| 2 | 双峰驼β-NGF基因的克隆及在生殖轴系的表达显示文摘选取健康的雌性双峰驼(5~6岁)的下丘脑、垂体、卵巢、子宫角和输卵管等组织,通过RT-PCR扩增CDS全序列,并进行生物信息学分析;通过qRT-PCR,免疫组织化学染色技术(immunohistochemistry,IHC)和蛋白免疫印记(Western blot)技术检测β-神经生长因子(β-nerve growth factor,β-NGF)在各组织的表达。结果显示,双峰驼β-NGF基因的CDS区(783 bp)可编码261个氨基酸残基,分子式为C_(1219)H_(1914)N_(402)O_(365)S_(11),编码的原子个数为3911,相对分子质量为28.39374 kDa,理论等电点为9.57,β-NGF编码的为非跨膜可溶性蛋白,其二级结构由α-螺旋、延伸链和无规则卷曲构成,该蛋白有22个丝氨酸磷酸化位点,11个苏氨酸磷酸化位点,2个酪氨酸磷酸化位点;同源性分析显示,双峰驼β-NGF的核苷酸序列与单峰驼、羊驼、野猪、山羊、马、黄牛、人、犬、家鼠及家兔的同源性分别为99.6%,99.0%,92.8%,92.6%,91.7%,91.0%,89.5%,89.1%,84.4%,83.7%;IHC结果显示,β-NGF在双峰驼的下丘脑细胞、垂体嗜色细胞和嫌色细胞、卵巢粒细胞、膜细胞和间质细胞、子宫内膜腺上皮细胞和输卵管黏膜上皮细胞均有阳性反应;qRT-PCR结果显示,β-NGF在子宫角中表达量最高,且极显著高于其他组织(P<0.01);Western blot结果显示,β-NGF蛋白在子宫角中表达量最高,且极显著高于下丘脑和输卵管(P<0.01),显著高于垂体(P<0.05)。结果表明,本试验成功克隆出双峰驼β-NGF基因的CDS区,其保守性较高,且该蛋白二级结构有3种折叠方式;β-NGF在子宫角表达水平较高,提示β-NGF可能通过子宫内膜参与了双峰驼的诱导排卵过程。 | 王杰 王琪 张勇 南京宏 成力童 赵兴绪 | 2022 | 中国兽医学报2022,42,11: | 0 |
| 3 | FSH对性成熟后公鸡睾丸中NGF及其受体TrkA表达的影响显示文摘本试验通过对性成熟公鸡睾丸组织中神经生长因子(nerve growth factor, NGF)及其受体酪氨酸激酶(tyrosine kinase, TrkA)的表达定位,研究促卵泡素(FSH)对睾丸中NGF及TrkA mRNA表达的影响。选用28只20周龄的庄河大骨鸡公鸡,随机分为4组,分别是对照组和3个FSH处理组。处理组连续静脉注射FSH5天,第6天采集睾丸组织。结果显示:公鸡睾丸组织中存在NGF和TrkA的mRNA及蛋白,且二者主要表达于精原细胞、精母细胞和精子细胞;FSH处理组的TrkA mRNA水平显著高于对照组(P<0.05),且TrkA mRNA的表达水平随着FSH浓度的增加而增加,但NGF mRNA的表达水平无显著性差异(P>0.05)。总之,以上研究结果表明公鸡睾丸组织中存在NGF和TrkA,且FSH可能通过调节TrkA的表达影响NGF在精子生成过程中的作用。 | 王金凤 鲁怡 戴天殊 张洁慧 王烁 邹爽 马巍 王春强 | 2020 | 中国农学通报2020,36,36: | 0 |