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| 1 | 微生物对聚丙烯酰胺降解作用的研究进展显示文摘利用微生物降解残留在环境中的聚合物是近年来研究的一个热点。聚丙烯酰胺(PAM)是一种较难处理的高分子聚合物,本文从微生物产生的酶对聚合物的作用方面进行了综述,概述了微生物对不同类型的聚丙烯酰胺的降解作用,总结了聚丙烯酰胺生物降解的评价手段。基于真菌降解复杂结构高分子方面的非特异性降解酶系统,提出了降解PAM的新途径。 | 包木太 彭杰 陈庆国 | 2011 | 化工进展2011，30，9： | 26 |
| 2 | 酿脓链球菌Cas9核酸酶的重组表达、分离纯化及酶学特性显示文摘【背景】Cas9核酸酶是一种RNA引导的核酸内切酶,可与单链向导RNA(single-guide RNA,sgRNA)形成稳定的核糖核蛋白复合物,识别和切割特定的核苷酸片段。由于其具备高灵活性和高效率的特点,目前已经成为基础科学研究领域和临床治疗方法中使用最广泛的基因编辑工具。【目的】为Cas9核酸酶的合理开发和利用提供理论依据。【方法】利用大肠杆菌表达系统表达野生型酿脓链球菌(Streptococcus pyogenes)Cas9核酸酶,经硫酸铵沉淀和镍柱亲和层析两步纯化获得较高纯度表达产物,并对其热稳定性、pH稳定性、金属离子的影响等酶学特性进行研究。【结果】经高密度发酵后,大肠杆菌湿菌重达191.0 g/L。纯化后酿脓链球菌Cas9核酸酶的比酶活达641.29 U/mg,纯化倍数为16.02,收率为46.40%。Cas9核酸酶在25-42°C保温2 h后剩余酶活保持在65%以上,而在45°C保温15 min后全部失活;其在pH 6.0-10.0范围内稳定性较高,剩余酶活大于68%,在pH9.0时稳定性最高;0.5-20.0mmol/L浓度范围内的Mg^2+对该酶有激活作用,10.0 mmol/L的Mg^2+可使该酶酶活力提高约23%;Ba^2+、Co^2+、Ca^2+、Mn^2+、Cu^2+、Fe^2+、Zn^2+对该酶有不同程度的抑制作用,其中0.5 mmol/L的Cu^2+和Fe^2+对Cas9核酸酶有完全抑制作用。【结论】异源表达并纯化出具有较高纯度和较高酶活力的酿脓链球菌Cas9核酸酶,并对其酶学特性进行了初步研究,该结果对CRISPR/Cas9技术的进一步推广和应用有一定的指导意义。 | 鲍玲娜 吴勇 林军 东圆珍 黄宗庆 | 2020 | 微生物学通报2020，47，7： | 2 |
| 3 | 逐级盐析结合双水相法纯化贯筋藤凝乳酶显示文摘为了高效制备贯筋藤凝乳酶,利用逐级盐析结合双水相萃取对贯筋藤凝乳酶进行纯化,研究成相物质、聚乙二醇(PEG)/盐最佳纯化配比及酶用量对酶凝乳纯化的影响,应用SDS-PAGE电泳技术检测贯筋藤凝乳酶的纯度。结果表明:当硫酸铵饱和度区间为20%~40%,贯筋藤粗酶比活力较高,为167.846 MCA/mg;当PEG相对分子质量为6000且质量分数为20.57%、盐相为硫酸铵且质量分数为14.74%,酶用量为1.0 m L时,贯筋藤凝乳酶活力提高1.87倍。电泳图显示贯筋藤凝乳酶纯度较高,分子量约为25 kDa。利用双水相法分离纯化可获得高纯度的贯筋藤凝乳酶,可为贯筋藤凝乳酶后续规模化生产及应用提供参考价值。 | 赵琼 王庭伊 黄艾祥 | 2020 | 食品工业科技2020，41，1： | 1 |
| 4 | 海洋中产胆固醇氧化酶细菌的筛选及其发酵条件优化显示文摘利用菌落染色法从海洋中分离、筛选高产胆固醇氧化酶的菌株,所得菌株经分子生物学技术进行鉴定,采用单因素试验对其产酶条件进行优化,并利用硫酸铵沉淀、凝胶过滤层析法对酶进行分离纯化。结果表明,以胆固醇为唯一碳源,筛选出具有高胆固醇氧化酶活性的菌株XLH059,酶活力为0.407 U/m L;菌株XLH059被鉴定为蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus);菌株XLH059的最佳产酶条件为发酵周期24 h,发酵温度26℃,接种量10%,初始pH值7.0,装液量100 m L/250 m L,转速200 r/min,最佳碳源和氮源分别为葡萄糖和蛋白胨,胆固醇含量0.5%。在此优化条件下,胆固醇氧化酶活力为0.72 U/m L,是优化前的1.76倍;经分离纯化获得分子质量约为59 kDa的胆固醇氧化酶。 | 迟乃玉 希伦 刘洋 于爽 李美玉 张庆芳 | 2019 | 中国酿造2019，38，4： | 1 |
| 5 | 产酸克雷伯氏菌氢酶分离提纯与特性的初步研究显示文摘采用硫酸铵沉淀和柱层析(DEAE-Sepharose F.F.,Sephacryl S-200,TSK-DEAE)初步分离纯化了产酸克雷伯氏菌(Klebsiella oxytoca)HP1可溶性氢酶,研究了温度、pH值、电子载体等对氢酶催化放氢活性的影响.研究表明,可溶性氢酶催化放氢的最适温度为30℃,催化放氢的最适pH值为7.5,甲基紫晶(MV)是氢酶催化放氢的最适人工电子载体,氧对氢酶催化活性有较大的抑制作用. | 徐云玲 龙传南 徐惠娟 邬小兵 张凤章 | 2006 | 厦门大学学报(自然科学版)2006，45，5： | 1 |
| 6 | 硫酸盐还原菌氢化酶的分离纯化及酶学性质研究显示文摘硫酸盐还原菌氢化酶上清液经硫酸铵沉淀、透析、DEAE-52阴离子交换层析和Sephadex G-150凝胶过滤层析纯化出氢化酶,纯化倍数为34.7,酶回收率为34.1%.对纯化酶性质进行研究,结果表明:该酶是由分子量为46 KD和34 KD的两个亚基构成的总分子量为80 KD的αβ异二聚体;酶催化最适温度和pH值范围分别为45℃和6.5~8.5,在34~55℃和pH=6~9.2范围内具有较稳定的催化放氢活力;光谱扫描分析和激活剂及抑制剂测定表明该酶属含铁硫中心的唯铁氢化酶. | 常磊峰 邱广亮 陈香君 | 2008 | 内蒙古师范大学学报(自然科学汉文版)2008，37，3： | 0 |
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