛素含量与胰岛样细胞团数均呈正相关 ,r均大于 0 .80 (P <0 .0 5 )。结论 :GH、HGF、NIC均能显著促进体外培养的人胎胰岛细胞的增殖 ,胰岛素含量及分泌量增加 ,3者有协同作用。 | 陈永兵 严律南 彭珂 刘立新 周祥 | 2003 | 郑州大学学报(医学版)2003，38，6： | 1 |
| 8 | 胰岛细胞移植治疗糖尿病的研究进展显示文摘 | 侯续伟 任甫 | 2007 | 社区医学杂志2007，5，10S： | 0 |
| 9 | 胰岛细胞移植的现况显示文摘 | 申哲洙 | 2001 | 吉林医学2001，22，5： | 0 |
| 10 | 肝胰岛细胞联合移植的临床应用(附1例报告)显示文摘目的评估肝胰岛细胞联合移植治疗终末期肝病和糖尿病的可行性和疗效。方法对1例原有2型糖尿病史的原发性肝癌、肝炎肝硬化患者,施行肝移植的同时进行胰岛细胞经门静脉肝内移植,观察移植肝功能的变化,移植前后C肽、糖化血红蛋白的变化。结果患者胰岛素的注射量术前40~60U/d,术后第45天降至20~30U/d,术后7月完全脱离胰岛素,血糖保持在正常范围。结论对肝脏功能衰竭的糖尿病患者施行肝胰岛细胞联合移植是可行而有效的。 | 蔡兵 吴鸣宇 赵翼 谢平 穆惠君 张滨 | 2006 | 肝胆胰外科杂志2006，18，5： | 0 |
| 11 | 组织化胰腺的体外构建及其在细胞移植中的作用显示文摘目的探讨组织工程化胰腺的体外构建及其在细胞移植中的作用。方法取SD大鼠8只,采用旋转壁式生物反应器,建立微重力环境下共培养SD大鼠胰岛和睾丸支持细胞,建立糖尿病SD大鼠模型,进行胰岛移植。移植后,检测各组大鼠血糖水平,摘取30 d以上保持血糖正常水平的大鼠肾脏组织,清洗后固定,包埋、切片,进行苏木素-伊红(HE)染色,显微下观察,并进行Fas-L、胰岛素免疫组化学法染色,对大鼠移植物进行鉴定并检测葡萄糖糖耐量。结果分离纯化的睾丸支持细胞贴壁后于培养箱中继续培养24 h,细胞基本已全部贴壁生长,细胞立体感较强,显微镜下可见极少量球形精细胞贴附于睾丸细胞上,经台盼蓝染色后活细胞透亮,总数占95%以上。HE染色可见细胞形态呈宽大柱状或纤维样,排列紧密,多个一起存在时融合成片,界限不清,呈单层膜状,一般有3~4个突起,突起相互连接,胞质铺展较大,可见多量大小不一的空泡状结构。培养24 h后,睾丸支持细胞-胰岛球形细胞复合物逐步形成,复合物呈球形,被支持细胞包裹;Fas-L免疫组织切片染色可见支持细胞呈阳性,与胰岛素阳性的β细胞检测结果与透射电镜观察结果一致,共培养的胰岛生长状态相对较好。从血糖水平结果总结,微重力环境下共培养睾丸支持细胞-胰岛细胞复合物能够提高胰岛活性,降低其免疫原性;与接受新鲜胰岛移植的SD大鼠相比,复合物移植使模型大鼠保持血糖正常时间明显更久。结论移植睾丸支持细胞-胰岛细胞复合物的模型大鼠体内胰岛对葡萄糖保持明显的敏感性,复合物移植组大鼠平均血糖基本在2 h内可以恢复正常,与正常检测结果接近。 | 杨战锋 李晓勇 周百中 陈升阳 尚文俊 | 2018 | 中国老年学杂志2018，38，4： | 0 |
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